| 摘要 | 第7-9页 |
| abstract | 第9-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-30页 |
| 1.1 柑橘褐斑病概况 | 第12-17页 |
| 1.1.1 发生与分布 | 第12页 |
| 1.1.2 病原分类地位及形态特征 | 第12-13页 |
| 1.1.3 症状及循环规律 | 第13-14页 |
| 1.1.4 致病机理 | 第14-16页 |
| 1.1.5 防治技术 | 第16-17页 |
| 1.2 柑橘褐斑病菌功能基因研究进展 | 第17-21页 |
| 1.2.1 毒素合成相关基因 | 第17-18页 |
| 1.2.2 信号转导基因 | 第18-20页 |
| 1.2.3 其它基因 | 第20-21页 |
| 1.3 SNF1蛋白激酶研究进展 | 第21-24页 |
| 1.3.1 酿酒酵母SNF1蛋白激酶结构及功能 | 第22-23页 |
| 1.3.2 植物病原真菌SNF1相关研究 | 第23-24页 |
| 1.4 铁离子通透酶FTR1研究进展 | 第24-30页 |
| 1.4.1 酿酒酵母Ftr1p结构 | 第24-25页 |
| 1.4.2 酿酒酵母铁离子的吸收转运 | 第25-27页 |
| 1.4.3 丝状真菌FTR1相关研究 | 第27-30页 |
| 第2章 引言 | 第30-32页 |
| 第3章 柑橘褐斑病菌原生质体制备条件的优化 | 第32-38页 |
| 3.1 材料、仪器与试剂 | 第32-33页 |
| 3.1.1 材料 | 第32页 |
| 3.1.2 主要仪器设备 | 第32页 |
| 3.1.3 主要试剂及储备液配制 | 第32-33页 |
| 3.2 试验方法 | 第33-34页 |
| 3.2.1 菌株活化 | 第33页 |
| 3.2.2 菌株培养 | 第33页 |
| 3.2.3 原生质体制备 | 第33-34页 |
| 3.2.4 试验设置 | 第34页 |
| 3.2.5 数据分析 | 第34页 |
| 3.3 结果与分析 | 第34-36页 |
| 3.3.1 菌龄对原生质体释放量的影响 | 第34-35页 |
| 3.3.2 酶配比对原生质体释放量的影响 | 第35页 |
| 3.3.3 酶解时间对原生质体释放量的影响 | 第35-36页 |
| 3.3.4 原生质体形态观测 | 第36页 |
| 3.4 结论与讨论 | 第36-38页 |
| 第4章 柑橘褐斑病菌SNF1基因生物学功能初步研究 | 第38-66页 |
| 4.1 材料、仪器与试剂 | 第38-40页 |
| 4.1.1 材料 | 第38页 |
| 4.1.2 主要仪器设备 | 第38页 |
| 4.1.3 主要试剂及储备液配置 | 第38-40页 |
| 4.2 试验方法 | 第40-53页 |
| 4.2.1 CTAB法提取基因组DNA | 第40-41页 |
| 4.2.2 质粒pCB1003扩繁 | 第41页 |
| 4.2.3 引物设计合成 | 第41-42页 |
| 4.2.4 AaSNF1基因敲除盒的构建 | 第42-45页 |
| 4.2.5 PEG介导的原生质体遗传转化 | 第45页 |
| 4.2.6 ΔAaSnf1突变体菌株筛选验证 | 第45-49页 |
| 4.2.7 AaSNF1功能回补菌株构建 | 第49-52页 |
| 4.2.8 菌落形态及菌丝生长速率观测 | 第52页 |
| 4.2.9 产孢量及孢子萌发率观测 | 第52页 |
| 4.2.10 压力筛选 | 第52-53页 |
| 4.2.11 致病力测定 | 第53页 |
| 4.2.12 碳源利用 | 第53页 |
| 4.3 结果与分析 | 第53-62页 |
