| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略语/符号说明 | 第12-14页 |
| 前言 | 第14-18页 |
| 研究现状、成果 | 第14-16页 |
| 研究目的、方法 | 第16-18页 |
| 一、肝癌小鼠原位模型的建立与优化 | 第18-43页 |
| 1.1 对象和方法 | 第18-25页 |
| 1.1.1 细胞系 | 第18页 |
| 1.1.2 实验小鼠 | 第18-19页 |
| 1.1.3 主要实验仪器 | 第19页 |
| 1.1.4 主要实验试剂 | 第19-20页 |
| 1.1.5 分析软件 | 第20页 |
| 1.1.6 细胞的培养、传代、计数 | 第20-21页 |
| 1.1.7 小鼠皮下瘤模型的建立 | 第21-22页 |
| 1.1.8 肝内细胞注射和脾内细胞注射建立肝癌原位模型 | 第22页 |
| 1.1.9 肝内组织移植建立肝癌原位模型 | 第22-23页 |
| 1.1.10 小鼠血清、外周血细胞和组织取材 | 第23-24页 |
| 1.1.11 HE、IHC组织染色 | 第24页 |
| 1.1.12 ELISA因子检测 | 第24页 |
| 1.1.13 小动物核磁 | 第24-25页 |
| 1.2 结果 | 第25-39页 |
| 1.2.1 Hepa1-6皮下瘤模型的建立 | 第25-27页 |
| 1.2.2 肿瘤细胞尾静脉注射建立原位肝癌模型 | 第27-29页 |
| 1.2.3 脾内注射肿瘤细胞建立肝癌原位模型 | 第29-31页 |
| 1.2.4 肝内注射肿瘤细胞建立肝癌原位模型 | 第31-33页 |
| 1.2.5 肝内组织移植建立肝癌原位模型 | 第33-37页 |
| 1.2.6 肝癌小鼠原位模型免疫微环境的检测 | 第37-39页 |
| 1.3 讨论 | 第39-42页 |
| 1.3.1 建立移植型肝癌小鼠模型的方法学 | 第39-41页 |
| 1.3.2 移植型肝癌小鼠原位模型的免疫微环境 | 第41-42页 |
| 1.4 小结 | 第42-43页 |
| 二、TEX在肝癌免疫治疗中的功能研究 | 第43-89页 |
| 2.1 对象和方法 | 第44-59页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第44页 |
| 2.1.2 实验试剂配制 | 第44-46页 |
| 2.1.3 主要实验仪器耗材 | 第46-47页 |
| 2.1.4 主要实验试剂 | 第47-49页 |
| 2.1.5 exosome的提取 | 第49-50页 |
| 2.1.6 exosme的电镜鉴定 | 第50页 |
| 2.1.7 PKH67标记exosome | 第50-51页 |
| 2.1.8 早期核内体、晚期核内体、溶酶体和细胞核的标记 | 第51页 |
| 2.1.9 DC细胞表面因子检测 | 第51页 |
| 2.1.10 脾细胞和淋巴结细胞的提取 | 第51-52页 |
| 2.1.11 exosome刺激DC2.4 | 第52页 |
| 2.1.12 CFSE染色 | 第52页 |
| 2.1.13 LDH实验 | 第52-54页 |
| 2.1.14 提取细胞蛋白 | 第54页 |
| 2.1.15 bradford法测蛋白浓度 | 第54页 |
| 2.1.16 western blot | 第54-55页 |
| 2.1.17 小鼠肿瘤组织内部免疫细胞的分离 | 第55-56页 |
| 2.1.18 核蛋白FOXP3的染色 | 第56页 |
| 2.1.19 人外周血T细胞的分离和DC的诱导 | 第56-57页 |
| 2.1.20 DC的示踪 | 第57页 |
| 2.1.21 细胞裂解物抗原的制备 | 第57页 |
| 2.1.22 HE染色与免疫组化染色 | 第57-59页 |
| 2.2 结果 | 第59-83页 |
| 2.2.1 Hepa1-6来源exosome的表征 | 第59-60页 |
| 2.2.2 TEX的体外摄取 | 第60-64页 |
| 2.2.3 TEX的体外活化与功能研究 | 第64-67页 |
| 2.2.4 TEX与细胞裂解物的比较 | 第67-68页 |
| 2.2.5 TEX在小鼠皮下瘤模型抗肝癌免疫功能的测试 | 第68-73页 |
| 2.2.6 TEX在小鼠原位瘤模型抗肝癌免疫功能的测试 | 第73-77页 |
| 2.2.7 TEX体内作用机制的初步研究 | 第77-79页 |
| 2.2.8 TEX对人肝癌细胞免疫杀伤能力的研究 | 第79-80页 |
| 2.2.9 TEX对其他肿瘤交叉保护能力的研究 | 第80-83页 |
| 2.3 讨论 | 第83-88页 |
| 2.3.1 TEX是肝癌有效抗原载体 | 第83-84页 |
| 2.3.2 TEX有效活化DC进而促进T细胞增殖分化 | 第84-85页 |
| 2.3.3 TEX作为抗原抑制肿瘤生长，改善免疫环境 | 第85-86页 |
| 2.3.4 TEX的交叉保护 | 第86页 |
| 2.3.5 细胞系的选择 | 第86-88页 |
| 2.4 小结 | 第88-89页 |
| 全文结论 | 第89-90页 |
| 论文创新点 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-102页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第102-103页 |
| 附录 | 第103-104页 |
| 综述 Exosome与肿瘤免疫及树突状细胞系DC2.4的应用 | 第104-124页 |
| 综述参考文献 | 第114-124页 |
| 致谢 | 第124-125页 |
| 个人简历 | 第125页 |
