摘要 | 第8-12页 |
Abstract | 第12-15页 |
第一章 文献综述 | 第16-22页 |
1 转录组学在昆虫学研究中的应用 | 第16页 |
2 细胞色素P450酶系 | 第16-20页 |
2.1 细胞色素P450的结构特征 | 第17页 |
2.2 细胞色素P450的集团分类 | 第17页 |
2.3 细胞色素P450与害虫抗药性的关系 | 第17-18页 |
2.4 细胞色素P450在药剂胁迫下的可诱导性 | 第18-19页 |
2.5 昆虫杆状病毒表达系统在P450功能研究中的应用 | 第19-20页 |
3 书虱的危害及抗性研究概况 | 第20-22页 |
3.1 书虱的危害与抗性产生 | 第20页 |
3.2 书虱的抗性研究 | 第20-22页 |
引言 | 第22-24页 |
第二章 嗜虫书虱转录组测序与分析 | 第24-40页 |
1 材料与方法 | 第24-26页 |
1.1 供试虫源 | 第24页 |
1.2 供试主要试剂和仪器 | 第24-25页 |
1.3 总RNA的提取 | 第25页 |
1.4 嗜虫书虱转录组测序及数据分析 | 第25-26页 |
2 结果与分析 | 第26-39页 |
2.1 嗜虫书虱转录组测序及数据分析 | 第26-27页 |
2.2 功能注释 | 第27-30页 |
2.3 嗜虫书虱解毒代谢酶基因的鉴定及代谢通路分析 | 第30-39页 |
3 小结 | 第39-40页 |
第三章 嗜虫书虱细胞色素P450基因的克隆与表达研究 | 第40-94页 |
第一节 嗜虫书虱5个P450基因的克隆与信息分析 | 第40-60页 |
1 材料与方法 | 第40-45页 |
1.1 供试虫源 | 第40页 |
1.2 供试主要试剂(盒)和仪器 | 第40-42页 |
1.3 总RNA的提取 | 第42-43页 |
1.4 总RNA中gDNA的去除 | 第43页 |
1.5 cDNA的合成 | 第43-44页 |
1.6 引物设计 | 第44页 |
1.7 PCR扩增反应 | 第44-45页 |
1.8 嗜虫书虱P450基因序列及系统发育分析 | 第45页 |
2 结果与分析 | 第45-59页 |
2.1 嗜虫书虱P450基因cDNA全长的获得 | 第45-46页 |
2.2 嗜虫书虱P450基因cDNA序列的生物信息学分析 | 第46-54页 |
2.3 嗜虫书虱P450基因的同源性分析 | 第54-58页 |
2.4 嗜虫书虱P450的系统发育分析 | 第58-59页 |
3 小结 | 第59-60页 |
第二节 嗜虫书虱P450基因的时空表达分析 | 第60-86页 |
1 材料与方法 | 第60-64页 |
1.1 供试虫源 | 第60页 |
1.2 供试主要试剂(盒)和仪器 | 第60-61页 |
1.3 嗜虫书虱不同性别及不同发育阶段虫源的收集 | 第61页 |
1.4 生物测定及药剂诱导 | 第61-62页 |
1.5 总RNA的提取 | 第62页 |
1.6 总RNA中gDNA的去除 | 第62页 |
1.7 cDNA的合成 | 第62页 |
1.8 引物设计及内参基因选择 | 第62-63页 |
1.9 定量PCR | 第63-64页 |
1.10 数据分析 | 第64页 |
2 结果与分析 | 第64-85页 |
2.1 嗜虫书虱不同性别P450基因的表达模式 | 第64-66页 |
2.2 嗜虫书虱不同发育阶段P450基因的表达模式 | 第66-69页 |
2.3 嗜虫书虱P450基因对药剂诱导的响应表达模式 | 第69-81页 |
2.4 嗜虫书虱P450基因在不同种群间的表达模式 | 第81-85页 |
3 小结 | 第85-86页 |
第三节 嗜虫书虱细胞色素P450基因真核表达载体构建 | 第86-94页 |
1 材料与方法 | 第86-88页 |
1.1 供试主要试剂(盒)和仪器 | 第86-87页 |
1.2 细胞培养 | 第87页 |
1.3 PCR扩增及p MD-19T Simple载体构建 | 第87页 |
1.4 表达载体构建 | 第87-88页 |
2 结果与分析 | 第88-91页 |
2.1 嗜虫书虱P450基因与p MD-19T Simple重组载体的构建 | 第88-89页 |
2.2 p FastBac-CYP4FD2重组质粒的构建 | 第89-90页 |
2.3 Bacmid-CYP4FD2重组杆粒的构建 | 第90-91页 |
3 小结 | 第91-92页 |
本章讨论 | 第92-94页 |
1 细胞色素P450基因的表达模式 | 第92-93页 |
2 细胞色素P450基因的真核表达 | 第93-94页 |
第四章 嗜虫书虱敏感与抗性种群P450酶活性的比较研究 | 第94-102页 |
1 材料与方法 | 第94-96页 |
1.1 供试主要试剂(盒)和仪器 | 第94-95页 |
1.2 嗜虫书虱的药剂诱导 | 第95页 |
1.3 定量PCR | 第95页 |
1.4 增效作用测定 | 第95页 |
1.5 P450s活性测定 | 第95-96页 |
1.6 数据分析 | 第96页 |
2 结果与分析 | 第96-100页 |
2.1 嗜虫书虱敏感和抗性种群药剂敏感性及增效作用测定 | 第96-97页 |
2.2 嗜虫书虱P450基因在不同种群的定量表达研究 | 第97-99页 |
2.3 嗜虫书虱不同种群P450酶活性测定与比较分析 | 第99页 |
2.4 嗜虫书虱敏感种群在不同药剂胁迫后的P450酶的活性测定 | 第99-100页 |
3 小结 | 第100-102页 |
第五章 主要结果、结论与研究展望 | 第102-106页 |
1 主要结果与结论 | 第102-103页 |
2 研究展望 | 第103-106页 |
参考文献 | 第106-118页 |
在读期间发表论文情况 | 第118-120页 |
致谢 | 第120页 |