| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩写词及中英文对照 | 第8-14页 |
| 前言 | 第14-20页 |
| 1. 食管癌鳞状细胞癌的研究现状 | 第14-15页 |
| 2. ESCC临床治疗策略 | 第15-16页 |
| 3. 小分子化合物与肿瘤耐药 | 第16-18页 |
| 4. 千金藤碱与肿瘤多药耐药 | 第18-20页 |
| 第一章 CEH和CDDP联用抑制食管癌鳞状细胞癌细胞生长 | 第20-32页 |
| 1. 仪器与材料 | 第20-22页 |
| 1.1 仪器与耗材 | 第20-21页 |
| 1.2 主要试剂 | 第21-22页 |
| 1.3 细胞株 | 第22页 |
| 1.4 试剂配制 | 第22页 |
| 2. 实验方法 | 第22-24页 |
| 2.1 细胞复苏 | 第22-23页 |
| 2.2 细胞培养 | 第23页 |
| 2.3 细胞冻存 | 第23页 |
| 2.4 MTT法检测CHE和CDDP单用及联用对食管癌鳞状细胞癌细胞增殖抑制 | 第23-24页 |
| 2.5 细胞形态学观察和耐药指数( Resistance index, RI )测定 | 第24页 |
| 2.6 CEH和CDDP联合指数( Combination index, CI )测定 | 第24页 |
| 2.7 统计学分析 | 第24页 |
| 3. 实验结果 | 第24-30页 |
| 3.1 Eca109及Eca109-CDDP细胞形态学观察及耐药细胞株耐药指数的测定 | 第24-26页 |
| 3.2 CEH对正常细胞毒性 | 第26-27页 |
| 3.3 CEH和CDDP抑制人食管癌鳞状细胞癌细胞的生长且联用能显著增加人食管癌鳞状细胞癌细胞对CDDP的敏感性 | 第27-30页 |
| 4. 讨论 | 第30-31页 |
| 5. 本章小结 | 第31-32页 |
| 第二章 CEH联用CDDP诱导人食管鳞癌细胞凋亡 | 第32-45页 |
| 1. 仪器与材料 | 第32-36页 |
| 1.1 仪器与设备 | 第32页 |
| 1.2 实验材料 | 第32-33页 |
| 1.3 实验所用抗体 | 第33页 |
| 1.4 实验主要溶液配制方法 | 第33-36页 |
| 1.4.1 WB相关试剂配制 | 第33-36页 |
| 1.4.2 其他试剂配制 | 第36页 |
| 2. 实验方法 | 第36-39页 |
| 2.1 Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡 | 第36页 |
| 2.2 WB法检测细胞蛋白表达 | 第36-39页 |
| 2.2.1 细胞总蛋白的提取 | 第36-37页 |
| 2.2.2 测定细胞蛋白浓度 | 第37页 |
| 2.2.3 SDS-PAGE电泳 | 第37页 |
| 2.2.4 转膜 | 第37-38页 |
| 2.2.5 封闭 | 第38页 |
| 2.2.6 一抗孵育 | 第38页 |
| 2.2.7 二抗孵育 | 第38页 |
| 2.2.8 辣根过氧化物酶ECL显影 | 第38页 |
| 2.2.9 灰度分析 | 第38-39页 |
| 3. 实验结果 | 第39-40页 |
| 3.1 CEH与CDDP联合促进细胞凋亡 | 第39页 |
| 3.2 CEH与CDDP联合对细胞凋亡蛋白表达的影响 | 第39-40页 |
| 4. 讨论 | 第40-41页 |
| 5. 本章小结 | 第41-45页 |
| 第三章 盐酸千金藤碱逆转肿瘤多药耐药性的信号转导机制 | 第45-54页 |
| 1. 仪器与材料 | 第45-46页 |
| 1.1 仪器与耗材 | 第45-46页 |
| 1.2 实验材料 | 第46页 |
| 1.3 主要试剂配制 | 第46页 |
| 1.3.1 RNA提取所用溶液配制 | 第46页 |
| 2. 实验方法 | 第46-48页 |
| 2.1 细胞总RNA的提取 | 第46-47页 |
| 2.2 反转录成c DNA | 第47页 |
| 2.3 Real-time PCR | 第47-48页 |
| 3. 实验结果 | 第48-53页 |
| 3.1 RT-PCR法检测人食管癌鳞状细胞癌细胞中MDR1 m RNA随CEH浓度变的化情况 | 第48-50页 |
| 3.2 WB法检测CEH在人食管癌鳞状细胞癌细胞中对P-gp的调节作用 | 第50-51页 |
| 3.3 WB法检测CEH在人食管癌鳞状细胞癌细胞中对Caspase 3 的调节作用 | 第51页 |
| 3.4 WB法检测CEH对JNK信号通路的影响 | 第51页 |
| 3.5 WB法检测CEH对其他信号通路的影响 | 第51-53页 |
| 4. 讨论 | 第53页 |
| 5. 本章小结 | 第53-54页 |
| 第四章 CEH和CDDP联用体内抗食管癌研究 | 第54-70页 |
| 1. 仪器与材料 | 第54-55页 |
| 1.1 仪器与耗材 | 第54页 |
| 1.2 试剂和药物 | 第54-55页 |
| 1.3 药物配制 | 第55页 |
| 1.4 实验动物及饲养环境 | 第55页 |
| 2. 实验方法 | 第55-57页 |
| 2.1 动物实验 | 第55-56页 |
| 2.2 H&E染色、免疫组化、免疫荧光 | 第56-57页 |
| 3. 实验结果 | 第57-60页 |
| 3.1 CEH与CDDP联用对裸鼠移植瘤的生长抑制及毒性作用 | 第57-59页 |
| 3.2 CEH与CDDP联用可以促进裸鼠移植瘤内细胞的凋亡 | 第59-60页 |
| 3.3 CEH与CDDP联用可以激活荷瘤小鼠体内c-Jun/JNK信号通路，抑制P-gp的表达 | 第60页 |
| 4. 讨论 | 第60-61页 |
| 5. 本章小结 | 第61-70页 |
| 结论 | 第70-71页 |
| 主要创新点 | 第71-72页 |
| 展望 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
