毒死蜱对斑马鱼胚胎的毒性机制研究
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-20页 |
| 1.1 有机磷农药的概况 | 第14-16页 |
| 1.1.1 有机磷农药的发展概况 | 第14页 |
| 1.1.2 有机磷农药的作用机理 | 第14-15页 |
| 1.1.3 有机磷农药的污染及危害 | 第15-16页 |
| 1.2 毒死蜱简介 | 第16页 |
| 1.3 环境内分泌干扰物 | 第16-17页 |
| 1.4 斑马鱼在毒理学研究中的应用 | 第17-18页 |
| 1.4.1 斑马鱼简介 | 第17页 |
| 1.4.2 斑马鱼的优势 | 第17-18页 |
| 1.4.3 斑马鱼及其胚胎在毒理学中的应用 | 第18页 |
| 1.5 本研究的内容、目的及意义 | 第18-20页 |
| 第二章 毒死蜱对斑马鱼胚胎的毒性作用 | 第20-25页 |
| 2.1 实验材料 | 第20页 |
| 2.1.1 试剂与材料 | 第20页 |
| 2.1.2 仪器 | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-21页 |
| 2.2.1 斑马鱼养殖 | 第20页 |
| 2.2.2 配鱼和收卵 | 第20页 |
| 2.2.3 毒性实验 | 第20-21页 |
| 2.2.4 统计与分析 | 第21页 |
| 2.3 实验结果 | 第21-23页 |
| 2.3.1 形态学观察 | 第21页 |
| 2.3.2 对胚胎孵化的影响 | 第21-22页 |
| 2.3.3 致畸作用 | 第22页 |
| 2.3.4 致死作用 | 第22-23页 |
| 2.4 讨论 | 第23-25页 |
| 第三章 毒死蜱毒性机制分析 | 第25-34页 |
| 3.1 实验材料 | 第25页 |
| 3.1.1 试剂与材料 | 第25页 |
| 3.1.2 仪器 | 第25页 |
| 3.2 实验方法 | 第25-27页 |
| 3.2.1 癌细胞的培养和处理 | 第25页 |
| 3.2.2 细胞周期分析 | 第25页 |
| 3.2.3 吖啶橙染色 | 第25-26页 |
| 3.2.4 相关基因的表达水平检测 | 第26-27页 |
| 3.3 实验结果 | 第27-32页 |
| 3.3.1 CPF对细胞增殖的影响 | 第27-29页 |
| 3.3.2 CPF对细胞凋亡的影响 | 第29-31页 |
| 3.3.3 CPF对神经系统的影响 | 第31-32页 |
| 3.4 讨论 | 第32-34页 |
| 第四章 斑马鱼转录组学分析 | 第34-42页 |
| 4.1 实验材料 | 第34页 |
| 4.1.1 试剂与材料 | 第34页 |
| 4.1.2 仪器和软件 | 第34页 |
| 4.2 实验方法 | 第34-35页 |
| 4.2.1 总RNA提取和质检 | 第34页 |
| 4.2.2 mRNA纯化和反转录 | 第34-35页 |
| 4.2.3 DNA片段的末端修复和加接头 | 第35页 |
| 4.2.4 DNA片段的富集 | 第35页 |
| 4.2.5 上机测序 | 第35页 |
| 4.2.6 数据处理与分析 | 第35页 |
| 4.3 实验结果 | 第35-40页 |
| 4.3.1 总RNA质检 | 第35-36页 |
| 4.3.2 转录组数据read质量控制 | 第36-37页 |
| 4.3.3 基因的差异表达 | 第37-39页 |
| 4.3.4 差异基因的GO富集分析 | 第39页 |
| 4.3.5 差异基因的信号通路分析 | 第39-40页 |
| 4.4 讨论 | 第40-42页 |
| 第五章 斑马鱼蛋白质组学分析 | 第42-54页 |
| 5.1 实验材料 | 第42-43页 |
| 5.1.1 试剂与材料 | 第42页 |
| 5.1.2 仪器 | 第42页 |
| 5.1.3 溶液配制 | 第42-43页 |
| 5.2 实验方法 | 第43-45页 |
| 5.2.1 总蛋白质的提取 | 第43页 |
| 5.2.2 Bradford法定量蛋白质 | 第43页 |
| 5.2.3 SDS电泳验证 | 第43页 |
| 5.2.4 酶解和肽段定量 | 第43-44页 |
| 5.2.5 标记肽段 | 第44页 |
| 5.2.6 SCX分级 | 第44页 |
| 5.2.7 毛细管高效液相色谱分析 | 第44页 |
| 5.2.8 质谱鉴定 | 第44页 |
| 5.2.9 数据分析 | 第44-45页 |
| 5.3 实验结果 | 第45-51页 |
| 5.3.1 标准曲线和蛋白浓度 | 第45页 |
| 5.3.2 SDS-PAGE检测 | 第45-46页 |
| 5.3.3 肽段浓度测定 | 第46页 |
| 5.3.4 肽段SCX分级后的色谱鉴定 | 第46-47页 |
| 5.3.5 质谱鉴定结果 | 第47页 |
| 5.3.6 蛋白质的差异表达 | 第47-49页 |
| 5.3.7 蛋白质的GO富集和COG注释分析 | 第49-51页 |
| 5.3.8 差异蛋白质的信号通路分析 | 第51页 |
| 5.4 讨论 | 第51-54页 |
| 第六章 全文结论 | 第54-56页 |
| 6.1 研究结果 | 第54页 |
| 6.2 创新点 | 第54页 |
| 6.3 展望 | 第54-55页 |
| 6.4 全文结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 附录 | 第62-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 作者简历 | 第66页 |
