中文摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
第一章 综述 | 第8-15页 |
1.1 TLR信号通路简述 | 第8-9页 |
1.2 TLR与适应性免疫反应 | 第9-10页 |
1.3 IL-12 与TH1 免疫反应 | 第10-11页 |
1.4 IL-12 的表达调控 | 第11-12页 |
1.5 转录因子C-FOS和免疫信号调控 | 第12-13页 |
1.6 MTOR与TLR信号通路 | 第13-14页 |
1.7 TLR信号在疫苗研发中的作用 | 第14-15页 |
第二章 材料和方法 | 第15-34页 |
2.1 实验材料 | 第15-17页 |
2.1.1 小鼠 | 第15页 |
2.1.2 实验试剂 | 第15-17页 |
2.2 实验仪器 | 第17-18页 |
2.3 实验方法 | 第18-34页 |
2.3.1 骨髓来源的巨噬细胞的制备 | 第18-19页 |
2.3.2 骨髓来源的树突状细胞的制备 | 第19-20页 |
2.3.3 腹腔巨噬细胞的制备 | 第20页 |
2.3.4 RNA样品的制备 | 第20-21页 |
2.3.5 细胞总蛋白的制备 | 第21-22页 |
2.3.6 酶联免疫吸附实验样品的制备 | 第22页 |
2.3.7 RNA的提取 | 第22-23页 |
2.3.8 反转录PCR | 第23页 |
2.3.9 实时荧光定量PCR | 第23-24页 |
2.3.10 ELISA检测细胞因子分泌量 | 第24-25页 |
2.3.11 细胞的胞质分离技术 | 第25页 |
2.3.12 蛋白质免疫共沉淀 | 第25-26页 |
2.3.13 双荧光素酶报告基因实验 | 第26-27页 |
2.3.14 WESTERN BLOT检测蛋白表达量 | 第27-29页 |
2.3.15 染色质免疫共沉淀 | 第29-32页 |
2.3.16 用不同佐剂与鸡卵白蛋白抗原肽免疫小鼠 | 第32页 |
2.3.17 用不同佐剂与乙肝病毒表面抗原免疫小鼠 | 第32-33页 |
2.3.18 用不同佐剂与丙肝病毒E2 蛋白免疫小鼠 | 第33页 |
2.3.19 数据分析处理与作图 | 第33-34页 |
第三章 实验结果 | 第34-46页 |
3.1 筛选参与TLR调节IL-12 表达和TH1 反应的蛋白激酶 | 第34-35页 |
3.2 蛋白激酶PI3K、ERK和MTOR参与LPS诱导的IL-10 表达 | 第35-37页 |
3.3 RAPAMYCIN,WORTMANNIN和U0126 通过抑制MTOR信号调节IL-12/ IL-10表达 | 第37-39页 |
3.4 C-FOS通过调节NF-ΚB的活性来调控TLR诱导的IL-12 和IL-10 表达 | 第39-40页 |
3.5 MTOR和C-FOS调控TLR信号诱导的基因表达 | 第40-42页 |
3.6 用RAPAMYCIN能增强TLR诱导的抗HBV TH1 反应 | 第42-44页 |
3.7 用RAPAMYCIN+MPL作为佐剂能显著增强HCV疫苗的保护效果 | 第44-46页 |
第四章 讨论 | 第46-48页 |
参考文献 | 第48-53页 |
硕士阶段已发表和待发表的文章 | 第53-54页 |
致谢 | 第54-56页 |