中文摘要 | 第6-8页 |
abstract | 第8-9页 |
英文缩略表 | 第17-18页 |
第一章 引言 | 第18-29页 |
1.1 果实发育的特点及相关研究 | 第19-20页 |
1.2 果实发育调控的分子机理研究 | 第20-22页 |
1.2.1 细胞分裂与细胞周期相关基因的研究 | 第20-21页 |
1.2.2 与细胞膨大相关的部分研究 | 第21-22页 |
1.3 动蛋白的结构和生化特性 | 第22-23页 |
1.3.1 传统动蛋白的结构 | 第22-23页 |
1.3.2 动蛋白的生化特性 | 第23页 |
1.4 动蛋白的功能 | 第23-26页 |
1.4.1 动蛋白参与细胞分裂 | 第23-24页 |
1.4.2 动蛋白参与胞内运输 | 第24页 |
1.4.3 动蛋白参与微管动态调节 | 第24-25页 |
1.4.4 动蛋白参与信号转导 | 第25-26页 |
1.5 与植物相关的动蛋白研究 | 第26-27页 |
1.6 本研究目的和意义 | 第27-29页 |
第二章 黄瓜果实发育早期形态学和细胞学变化 | 第29-36页 |
摘要 | 第29页 |
2.1 引言 | 第29页 |
2.2 试验材料 | 第29-30页 |
2.2.1 材料 | 第29-30页 |
2.2.2 主要试剂及仪器 | 第30页 |
2.3 试验方法 | 第30页 |
2.3.1 黄瓜‘9930’果实发育早期部分形态学指标测定 | 第30页 |
2.3.2 不同基因型黄瓜果实发育早期细胞数量和细胞面积的测量 | 第30页 |
2.4 结果与分析 | 第30-35页 |
2.4.1 黄瓜‘9930’果实发育早期部分形态学指标 | 第30-32页 |
2.4.2 不同基因型黄瓜果实发育早期外部形态比较 | 第32-34页 |
2.4.3 不同基因型黄瓜果实发育早期细胞数量和细胞面积比较 | 第34-35页 |
2.5 讨论 | 第35-36页 |
第三章 黄瓜动蛋白基因家族的鉴定及生物信息学分析 | 第36-45页 |
摘要 | 第36页 |
3.1 前言 | 第36页 |
3.2 材料和方法 | 第36-37页 |
3.2.1 47个黄瓜动蛋白的获得 | 第36页 |
3.2.2 黄瓜动蛋白基因的序列分析 | 第36-37页 |
3.3 结果与分析 | 第37-43页 |
3.3.1 黄瓜中47个动蛋白的鉴定 | 第37-38页 |
3.3.2 47个黄瓜动蛋白的系统进化分析 | 第38-40页 |
3.3.3 47个黄瓜动蛋白的保守结构域基因结构分析 | 第40-43页 |
3.4 讨论 | 第43-45页 |
第四章 黄瓜果实动蛋白基因的时空表达分析 | 第45-58页 |
摘要 | 第45页 |
4.1 引言 | 第45页 |
4.2 材料 | 第45-46页 |
4.3 方法 | 第46-48页 |
4.3.1 总RNA的提取 | 第46页 |
4.3.2 cDNA合成 | 第46页 |
4.3.3 引物设计与合成 | 第46-48页 |
4.3.4 半定量PCR(RT-PCR)和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析 | 第48页 |
4.4 结果与分析 | 第48-56页 |
4.4.1 黄瓜Kinesin家族基因在不同组织中的表达模式 | 第48-50页 |
4.4.2 黄瓜Kinesin家族基因在黄瓜果实发育早期中的表达模式 | 第50-53页 |
4.4.3 8 个黄瓜Kinesin基因在不同基因型黄瓜果实发育早期中的表达模式 | 第53-56页 |
4.5 讨论 | 第56-58页 |
第五章 黄瓜果实动蛋白特异肽段的原核表达和分析 | 第58-72页 |