| 4.3.1 AaSNF1基因敲除盒构建 | 第53-54页 |
| 4.3.2 AaSNF1基因敲除及突变体筛选验证 | 第54-55页 |
| 4.3.3 AaSNF1功能回补菌株构建 | 第55-56页 |
| 4.3.4 AaSNF1与菌落形态和生长速度有关 | 第56-57页 |
| 4.3.5 AaSNF1与产孢量、孢子形态及孢子萌发速率有关 | 第57-58页 |
| 4.3.6 AaSNF1与细胞壁抑制剂敏感性有关 | 第58-61页 |
| 4.3.7 AaSNF1缺失突变体菌株致病力下降 | 第61页 |
| 4.3.8 AaSNF1影响柑橘褐斑病菌对碳源的利用 | 第61-62页 |
| 4.4 结论与讨论 | 第62-66页 |
| 4.4.1 AaSNF1参与调控柑橘褐斑病菌的生长产孢 | 第63页 |
| 4.4.2 AaSNF1参与调控柑橘褐斑病菌的碳源利用 | 第63-64页 |
| 4.4.3 AaSNF1参与调控柑橘褐斑病菌的细胞壁功能 | 第64页 |
| 4.4.4 AaSNF1参与调控柑橘褐斑病菌的致病力 | 第64页 |
| 4.4.5 其他 | 第64-66页 |
| 第5章 柑橘褐斑病菌FTR1基因生物学功能初步研究 | 第66-82页 |
| 5.1 材料、仪器与试剂 | 第66页 |
| 5.1.1 材料 | 第66页 |
| 5.1.2 主要仪器设备 | 第66页 |
| 5.1.3 主要试剂及储备液配置 | 第66页 |
| 5.2 试验方法 | 第66-71页 |
| 5.2.1 CTAB法提取基因组DNA | 第66页 |
| 5.2.2 质粒p CB1003扩繁 | 第66-67页 |
| 5.2.3 引物设计合成 | 第67页 |
| 5.2.4 AaFTR1基因敲除盒的构建 | 第67页 |
| 5.2.5 PEG介导的原生质体遗传转化 | 第67页 |
| 5.2.6 ΔAaFtr1突变体菌株筛选验证 | 第67-68页 |
| 5.2.7 Aa FTR1功能回补菌株构建 | 第68页 |
| 5.2.8 菌落形态及菌丝生长速率观测 | 第68页 |
| 5.2.9 产孢量及孢子萌发率观测 | 第68页 |
| 5.2.10 压力筛选 | 第68页 |
| 5.2.11 致病力测定 | 第68页 |
| 5.2.12 基因表达分析 | 第68-70页 |
| 5.2.13 细胞铁含量测定 | 第70-71页 |
| 5.3 结果与分析 | 第71-79页 |
| 5.3.1 AaFTR1基因敲除盒构建 | 第71-72页 |
| 5.3.2 AaFTR1基因敲除及突变体筛选验证 | 第72-74页 |
| 5.3.3 AaFTR1功能回补菌株构建 | 第74页 |
| 5.3.4 AaFTR1的缺失不影响菌落形态及生长速度 | 第74-75页 |
| 5.3.5 AaFTR1的缺失不影响产孢量、孢子形态及孢子萌发率 | 第75-76页 |
| 5.3.6 AaFTR1的缺失不影响菌株对压力胁迫的应答 | 第76-77页 |
| 5.3.7 AaFTR1缺失不影响菌株致病性 | 第77-78页 |
| 5.3.8 AaFTR1在真菌致病过程及响应不同铁含量的表达分析 | 第78-79页 |
| 5.3.9 AaFTR1参与柑橘褐斑病菌的铁离子代谢 | 第79页 |
| 5.4 结论与讨论 | 第79-82页 |
| 第6章 主要结论与展望 | 第82-84页 |
| 6.1 主要结论 | 第82页 |
| 6.2 展望 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-94页 |
| 附录 缩略词与中英文对照 | 第94-96页 |
| 致谢 | 第96-98页 |
| 攻读学位期间发表的论文及参与科研项目 | 第98页 |
