| 致谢 | 第4-6页 |
| 中文摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第1章 引言 | 第14-26页 |
| 1.1 诱导性多能干细胞概述 | 第14-19页 |
| 1.1.1 发育和胚胎干细胞 | 第14-15页 |
| 1.1.2 重编程 | 第15-16页 |
| 1.1.3 诱导性多能干细胞的诞生与发展 | 第16-18页 |
| 1.1.4 诱导性多能干细胞的应用前景及存在的问题 | 第18-19页 |
| 1.2 小分子化合物在iPS研究中的应用 | 第19-25页 |
| 1.2.1 促进iPS诱导的小分子化合物 | 第20-24页 |
| 1.2.2 全化合物诱导iPS | 第24-25页 |
| 1.3 本论文的研究目标 | 第25-26页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第26-43页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-31页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第26页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第26-27页 |
| 2.1.3 质粒 | 第27页 |
| 2.1.4 抗体 | 第27页 |
| 2.1.5 药品与试剂 | 第27-29页 |
| 2.1.6 细胞培养液 | 第29-31页 |
| 2.1.7 实验仪器 | 第31页 |
| 2.2 实验方法 | 第31-43页 |
| 2.2.1 原代OG2 MEF细胞的分离 | 第31-32页 |
| 2.2.2 滋养层细胞（Feeder）的制备 | 第32-33页 |
| 2.2.3 逆转录病毒包装及病毒感染 | 第33页 |
| 2.2.4 四因子iPS化合物筛选及iPS克隆挑选 | 第33-34页 |
| 2.2.5 Oct4，Klf4，Sox2三因子诱导iPS | 第34页 |
| 2.2.6 Oct4，Klf4两因子诱导iPS | 第34-35页 |
| 2.2.7 Klf4，Sox2，c-Myc三因子诱导iPS | 第35页 |
| 2.2.8 化合物诱导iPS | 第35-36页 |
| 2.2.9 诱导iPS效率定量检测 | 第36页 |
| 2.2.10 碱性磷酸酶染色 | 第36页 |
| 2.2.11 免疫荧光染色 | 第36-37页 |
| 2.2.12 PCR检测外源病毒基因插入 | 第37页 |
| 2.2.13 Real-time PCR检测iPS细胞多能性基因表达及外源病毒基因沉默 | 第37-38页 |
| 2.2.14 畸胎瘤形成实验 | 第38-39页 |
| 2.2.15 嵌合体形成实验 | 第39页 |
| 2.2.16 Bisulfate sequencing鉴定iPS克隆Oct4，Nanog基因启动子甲基化程度 | 第39-40页 |
| 2.2.17 核型分析 | 第40页 |
| 2.2.18 TK基因突变实验 | 第40-43页 |
| 第3章 实验结果 | 第43-75页 |
| 3.1 BrdU促进四因子诱导iPS | 第43-51页 |
| 3.1.1 四因子诱导iPS的高通量化合物筛选体系 | 第43-44页 |
| 3.1.2 BrdU提高四因子诱导iPS的效率 | 第44-46页 |
| 3.1.3 BrdU能加快重编程进程 | 第46-47页 |
| 3.1.4 BrdU与四因子诱导得到的iPS的多能性鉴定 | 第47-51页 |
| 3.2 BrdU提高三因子和二因子诱导iPS的效率 | 第51-52页 |
| 3.2.1 BrdU提高三因子诱导iPS的效率 | 第51-52页 |
| 3.2.2 BrdU提高两因子诱导iPS的效率 | 第52页 |
| 3.3 BrdU能替代Oct4与其他因子完成iPS诱导 | 第52-55页 |
| 3.3.1 BrdU提高Oct4的表达 | 第52-54页 |
| 3.3.2 BrdU能代替Oct4与其他三因子诱导iPS | 第54-55页 |
| 3.4 BrdU能促进CiPS诱导 | 第55-67页 |
| 3.4.1 BrdU能提高已报道化合物组合诱导CiPS的效率 | 第55-58页 |
| 3.4.2 BrdU与已报到化合物组合诱导得到CiPS的多能性鉴定 | 第58-64页 |
| 3.4.3 BrdU与三个化合物组合诱导CiPS | 第64-65页 |
| 3.4.4 BrdU与三个化合物组合诱导得到CiPS的多能性鉴定 | 第65-67页 |
| 3.5 BrdU作用机制的探讨 | 第67-75页 |
| 3.5.1 BrdU是否致突变 | 第68-69页 |
| 3.5.2 BrdU的作用时程 | 第69-70页 |
| 3.5.3 BrdU对维持自我更新的作用 | 第70-71页 |
| 3.5.4 BrdU对重编程过程中基因表达的影响 | 第71-74页 |
| 3.5.5 BrdU影响甲基化水平 | 第74-75页 |
| 第4章 结论和讨论 | 第75-79页 |
| 参考文献 | 第79-88页 |
| 附录 | 第88-100页 |
| 附录1 检测外源病毒基因插入PCR的引物序列和反应体系 | 第88-89页 |
| 附录2 检测iPS细胞多能性基因表达及外源病毒基因沉默的引物序列和反应体系 | 第89-91页 |
| 附录3 Bisulfate sequencing实验的PCR引物序列和反应体系 | 第91-94页 |
| 附录4 表达谱芯片GO-BP分析结果（Top 10） | 第94-100页 |
| 缩略语表 | 第100-103页 |
| 作者简历 | 第103-104页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第104页 |
