摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
英文缩略表 | 第14-15页 |
第一章 引言 | 第15-24页 |
1.1 昆虫气味结合蛋白 | 第16-20页 |
1.1.1 气味结合蛋白的种类 | 第17页 |
1.1.2 气味结合蛋白OBPs的表达分布 | 第17-18页 |
1.1.3 气味结合蛋白OBPs的三维结构研究 | 第18-19页 |
1.1.4 气味结合蛋白OBPs的功能研究 | 第19-20页 |
1.2 化学感受蛋白CSPS研究进展 | 第20-21页 |
1.2.1 昆虫化学感受蛋白序列基本特征 | 第20页 |
1.2.2 已鉴定的昆虫化学感受蛋白 | 第20页 |
1.2.3 昆虫化学感受蛋白的分布 | 第20-21页 |
1.2.4 昆虫CSPs的功能 | 第21页 |
1.3 嗅觉受体研究进展 | 第21-22页 |
1.4 研究思路及意义 | 第22-23页 |
1.5 技术路线 | 第23-24页 |
第二章 西花蓟马感器扫描电镜观察 | 第24-33页 |
2.1 材料与方法 | 第24-25页 |
2.1.1 供试昆虫 | 第24页 |
2.1.2 仪器 | 第24页 |
2.1.3 试验方法 | 第24-25页 |
2.2 结果与分析 | 第25-31页 |
2.2.1 西花蓟马触角基本形态特征 | 第25页 |
2.2.2 西花蓟马触角感器类型、特征及分布 | 第25-28页 |
2.2.3 西花蓟马足感器类型、特征及分布 | 第28-31页 |
2.2.4 西花蓟马复眼感器类型、特征及分布 | 第31页 |
2.3 讨论 | 第31-33页 |
第三章 西花蓟马嗅觉相关蛋白基因分子克隆 | 第33-84页 |
3.1 材料与方法 | 第33-46页 |
3.1.1 供试昆虫 | 第33页 |
3.1.2 主要试剂 | 第33-34页 |
3.1.3 仪器设备 | 第34页 |
3.1.4 主要缓冲液和培养基的配方 | 第34-35页 |
3.1.5 试验方法 | 第35-45页 |
3.1.6 西花蓟马嗅觉相关蛋白基因的鉴定 | 第45页 |
3.1.7 序列分析和进化树构建 | 第45-46页 |
3.2 结果与分析 | 第46-83页 |
3.2.1 西花蓟马触角总RNA提取 | 第46页 |
3.2.2 西花蓟马嗅觉相关基因特异性片段扩增 | 第46-48页 |
3.2.3 西花蓟马嗅觉相关蛋白基因 3′-RACE | 第48-49页 |
3.2.4 西花蓟马嗅觉相关蛋白基因 5′-RACE | 第49-51页 |
3.2.5 目的基因全长cDNA序列的获取 | 第51页 |
3.2.6 西花蓟马FoccCSP1蛋白基因基本理化性质 | 第51-56页 |
3.2.7 西花蓟马FoccCSP2蛋白基本理化性质 | 第56-63页 |
3.2.8 西花蓟马FoccOBP1蛋白基本理化性质 | 第63-71页 |
3.2.9 西花蓟马FoccOBP2蛋白基本理化性质 | 第71-74页 |
3.2.10 西花蓟马FoccOR1蛋白基本理化性质 | 第74-83页 |
3.3 讨论 | 第83-84页 |
第四章 西花蓟马嗅觉相关蛋白基因表达谱分析 | 第84-95页 |
4.1 材料和方法 | 第84-86页 |
4.1.1 供试昆虫 | 第84页 |
4.1.2 试剂 | 第84页 |
4.1.3 仪器设备 | 第84页 |
4.1.4 RNA的提取 | 第84-85页 |
4.1.5 第一链cDNA的合成 | 第85页 |
4.1.6 Real-time qPCR | 第85-86页 |
4.2 结果与分析 | 第86-93页 |
4.2.1 FoccCSP1表达谱分析 | 第86-88页 |
4.2.2 FoccCSP2表达谱分析 | 第88-89页 |
4.2.3 FoccOBP1表达谱分析 | 第89-90页 |
4.2.4 FoccOBP2表达谱分析 | 第90-92页 |
4.2.5 FoccOR1表达谱分析 | 第92-93页 |
4.3 讨论 | 第93-95页 |
第五章 西花蓟马嗅觉相关蛋白的原核表达与纯化 | 第95-118页 |
5.1 材料与方法 | 第95-106页 |
5.1.1 供试昆虫 | 第95页 |
5.1.2 主要试剂 | 第95页 |
5.1.3 主要仪器设备 | 第95-96页 |
5.1.4 聚丙烯酰胺凝胶及电泳缓冲液的配制 | 第96-98页 |
5.1.5 试验方法 | 第98-106页 |
5.2 结果与分析 | 第106-117页 |
5.2.1 开放阅读框扩增 | 第106-107页 |
5.2.2 重组克隆质粒构建 | 第107-109页 |
5.2.3 重组表达质粒的鉴定 | 第109-110页 |
5.2.4 重组蛋白在大肠杆菌中的诱导表达 | 第110-112页 |
5.2.5 重组蛋白western杂交 | 第112-113页 |
5.2.6 分离重组蛋白 | 第113-115页 |
5.2.7 纯化重组蛋白 | 第115-116页 |
5.2.8 目的蛋白浓度测定 | 第116-117页 |
5.3 讨论 | 第117-118页 |
第六章 西花蓟马化学感受蛋白FOCCCSP2结合特性 | 第118-126页 |
6.1 材料和方法 | 第118-120页 |
6.1.1 试剂 | 第118页 |
6.1.2 仪器 | 第118-120页 |
6.2 结果与分析 | 第120-125页 |
6.2.1 西花蓟马化学感受蛋白FoccCSP2与 1-NPN报告子的荧光光谱分析 | 第120-122页 |
6.2.2 不同气味物质与 1-NPN和重组FoccCSP2蛋白的竞争结合分析 | 第122-125页 |
6.3 讨论 | 第125-126页 |
第七章 西花蓟马化学感受蛋白FOCCCSP1免疫电镜定位 | 第126-133页 |
7.1 材料与方法 | 第126-128页 |
7.1.1 试剂 | 第126页 |
7.1.2 仪器 | 第126页 |
7.1.3 缓冲液配方 | 第126-127页 |
7.1.4 试验方法 | 第127-128页 |
7.2 结果与分析 | 第128-132页 |
7.2.1 抗体最佳稀释浓度的确定 | 第128-130页 |
7.2.2 西花蓟马化学感受蛋白FoccCSP1免疫定位 | 第130-132页 |
7.3 讨论 | 第132-133页 |
第八章 全文结论 | 第133-135页 |
参考文献 | 第135-154页 |
致谢 | 第154-155页 |
作者简历 | 第155页 |