摘要 | 第58页 |
5.1 引言 | 第58页 |
5.2 试验材料 | 第58-59页 |
5.2.1 材料、菌株和质粒 | 第58-59页 |
5.2.2 主要试剂 | 第59页 |
5.2.3 主要仪器 | 第59页 |
5.3 试验方法 | 第59-65页 |
5.3.1 黄瓜果实动蛋白基因CsKF1、CsKF2和CsKF3的克隆 | 第59-62页 |
5.3.2 黄瓜果实动蛋白CsKF1、CsKF2和CsKF3的鉴定 | 第62-65页 |
5.4 结果和分析 | 第65-71页 |
5.4.1 黄瓜果实动蛋白基因CsKF1、CsKF2和CsKF3 cDNA全长的获得 | 第65页 |
5.4.2 CsKF1、CsKF2和CsKF3的生物信息学分析 | 第65-67页 |
5.4.3 CsKF1、CsKF2和CsKF3马达区和非马达区原核表达载体的构建 | 第67-68页 |
5.4.4 重组马达区蛋白His-CsKF1-M和His-CsKF2-M的原核表达与纯化 | 第68-70页 |
5.4.5 His-CsKF1-M和His-CsKF2-M被微管激活的ATPase活性 | 第70页 |
5.4.6 His-CsKF1-M和His-CsKF2-M的微管结合特性分析 | 第70-71页 |
5.5 讨论 | 第71-72页 |
第六章 CsKF1、CsKF2和CsKF3的亚细胞定位及功能分析 | 第72-86页 |
摘要 | 第72页 |
6.1 引言 | 第72页 |
6.2 试验材料 | 第72-73页 |
6.2.1 材料、菌株和质粒 | 第72页 |
6.2.2 主要试剂 | 第72-73页 |
6.3 试验方法 | 第73-76页 |
6.3.1 CsKF1、CsKF2和CsKF3非马达区重组蛋白的原核表达和纯化 | 第73页 |
6.3.2 多克隆的抗体制备及纯化 | 第73-74页 |
6.3.3 黄瓜不同组织中总蛋白的提取 | 第74页 |
6.3.4 免疫印迹 | 第74页 |
6.3.5 拟南芥原生质体转化 | 第74-76页 |
6.3.6 黄瓜果实细胞的免疫荧光标记 | 第76页 |
6.4 结果与分析 | 第76-84页 |
6.4.1 CsKF1、CsKF2和CsKF3非马达区重组蛋白的原核表达与纯化 | 第76-78页 |
6.4.2 anti-KF1-N、anti-KF2-C和anti-KF3-C多克隆抗体制备及纯化 | 第78-79页 |
6.4.3 Western blot分析 | 第79-80页 |
6.4.4 黄瓜果实细胞中CsKF1的免疫荧光标记 | 第80-81页 |
6.4.5 黄瓜果实细胞中CsKF2的免疫荧光标记 | 第81-83页 |
6.4.6 黄瓜果实细胞中CsKF3的免疫荧光标记 | 第83-84页 |
6.5 讨论 | 第84-86页 |
第七章 植物过表达载体和RNAi干扰载体的构建 | 第86-93页 |
摘要 | 第86页 |
7.1 前言 | 第86页 |
7.2 材料和方法 | 第86-89页 |
7.2.1 植物过表达载体的构建 | 第86-88页 |
7.2.2 植物RNAi载体的构建 | 第88-89页 |
7.3 结果和分析 | 第89-92页 |
7.3.1 入门载体的构建 | 第89-90页 |
7.3.2 CsKF1-OE、Cs KF2-OE和CsKF3-OE载体的构建 | 第90页 |
7.3.3 CsKF1-RNAi、CsKF2-RNAi和CsKF3-RNAi载体的构建 | 第90-92页 |
7.4 讨论 | 第92-93页 |
第八章 全文结论 | 第93-95页 |
参考文献 | 第95-105页 |
致谢 | 第105-106页 |
作者简介 | 第106页 |