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西花蓟马嗅觉相关蛋白鉴定及功能研究

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
英文缩略表第14-15页
第一章 引言第15-24页
    1.1 昆虫气味结合蛋白第16-20页
        1.1.1 气味结合蛋白的种类第17页
        1.1.2 气味结合蛋白OBPs的表达分布第17-18页
        1.1.3 气味结合蛋白OBPs的三维结构研究第18-19页
        1.1.4 气味结合蛋白OBPs的功能研究第19-20页
    1.2 化学感受蛋白CSPS研究进展第20-21页
        1.2.1 昆虫化学感受蛋白序列基本特征第20页
        1.2.2 已鉴定的昆虫化学感受蛋白第20页
        1.2.3 昆虫化学感受蛋白的分布第20-21页
        1.2.4 昆虫CSPs的功能第21页
    1.3 嗅觉受体研究进展第21-22页
    1.4 研究思路及意义第22-23页
    1.5 技术路线第23-24页
第二章 西花蓟马感器扫描电镜观察第24-33页
    2.1 材料与方法第24-25页
        2.1.1 供试昆虫第24页
        2.1.2 仪器第24页
        2.1.3 试验方法第24-25页
    2.2 结果与分析第25-31页
        2.2.1 西花蓟马触角基本形态特征第25页
        2.2.2 西花蓟马触角感器类型、特征及分布第25-28页
        2.2.3 西花蓟马足感器类型、特征及分布第28-31页
        2.2.4 西花蓟马复眼感器类型、特征及分布第31页
    2.3 讨论第31-33页
第三章 西花蓟马嗅觉相关蛋白基因分子克隆第33-84页
    3.1 材料与方法第33-46页
        3.1.1 供试昆虫第33页
        3.1.2 主要试剂第33-34页
        3.1.3 仪器设备第34页
        3.1.4 主要缓冲液和培养基的配方第34-35页
        3.1.5 试验方法第35-45页
        3.1.6 西花蓟马嗅觉相关蛋白基因的鉴定第45页
        3.1.7 序列分析和进化树构建第45-46页
    3.2 结果与分析第46-83页
        3.2.1 西花蓟马触角总RNA提取第46页
        3.2.2 西花蓟马嗅觉相关基因特异性片段扩增第46-48页
        3.2.3 西花蓟马嗅觉相关蛋白基因 3′-RACE第48-49页
        3.2.4 西花蓟马嗅觉相关蛋白基因 5′-RACE第49-51页
        3.2.5 目的基因全长cDNA序列的获取第51页
        3.2.6 西花蓟马FoccCSP1蛋白基因基本理化性质第51-56页
        3.2.7 西花蓟马FoccCSP2蛋白基本理化性质第56-63页
        3.2.8 西花蓟马FoccOBP1蛋白基本理化性质第63-71页
        3.2.9 西花蓟马FoccOBP2蛋白基本理化性质第71-74页
        3.2.10 西花蓟马FoccOR1蛋白基本理化性质第74-83页
    3.3 讨论第83-84页
第四章 西花蓟马嗅觉相关蛋白基因表达谱分析第84-95页
    4.1 材料和方法第84-86页
        4.1.1 供试昆虫第84页
        4.1.2 试剂第84页
        4.1.3 仪器设备第84页
        4.1.4 RNA的提取第84-85页
        4.1.5 第一链cDNA的合成第85页
        4.1.6 Real-time qPCR第85-86页
    4.2 结果与分析第86-93页
        4.2.1 FoccCSP1表达谱分析第86-88页
        4.2.2 FoccCSP2表达谱分析第88-89页
        4.2.3 FoccOBP1表达谱分析第89-90页
        4.2.4 FoccOBP2表达谱分析第90-92页
        4.2.5 FoccOR1表达谱分析第92-93页
    4.3 讨论第93-95页
第五章 西花蓟马嗅觉相关蛋白的原核表达与纯化第95-118页
    5.1 材料与方法第95-106页
        5.1.1 供试昆虫第95页
        5.1.2 主要试剂第95页
        5.1.3 主要仪器设备第95-96页
        5.1.4 聚丙烯酰胺凝胶及电泳缓冲液的配制第96-98页
        5.1.5 试验方法第98-106页
    5.2 结果与分析第106-117页
        5.2.1 开放阅读框扩增第106-107页
        5.2.2 重组克隆质粒构建第107-109页
        5.2.3 重组表达质粒的鉴定第109-110页
        5.2.4 重组蛋白在大肠杆菌中的诱导表达第110-112页
        5.2.5 重组蛋白western杂交第112-113页
        5.2.6 分离重组蛋白第113-115页
        5.2.7 纯化重组蛋白第115-116页
        5.2.8 目的蛋白浓度测定第116-117页
    5.3 讨论第117-118页
第六章 西花蓟马化学感受蛋白FOCCCSP2结合特性第118-126页
    6.1 材料和方法第118-120页
        6.1.1 试剂第118页
        6.1.2 仪器第118-120页
    6.2 结果与分析第120-125页
        6.2.1 西花蓟马化学感受蛋白FoccCSP2与 1-NPN报告子的荧光光谱分析第120-122页
        6.2.2 不同气味物质与 1-NPN和重组FoccCSP2蛋白的竞争结合分析第122-125页
    6.3 讨论第125-126页
第七章 西花蓟马化学感受蛋白FOCCCSP1免疫电镜定位第126-133页
    7.1 材料与方法第126-128页
        7.1.1 试剂第126页
        7.1.2 仪器第126页
        7.1.3 缓冲液配方第126-127页
        7.1.4 试验方法第127-128页
    7.2 结果与分析第128-132页
        7.2.1 抗体最佳稀释浓度的确定第128-130页
        7.2.2 西花蓟马化学感受蛋白FoccCSP1免疫定位第130-132页
    7.3 讨论第132-133页
第八章 全文结论第133-135页
参考文献第135-154页
致谢第154-155页
作者简历第155页

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