| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章绪论 | 第18-33页 |
| 1.1 引言 | 第18页 |
| 1.2 国内外研究进展 | 第18-30页 |
| 1.2.1 萜类化合物 | 第18-19页 |
| 1.2.2 萜类化合物化学生态学效应 | 第19页 |
| 1.2.3 萜类化合物的商业价值 | 第19-20页 |
| 1.2.4 萜类化合物在植物体内合成途径 | 第20-26页 |
| 1.2.5 植物萜类化合物的人工生产 | 第26-30页 |
| 1.2.6 毛竹与毛竹基因组 | 第30页 |
| 1.3 研究目的和意义 | 第30-31页 |
| 1.4 研究基础与主要研究内容 | 第31-32页 |
| 1.4.1 研究基础 | 第31页 |
| 1.4.2 主要研究内容 | 第31-32页 |
| 1.5 研究技术路线 | 第32-33页 |
| 第二章毛竹萜类合成酶基因（MoTPS）的克隆 | 第33-63页 |
| 2.1 实验材料 | 第33-35页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第33页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第33-34页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第34-35页 |
| 2.2 实验方法 | 第35-41页 |
| 2.2.1 毛竹组织总RNA的提取 | 第35页 |
| 2.2.2 RNA质量检测 | 第35页 |
| 2.2.3 cDNA文库构建 | 第35-36页 |
| 2.2.4 MoTPS生物信息学分析 | 第36页 |
| 2.2.5 MoTPS全长cDNA的获取 | 第36-39页 |
| 2.2.6 凝胶电泳目的条带的纯化回收 | 第39页 |
| 2.2.7 pMD-MoTPS重组质粒的构建与转化 | 第39-41页 |
| 2.2.8 MoTPS序列测定 | 第41页 |
| 2.2.9 pMD-MoTPS重组质粒提取 | 第41页 |
| 2.3 结果与分析 | 第41-62页 |
| 2.3.1 MoTPS1-15 基因及其编码蛋白的生物信息学分析 | 第41-47页 |
| 2.3.2 MoTPS1-15 的PCR扩增及克隆结果 | 第47-48页 |
| 2.3.3 克隆到的MoTPS基因测序结果 | 第48-62页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第62-63页 |
| 第三章 MoTPS原核表达体系的建立和优化 | 第63-82页 |
| 3.1 实验材料 | 第63-64页 |
| 3.1.1 质粒与菌株 | 第63页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第63-64页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第64页 |
| 3.2 实验方法 | 第64-71页 |
| 3.2.1 重组表达质粒的构建 | 第64-67页 |
| 3.2.2 重组表达质粒的转化 | 第67页 |
| 3.2.3 MoTPS在大肠杆菌中的表达 | 第67-69页 |
| 3.2.4 包涵体的破碎、复性和纯化 | 第69-71页 |
| 3.2.5 MoTPS蛋白电泳检测 | 第71页 |
| 3.3 结果与分析 | 第71-80页 |
| 3.3.1 重组表达质粒小抽电泳鉴定 | 第71-73页 |
| 3.3.2 重组蛋白的SDS-PAGE检测 | 第73-80页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第80-82页 |
| 第四章 MoTPS毕赤酵母分泌表达体系的建立 | 第82-97页 |
| 4.1 实验材料 | 第82-83页 |
| 4.1.1 质粒与菌株 | 第82页 |
| 4.1.2 主要试剂耗材 | 第82-83页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第83页 |
| 4.2 实验方法 | 第83-90页 |
| 4.2.1 酵母表达重组质粒的构建 | 第83-84页 |
| 4.2.2 酵母表达重组质粒转化大肠杆菌 | 第84-85页 |
| 4.2.3 酵母表达重组质粒中量抽提 | 第85页 |
| 4.2.4 重组质粒线性化 | 第85-86页 |
| 4.2.5 线性化产物清洁 | 第86页 |
| 4.2.6 酵母表达重组质粒转化毕赤酵母 | 第86-88页 |
| 4.2.7 MoTPS在毕赤酵母中的表达 | 第88-89页 |
| 4.2.8 MoTPS蛋白电泳检测 | 第89-90页 |
| 4.3 结果与分析 | 第90-95页 |
| 4.3.1 中抽电泳鉴定 | 第90-91页 |
| 4.3.2 酵母中重组阳性克隆筛选 | 第91页 |
| 4.3.3 重组蛋白的SDS-PAGE检测 | 第91-95页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第95-97页 |
| 第五章 MoTPS的功能鉴定及组织特异性表达 | 第97-109页 |
| 5.1 实验材料 | 第97-98页 |
| 5.1.1 主要试剂耗材 | 第97-98页 |
| 5.1.2 主要仪器设备 | 第98页 |
| 5.2 实验方法 | 第98-100页 |
| 5.2.1 酵母表达蛋白的脱盐纯化 | 第98页 |
| 5.2.2 蛋白的定量 | 第98-99页 |
| 5.2.3 标准品的制备和检测 | 第99页 |
| 5.2.4 蛋白酶活测定 | 第99-100页 |
| 5.3 结果与分析 | 第100-108页 |
| 5.3.1 蛋白脱盐后SDS-PAGE检测结果 | 第100-101页 |
| 5.3.2 蛋白定量结果分析 | 第101页 |
| 5.3.3 标准品测定结果分析 | 第101-106页 |
| 5.3.4 酶活测定结果分析 | 第106-108页 |
| 5.4 小结与讨论 | 第108-109页 |
| 第六章结论与展望 | 第109-112页 |
| 6.1 结论 | 第109-110页 |
| 6.2 展望 | 第110-112页 |
| 参考文献 | 第112-124页 |
| 在读期间的学术研究 | 第124-125页 |
| 致谢 | 第125页 |
