| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第13-30页 |
| 1.1 肠道病毒71型 | 第13-18页 |
| 1.1.1 概述 | 第13-14页 |
| 1.1.2 EV71复制与感染 | 第14-15页 |
| 1.1.3 EV71的致病机理 | 第15-16页 |
| 1.1.4 EV71感染的相关疾病 | 第16页 |
| 1.1.5 EV71流行概况 | 第16-17页 |
| 1.1.6 EV71的实验室诊断和治疗 | 第17-18页 |
| 1.2 微小RNA（MIRNA） | 第18-20页 |
| 1.2.1 概述 | 第18页 |
| 1.2.2 成熟miRNA的生物合成 | 第18-19页 |
| 1.2.3 成熟miRNA的作用机制 | 第19-20页 |
| 1.3 MIRNA与EV71的相互作用 | 第20-26页 |
| 1.3.1 概述 | 第20-21页 |
| 1.3.2 miRNA与EV71的相互作用 | 第21-24页 |
| 1.3.3 EV71与其它肠道病毒的作用 | 第24-26页 |
| 1.4 磷脂酰肌醇结合网格蛋白组装蛋白(PICALM) | 第26-27页 |
| 1.4.1 概述 | 第26页 |
| 1.4.2 PICALM在病毒感染过程中的作用 | 第26-27页 |
| 1.5 研究目的，方法，实验设计方案和意义 | 第27-30页 |
| 1.5.1 研究目的 | 第27页 |
| 1.5.2 研究方法 | 第27-29页 |
| 1.5.3 研究意义 | 第29-30页 |
| 第二章 EV71感染SK-N-SH神经细胞引起MIR-155的水平上升 | 第30-42页 |
| 2.1 实验仪器及材料 | 第30-34页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第30-32页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第32-33页 |
| 2.1.3 实验材料 | 第33页 |
| 2.1.4 主要溶液配制 | 第33-34页 |
| 2.2 实验方法 | 第34-38页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第34-35页 |
| 2.2.2 EV71传代 | 第35页 |
| 2.2.3 EV71滴度TCID50检测 | 第35-36页 |
| 2.2.4 miRNA基因芯片 | 第36页 |
| 2.2.5 荧光实时定量PCR（qRT-PCR）验证miRNA基因芯片结果 | 第36-38页 |
| 2.2.6 统计学分析 | 第38页 |
| 2.3 实验结果 | 第38-42页 |
| 2.3.1 miRNA表达谱差异分析 | 第38-39页 |
| 2.3.2 QRT-PCR验证EV71感染前后miR-155的表达 | 第39-40页 |
| 2.3.3 miR-155的表达水平与EV71感染时间呈正相关 | 第40-41页 |
| 2.3.4 miR-155的表达水平与EV71感染滴度呈正相关 | 第41-42页 |
| 第三章 MIR-155能抑制EV71在神经细胞SK-N-SH中的复制 | 第42-53页 |
| 3.1 实验仪器及材料 | 第42页 |
| 3.2 实验方法 | 第42-47页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第42页 |
| 3.2.2 miRNA的转染 | 第42-43页 |
| 3.2.3 miRNA转染效率的测定 | 第43页 |
| 3.2.4 QRT-PCR检测miRNA抑制EV71病毒核酸 | 第43-44页 |
| 3.2.5 Western blot检测miRNA抑制EV71复制的能力 | 第44-46页 |
| 3.2.6 统计学分析 | 第46-47页 |
| 3.3.实验结果 | 第47-53页 |
| 3.3.1 miR-155 mimic转染SK-N-SH神经细胞后引起miR-155水平升高 | 第47-48页 |
| 3.3.2 miR-155减缓了细胞的病变效应（CPE） | 第48-49页 |
| 3.3.3 miR-155降低了EV71的病毒滴度 | 第49-50页 |
| 3.3.4 miR-155抑制EV71核酸的复制 | 第50-51页 |
| 3.3.5 miR-155抑制EV71 VP1蛋白的表达 | 第51-53页 |
| 第四章 MIR-155通过靶向PICALM抑制EV71的复制 | 第53-76页 |
| 4.1 实验仪器及材料 | 第53页 |
| 4.2 实验方法 | 第53-63页 |
| 4.2.1 细胞培养 | 第53页 |
| 4.2.2 miRNA的转染 | 第53页 |
| 4.2.3 相关质粒图谱 | 第53-54页 |
| 4.2.4 miR-155与PICALM靶向关系的验证 | 第54-62页 |
| 4.2.5 PICALM过表达质粒的构建 | 第62页 |
| 4.2.6 PICALM干扰基因的验证 | 第62-63页 |
| 4.2.7 QRT-PCR检测PICALM mRNA的表达 | 第63页 |
| 4.2.8 Western blotting检测PICALM蛋白的表达 | 第63页 |
| 4.2.9 QRT-PCR检测EV71 mRNA的表达 | 第63页 |
| 4.2.10 Western blotting检测EV71蛋白的表达 | 第63页 |
| 4.2.11 统计学分析 | 第63页 |
| 4.3 实验结果 | 第63-76页 |
| 4.3.1 miR-155靶基因PICALM的验证 | 第63-65页 |
| 4.3.2 EV71感染后，PICALM蛋白水平下降 | 第65-66页 |
| 4.3.3 PICALM下调抑制EV71的复制 | 第66-70页 |
| 4.3.4 miR-155通过靶向PICALM抑制EV71的复制 | 第70-73页 |
| 4.3.5 讨论 | 第73-76页 |
| 第五章 结论及展望 | 第76-77页 |
| 5.1 结论 | 第76页 |
| 5.2 展望 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-86页 |
| 致谢 | 第86-88页 |
| 攻读硕士学位期间发表的文章 | 第88-89页 |
