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黄瓜动蛋白参与果实发育早期细胞分裂和细胞膨大过程的研究

中文摘要第6-8页
abstract第8-9页
英文缩略表第17-18页
第一章 引言第18-29页
    1.1 果实发育的特点及相关研究第19-20页
    1.2 果实发育调控的分子机理研究第20-22页
        1.2.1 细胞分裂与细胞周期相关基因的研究第20-21页
        1.2.2 与细胞膨大相关的部分研究第21-22页
    1.3 动蛋白的结构和生化特性第22-23页
        1.3.1 传统动蛋白的结构第22-23页
        1.3.2 动蛋白的生化特性第23页
    1.4 动蛋白的功能第23-26页
        1.4.1 动蛋白参与细胞分裂第23-24页
        1.4.2 动蛋白参与胞内运输第24页
        1.4.3 动蛋白参与微管动态调节第24-25页
        1.4.4 动蛋白参与信号转导第25-26页
    1.5 与植物相关的动蛋白研究第26-27页
    1.6 本研究目的和意义第27-29页
第二章 黄瓜果实发育早期形态学和细胞学变化第29-36页
    摘要第29页
    2.1 引言第29页
    2.2 试验材料第29-30页
        2.2.1 材料第29-30页
        2.2.2 主要试剂及仪器第30页
    2.3 试验方法第30页
        2.3.1 黄瓜‘9930’果实发育早期部分形态学指标测定第30页
        2.3.2 不同基因型黄瓜果实发育早期细胞数量和细胞面积的测量第30页
    2.4 结果与分析第30-35页
        2.4.1 黄瓜‘9930’果实发育早期部分形态学指标第30-32页
        2.4.2 不同基因型黄瓜果实发育早期外部形态比较第32-34页
        2.4.3 不同基因型黄瓜果实发育早期细胞数量和细胞面积比较第34-35页
    2.5 讨论第35-36页
第三章 黄瓜动蛋白基因家族的鉴定及生物信息学分析第36-45页
    摘要第36页
    3.1 前言第36页
    3.2 材料和方法第36-37页
        3.2.1 47个黄瓜动蛋白的获得第36页
        3.2.2 黄瓜动蛋白基因的序列分析第36-37页
    3.3 结果与分析第37-43页
        3.3.1 黄瓜中47个动蛋白的鉴定第37-38页
        3.3.2 47个黄瓜动蛋白的系统进化分析第38-40页
        3.3.3 47个黄瓜动蛋白的保守结构域基因结构分析第40-43页
    3.4 讨论第43-45页
第四章 黄瓜果实动蛋白基因的时空表达分析第45-58页
    摘要第45页
    4.1 引言第45页
    4.2 材料第45-46页
    4.3 方法第46-48页
        4.3.1 总RNA的提取第46页
        4.3.2 cDNA合成第46页
        4.3.3 引物设计与合成第46-48页
        4.3.4 半定量PCR(RT-PCR)和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析第48页
    4.4 结果与分析第48-56页
        4.4.1 黄瓜Kinesin家族基因在不同组织中的表达模式第48-50页
        4.4.2 黄瓜Kinesin家族基因在黄瓜果实发育早期中的表达模式第50-53页
        4.4.3 8 个黄瓜Kinesin基因在不同基因型黄瓜果实发育早期中的表达模式第53-56页
    4.5 讨论第56-58页
第五章 黄瓜果实动蛋白特异肽段的原核表达和分析第58-72页
    摘要第58页
    5.1 引言第58页
    5.2 试验材料第58-59页
        5.2.1 材料、菌株和质粒第58-59页
        5.2.2 主要试剂第59页
        5.2.3 主要仪器第59页
    5.3 试验方法第59-65页
        5.3.1 黄瓜果实动蛋白基因CsKF1、CsKF2和CsKF3的克隆第59-62页
        5.3.2 黄瓜果实动蛋白CsKF1、CsKF2和CsKF3的鉴定第62-65页
    5.4 结果和分析第65-71页
        5.4.1 黄瓜果实动蛋白基因CsKF1、CsKF2和CsKF3 cDNA全长的获得第65页
        5.4.2 CsKF1、CsKF2和CsKF3的生物信息学分析第65-67页
        5.4.3 CsKF1、CsKF2和CsKF3马达区和非马达区原核表达载体的构建第67-68页
        5.4.4 重组马达区蛋白His-CsKF1-M和His-CsKF2-M的原核表达与纯化第68-70页
        5.4.5 His-CsKF1-M和His-CsKF2-M被微管激活的ATPase活性第70页
        5.4.6 His-CsKF1-M和His-CsKF2-M的微管结合特性分析第70-71页
    5.5 讨论第71-72页
第六章 CsKF1、CsKF2和CsKF3的亚细胞定位及功能分析第72-86页
    摘要第72页
    6.1 引言第72页
    6.2 试验材料第72-73页
        6.2.1 材料、菌株和质粒第72页
        6.2.2 主要试剂第72-73页
    6.3 试验方法第73-76页
        6.3.1 CsKF1、CsKF2和CsKF3非马达区重组蛋白的原核表达和纯化第73页
        6.3.2 多克隆的抗体制备及纯化第73-74页
        6.3.3 黄瓜不同组织中总蛋白的提取第74页
        6.3.4 免疫印迹第74页
        6.3.5 拟南芥原生质体转化第74-76页
        6.3.6 黄瓜果实细胞的免疫荧光标记第76页
    6.4 结果与分析第76-84页
        6.4.1 CsKF1、CsKF2和CsKF3非马达区重组蛋白的原核表达与纯化第76-78页
        6.4.2 anti-KF1-N、anti-KF2-C和anti-KF3-C多克隆抗体制备及纯化第78-79页
        6.4.3 Western blot分析第79-80页
        6.4.4 黄瓜果实细胞中CsKF1的免疫荧光标记第80-81页
        6.4.5 黄瓜果实细胞中CsKF2的免疫荧光标记第81-83页
        6.4.6 黄瓜果实细胞中CsKF3的免疫荧光标记第83-84页
    6.5 讨论第84-86页
第七章 植物过表达载体和RNAi干扰载体的构建第86-93页
    摘要第86页
    7.1 前言第86页
    7.2 材料和方法第86-89页
        7.2.1 植物过表达载体的构建第86-88页
        7.2.2 植物RNAi载体的构建第88-89页
    7.3 结果和分析第89-92页
        7.3.1 入门载体的构建第89-90页
        7.3.2 CsKF1-OE、Cs KF2-OE和CsKF3-OE载体的构建第90页
        7.3.3 CsKF1-RNAi、CsKF2-RNAi和CsKF3-RNAi载体的构建第90-92页
    7.4 讨论第92-93页
第八章 全文结论第93-95页
参考文献第95-105页
致谢第105-106页
作者简介第106页

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