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高产生物活性物质的耐盐藻筛选及降解藻毒素基因工程蓝藻的研究

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-9页
第一章 绪论第18-34页
    1.1 藻类概述第18-20页
        1.1.1 藻类的定义、种类及主要特点第18页
        1.1.2 耐盐藻及其应用价值第18-20页
    1.2 藻类生物活性第20-24页
        1.2.1 抗菌活性第21-22页
        1.2.2 抗氧化活性第22页
        1.2.3 其他生物活性第22-24页
    1.3 微藻抗菌活性物质的研究进展第24-27页
        1.3.1 抗菌活性微藻的筛选第24-26页
        1.3.2 抗菌活性物质的有效成分第26页
        1.3.3 抗菌实验方法第26-27页
    1.4 微藻抗氧化活性物质的研究进展第27-29页
        1.4.1 微藻抗氧化活性研究第27-28页
        1.4.2 抗氧化活性的检测方法第28-29页
    1.5 微囊藻毒素(MCs)的生物降解第29-31页
        1.5.1 MCs第29-30页
        1.5.2 MCs的生物降解第30-31页
    1.6 蓝藻的基因工程第31-33页
        1.6.1 集胞藻PCC 6803的自然转化第32页
        1.6.2 载体设计与选择第32页
        1.6.3 集胞藻PCC 6803藻青蛋白启动子Pcpc560第32-33页
        1.6.4 集胞藻PCC 6803中前导肽基因pilA第33页
    1.7 研究目的与意义第33-34页
第二章 耐盐藻筛选纯化和培养鉴定第34-48页
    2.1 实验材料与试剂第34-35页
        2.1.1 样品第34页
        2.1.2 试剂与仪器第34-35页
        2.1.3 培养基第35页
    2.2 实验方法第35-40页
        2.2.1 样品采集与处理第35-36页
        2.2.2 样品近似盐度测定第36页
        2.2.3 藻种筛选纯化及培养第36-37页
        2.2.4 藻种分子生物学鉴定第37-40页
    2.3 结果与讨论第40-46页
        2.3.1 部分样品近似盐度测定第40页
        2.3.2 纯化得到的耐盐藻第40-41页
        2.3.3 部分耐盐藻的生长曲线及种属鉴定第41-43页
        2.3.4 四株杜氏藻的生长曲线、种属鉴定及系统进化分析第43-46页
    2.4 小结第46-48页
第三章 微藻抗菌活性研究第48-66页
    3.1 实验材料与试剂第48-49页
        3.1.1 藻种与菌种第48页
        3.1.2 培养基第48-49页
        3.1.3 试剂与仪器第49页
    3.2 实验方法第49-52页
        3.2.1 菌种培养第49-50页
        3.2.2 藻粉的收获第50页
        3.2.3 微藻提取物的制备第50页
        3.2.4 微藻提取物的抑菌实验第50-51页
        3.2.5 GC-MS分析微藻提取物的脂肪酸组分第51-52页
    3.3 结果与讨论第52-64页
        3.3.1 细菌OD_(600)与CFU之间的关系第52-53页
        3.3.2 微藻提取物的抑菌活性第53-59页
        3.3.3 GC-MS分析微藻提取物的脂肪酸组分第59-64页
    3.4 小结第64-66页
第四章 微藻抗氧化活性研究第66-74页
    4.1 实验材料与试剂第66页
        4.1.1 藻种第66页
        4.1.2 试剂第66页
    4.2 实验方法第66-68页
        4.2.1 藻粉的收获第66页
        4.2.2 微藻提取物的制备第66页
        4.2.3 总酚(TP)和总黄酮(TF)含量的测定第66-68页
        4.2.4 微藻提取物的抗氧化活性第68页
    4.3 结果与讨论第68-73页
        4.3.1 16株微藻总酚和总黄酮含量的测定第68-71页
        4.3.2 16株微藻自由基清除能力测定第71-73页
    4.4 小结第73-74页
第五章 降解藻毒素基因工程蓝藻的研究第74-94页
    5.1 实验材料与试剂第74-75页
        5.1.1 藻种、菌株及质粒第74页
        5.1.2 试剂与仪器第74-75页
    5.2 实验方法第75-80页
        5.2.1 培养基第75-76页
        5.2.2 分子克隆方法第76-78页
        5.2.3 蓝藻基因工程第78-79页
        5.2.4 MlrA酶的提取与活性测定第79-80页
    5.3 结果与讨论第80-92页
        5.3.1 质粒A+的设计与合成第80-82页
        5.3.2 质粒A-的构建第82-85页
        5.3.3 质粒A-的大肠杆菌转化与鉴定第85-86页
        5.3.4 质粒A+、A-对大肠杆菌生长的影响第86-87页
        5.3.5 可降解藻毒素基因工程藻株的构建与鉴定第87-89页
        5.3.6 野生型集胞藻6803与6803-A+藻株生长状况的比较第89-90页
        5.3.7 基因工程藻株6803-A+用于降解MC-LR的研究第90-92页
    5.4 小结第92-94页
第六章 结论与展望第94-96页
参考文献第96-104页
附录Ⅰ 试剂第104-106页
附录Ⅱ 抑菌实验部分图片第106-110页
附录Ⅲ 16号藻株测序结果第110-112页
致谢第112-114页
作者和导师简介第114-116页
附件第116-117页

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