摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第11-25页 |
1.1 稻米淀粉的组成与品质评价 | 第11-14页 |
1.1.1 稻米胚乳淀粉的组成 | 第11页 |
1.1.2 稻米淀粉的组成 | 第11-12页 |
1.1.3 稻米淀粉的结构 | 第12页 |
1.1.4 稻米品质评价 | 第12-14页 |
1.2 淀粉的合成关键酶及其基因研究进展 | 第14-19页 |
1.2.1 水稻淀粉的生物合成 | 第14页 |
1.2.2 ADP-葡萄糖焦磷酸化酶(AGPP) | 第14-15页 |
1.2.3 颗粒结合型淀粉合成酶(GBSS) | 第15-16页 |
1.2.4 可溶性淀粉合成酶(SSS) | 第16页 |
1.2.5 淀粉分支酶(SBE) | 第16-17页 |
1.2.6 淀粉去分支酶(DBE) | 第17页 |
1.2.7 淀粉合成相关酶及基因概要 | 第17-19页 |
1.3 基因工程改良稻米淀粉品质研究进展 | 第19-20页 |
1.4 与水稻直链淀粉含量相关的重要基因及其分子生物学研究进 | 第20-22页 |
1.4.1 直链淀粉的用途 | 第20页 |
1.4.2 Wx基因 | 第20-21页 |
1.4.3 RBE3基因 | 第21页 |
1.4.4 RBE1基因 | 第21-22页 |
1.5 本文目的及意义 | 第22-25页 |
1.5.1 水稻籽粒灌浆过程中淀粉合成关键酶活性与直链淀粉含量的关系 | 第23页 |
1.5.2 基因工程改良稻米淀粉品质 | 第23-25页 |
第二章 水稻籽粒灌浆过程中淀粉合成相关基因与直链淀粉含量的关系 | 第25-39页 |
2.1 实验材料、试剂和仪器 | 第25-26页 |
2.1.1 实验材料 | 第25页 |
2.1.2 实验试剂 | 第25页 |
2.1.3 实验仪器 | 第25-26页 |
2.2 实验方法 | 第26-31页 |
2.2.1 实验材料的准备 | 第26页 |
2.2.2 RNA的提取、纯化和反转 | 第26-29页 |
2.2.3 水稻成熟种子直链淀粉含量测定 | 第29-30页 |
2.2.4 稻米糊化温度测定 | 第30-31页 |
2.2.5 籽粒横断面扫描电镜观察 | 第31页 |
2.3. 实验结果 | 第31-37页 |
2.3.1 实验材料的观察与鉴定 | 第31页 |
2.3.2 理化性质分析 | 第31-37页 |
2.4 讨论 | 第37-39页 |
第三章 中花11BEⅡa纯合突变体筛选与鉴定 | 第39-49页 |
3.1 实验材料和方法 | 第39页 |
3.1.1 实验材料 | 第39页 |
3.1.2 实验试剂及试剂盒 | 第39页 |
3.1.3 实验仪器 | 第39页 |
3.2 实验方法 | 第39-42页 |
3.2.1 CTAB法提取叶片总DNA | 第39页 |
3.2.2 普通PCR反应 | 第39-40页 |
3.2.3 高保真PCR反应 | 第40-41页 |
3.2.4 琼脂糖凝胶电泳 | 第41页 |
3.2.5 水稻成熟种子直链淀粉含量测定 | 第41页 |
3.2.6 稻米糊化温度测定 | 第41页 |
3.2.7 籽粒横断面扫描电镜观察 | 第41-42页 |
3.3 结果与分析 | 第42-47页 |
3.3.1 BEⅡa基因突变后对中花11农艺性状的影响 | 第42页 |
3.3.2 BEⅡa突变体的Tilling筛选结果 | 第42-43页 |
3.3.3 测序比对鉴定出BEⅡa基因的突变位点 | 第43-44页 |
3.3.4 BEⅡa基因的蛋白质功能域分析 | 第44-45页 |
3.3.5 BEⅡa基因定量检测 | 第45页 |
3.3.6 突变体直链淀粉含量(AC)的变异 | 第45-46页 |
3.3.7 突变体糊化温度的变异 | 第46-47页 |
3.3.8 淀粉颗粒电镜扫面观察 | 第47页 |
3.4 讨论 | 第47-49页 |
第四章 基因工程提高稻米直链淀粉含量 | 第49-59页 |
4.1 实验材料 | 第49-50页 |
4.1.1 植物受体材料 | 第49页 |
4.1.2 质粒和菌株 | 第49页 |
4.1.3 实验所用培养基及配方 | 第49-50页 |
4.2 实验方法 | 第50-52页 |
4.2.1 Wx基因过表达载体的构建 | 第50页 |
4.2.2 RBE1 RNAi载体构建 | 第50-51页 |
4.2.3 遗传转化及阳性植株鉴定 | 第51-52页 |
4.3 结果与分析 | 第52-56页 |
4.3.1 植物受体材料的鉴定 | 第53-55页 |
4.3.2 淀粉合成关键酶转基因载体的鉴定 | 第55-56页 |
4.3.3 愈伤组织的诱导侵染与分化再生 | 第56页 |
4.4 讨论 | 第56-59页 |
4.4.1 稻米品质改良的途径及意义 | 第56-58页 |
4.4.2 本研究对于稻米品质改良的意义 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-67页 |
致谢 | 第67-68页 |