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喹噁啉类对大肠杆菌DNA损伤的机制研究

摘要第8-11页
ABSTRACT第11-14页
缩略语表第15-17页
1 前言第17-22页
    1.1 研究目的第17页
    1.2 研究背景第17-20页
    1.3 研究思路第20-21页
    1.4 研究内容第21页
    1.5 研究意义第21-22页
2 材料与方法第22-41页
    2.1 试验菌株第22页
    2.2 药品和试剂第22-24页
    2.3 主要仪器和设备第24-25页
    2.4 溶液配制第25-26页
    2.5 细菌复苏传代和培养第26-27页
    2.6 喹噁啉类药物MIC和MBC的测定第27页
    2.7 体外DNA损伤的作用研究第27-31页
        2.7.1 pBR322质粒DNA的提取第27-29页
        2.7.2 酶切鉴定第29-30页
        2.7.3 喹赛多和喹乙醇原型对DNA损伤的浓度考察第30页
        2.7.4 喹赛多和喹乙醇原型对DNA损伤的时间考察第30页
        2.7.5 不同浓度喹赛多和喹乙醇代谢后对DNA损伤的检测第30-31页
        2.7.6 喹赛多和喹乙醇代谢不同时间点对DNA损伤的检测第31页
    2.8 菌体内质粒DNA损伤的研究第31-32页
    2.9 药物对DNA作用的紫外光谱吸收第32页
        2.9.1 喹赛多和喹乙醇原型对DNA作用的紫外光谱吸收第32页
        2.9.2 喹赛多和喹乙醇代谢后对DNA作用的紫外光谱吸收第32页
    2.10 大肠杆菌拓扑异构酶Ⅰ活性的检测第32-33页
        2.10.1 喹赛多和喹乙醇原型对E.coli拓扑异构酶Ⅰ活性影响的检测第32-33页
        2.10.2 喹赛多和喹乙醇代谢下对E.coli拓扑异构酶Ⅰ活性影响的检测第33页
    2.11 喹赛多和喹乙醇对大肠杆菌DNA旋转酶活性影响的检测第33-34页
        2.11.1 喹赛多和喹乙醇原型对Ecoli Gyrase的活性影响第33-34页
        2.11.2 喹赛多和喹乙醇代谢下对E.coli Gyrase的活性影响第34页
    2.12 喹赛多和喹乙醇对大肠杆菌DNA聚合酶活性影响的检测第34-37页
        2.12.1 E.coli DNA聚合酶活性的定量分析第35页
        2.12.2 喹赛多和喹乙醇原型对E.coli DNA聚合酶活性的检测第35-36页
        2.12.3 喹赛多和喹乙醇代谢下对E.coli DNA聚合酶活性影响的检测第36-37页
        2.12.4 脱一氧和脱二氧喹赛多对聚合酶活性检测第37页
        2.12.5 喹赛多和喹乙醇对Ecoli DNA聚合酶活性的时间考察第37页
    2.13 喹赛多和喹乙醇对大肠杆菌DNA连接酶活性影响的检测第37-41页
        2.13.1 分子信标与DNA的杂交第38页
        2.13.2 E.coli DNA连接酶活性的检测第38-39页
        2.13.3 喹赛多和喹乙醇原型对E.coli DNA连接酶活性的检测第39页
        2.13.4 喹赛多和喹乙醇代谢下对E.coli DNA连接酶活性的检测第39-41页
3 结果第41-64页
    3.1 喹噁啉类对大肠杆菌CVCC2943的MIC和MBC第41页
    3.2 喹赛多和喹乙醇对DNA损伤作用的检测第41-47页
        3.2.1 药物原型对DNA损伤的浓度考察第42-44页
        3.2.2 药物原型对DNA损伤的时间考察第44页
        3.2.3 药物代谢后对DNA损伤的检测第44-45页
        3.2.4 药物代谢后不同时间点对DNA损伤的检测第45-46页
        3.2.5 体内药物对细菌质粒DNA损伤的检测第46-47页
    3.3 喹赛多和喹乙醇与DNA作用的紫外光谱吸收第47-51页
        3.3.1 药物原型对DNA作用的紫外光谱吸收第48-49页
        3.3.2 药物代谢后对DNA作用的紫外光谱吸收第49-51页
    3.4 喹赛多和喹乙醇对大肠杆菌拓扑异构酶活性的检测第51-54页
        3.4.1 药物原型对E.coli拓扑异构酶Ⅰ活性的检测第51-52页
        3.4.2 药物代谢后对E.coli拓扑异构酶Ⅰ活性的检测第52页
        3.4.3 药物原型对E.coli旋转酶活性的检测第52-53页
        3.4.4 药物代谢下对E.coli DNA旋转酶活性的检测第53-54页
    3.5 喹赛多和喹乙醇对大肠杆菌DNA聚合酶活性的影响第54-60页
        3.5.1 E.coli DNA聚合酶活性的定量分析第54-55页
        3.5.2 药物原型对E.coli DNA聚合酶活性的影响第55-56页
        3.5.3 药物代谢下对Ecoli DNA聚合酶活性的影响第56-57页
        3.5.4 脱一氧和脱二氧喹赛多对聚合酶的影响第57-59页
        3.5.5 药物作用不同时间后对E.coli DNA聚合酶活性的影响第59-60页
    3.6 喹赛多和喹乙醇对大肠杆菌DNA连接酶活性的影响第60-64页
        3.6.1 分子信标与DNA的杂交第60-61页
        3.6.2 E.coli DNA连接酶活性的检测第61页
        3.6.3 药物原型对E.coli DNA连接酶活性的检测第61-62页
        3.6.4 药物代谢下对E.coli DNA连接酶活性的检测第62-64页
4 讨论第64-70页
    4.1 喹噁啉类对DNA的损伤第64-66页
    4.2 喹噁啉抗菌过程中有关的酶第66-70页
5 结论第70-71页
6 全文创新性总结及今后的研究方向第71-72页
7 文献综述第72-84页
参考文献第84-93页
致谢第93-94页
附录第94-103页

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