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基于转录组数据的嗜虫书虱P450基因的克隆与表达研究

摘要第8-12页
Abstract第12-15页
第一章 文献综述第16-22页
    1 转录组学在昆虫学研究中的应用第16页
    2 细胞色素P450酶系第16-20页
        2.1 细胞色素P450的结构特征第17页
        2.2 细胞色素P450的集团分类第17页
        2.3 细胞色素P450与害虫抗药性的关系第17-18页
        2.4 细胞色素P450在药剂胁迫下的可诱导性第18-19页
        2.5 昆虫杆状病毒表达系统在P450功能研究中的应用第19-20页
    3 书虱的危害及抗性研究概况第20-22页
        3.1 书虱的危害与抗性产生第20页
        3.2 书虱的抗性研究第20-22页
引言第22-24页
第二章 嗜虫书虱转录组测序与分析第24-40页
    1 材料与方法第24-26页
        1.1 供试虫源第24页
        1.2 供试主要试剂和仪器第24-25页
        1.3 总RNA的提取第25页
        1.4 嗜虫书虱转录组测序及数据分析第25-26页
    2 结果与分析第26-39页
        2.1 嗜虫书虱转录组测序及数据分析第26-27页
        2.2 功能注释第27-30页
        2.3 嗜虫书虱解毒代谢酶基因的鉴定及代谢通路分析第30-39页
    3 小结第39-40页
第三章 嗜虫书虱细胞色素P450基因的克隆与表达研究第40-94页
    第一节 嗜虫书虱5个P450基因的克隆与信息分析第40-60页
        1 材料与方法第40-45页
            1.1 供试虫源第40页
            1.2 供试主要试剂(盒)和仪器第40-42页
            1.3 总RNA的提取第42-43页
            1.4 总RNA中gDNA的去除第43页
            1.5 cDNA的合成第43-44页
            1.6 引物设计第44页
            1.7 PCR扩增反应第44-45页
            1.8 嗜虫书虱P450基因序列及系统发育分析第45页
        2 结果与分析第45-59页
            2.1 嗜虫书虱P450基因cDNA全长的获得第45-46页
            2.2 嗜虫书虱P450基因cDNA序列的生物信息学分析第46-54页
            2.3 嗜虫书虱P450基因的同源性分析第54-58页
            2.4 嗜虫书虱P450的系统发育分析第58-59页
        3 小结第59-60页
    第二节 嗜虫书虱P450基因的时空表达分析第60-86页
        1 材料与方法第60-64页
            1.1 供试虫源第60页
            1.2 供试主要试剂(盒)和仪器第60-61页
            1.3 嗜虫书虱不同性别及不同发育阶段虫源的收集第61页
            1.4 生物测定及药剂诱导第61-62页
            1.5 总RNA的提取第62页
            1.6 总RNA中gDNA的去除第62页
            1.7 cDNA的合成第62页
            1.8 引物设计及内参基因选择第62-63页
            1.9 定量PCR第63-64页
            1.10 数据分析第64页
        2 结果与分析第64-85页
            2.1 嗜虫书虱不同性别P450基因的表达模式第64-66页
            2.2 嗜虫书虱不同发育阶段P450基因的表达模式第66-69页
            2.3 嗜虫书虱P450基因对药剂诱导的响应表达模式第69-81页
            2.4 嗜虫书虱P450基因在不同种群间的表达模式第81-85页
        3 小结第85-86页
    第三节 嗜虫书虱细胞色素P450基因真核表达载体构建第86-94页
        1 材料与方法第86-88页
            1.1 供试主要试剂(盒)和仪器第86-87页
            1.2 细胞培养第87页
            1.3 PCR扩增及p MD-19T Simple载体构建第87页
            1.4 表达载体构建第87-88页
        2 结果与分析第88-91页
            2.1 嗜虫书虱P450基因与p MD-19T Simple重组载体的构建第88-89页
            2.2 p FastBac-CYP4FD2重组质粒的构建第89-90页
            2.3 Bacmid-CYP4FD2重组杆粒的构建第90-91页
        3 小结第91-92页
        本章讨论第92-94页
            1 细胞色素P450基因的表达模式第92-93页
            2 细胞色素P450基因的真核表达第93-94页
第四章 嗜虫书虱敏感与抗性种群P450酶活性的比较研究第94-102页
    1 材料与方法第94-96页
        1.1 供试主要试剂(盒)和仪器第94-95页
        1.2 嗜虫书虱的药剂诱导第95页
        1.3 定量PCR第95页
        1.4 增效作用测定第95页
        1.5 P450s活性测定第95-96页
        1.6 数据分析第96页
    2 结果与分析第96-100页
        2.1 嗜虫书虱敏感和抗性种群药剂敏感性及增效作用测定第96-97页
        2.2 嗜虫书虱P450基因在不同种群的定量表达研究第97-99页
        2.3 嗜虫书虱不同种群P450酶活性测定与比较分析第99页
        2.4 嗜虫书虱敏感种群在不同药剂胁迫后的P450酶的活性测定第99-100页
    3 小结第100-102页
第五章 主要结果、结论与研究展望第102-106页
    1 主要结果与结论第102-103页
    2 研究展望第103-106页
参考文献第106-118页
在读期间发表论文情况第118-120页
致谢第120页

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