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远志皂苷生物合成中CYP450s、UGTs的筛选及远志对hDDC酶抑制作用初探

中文摘要第10-12页
ABSTRACT第12-14页
第一章 引言第15-19页
    1.1 立题背景和意义第15-17页
        1.1.1 远志皂苷生物合成中CYP450s与UGTs酶基因的筛选第15-16页
        1.1.2 远志对hDDC酶抑制作用初探第16-17页
    1.2 本课题的研究内容、技术流程图及创新点第17-19页
        1.2.1 研究内容第17页
        1.2.2 技术流程图第17-18页
        1.2.3 创新点第18-19页
第二章 文献综述第19-31页
    2.1 远志皂苷的研究进展第19-21页
        2.1.1 远志皂苷的化学结构第19-20页
        2.1.2 远志皂苷的主要药理活性第20页
        2.1.3 远志皂苷的生产方法第20-21页
    2.2 三萜皂苷的生物合成途径及其关键酶的研究进展[10]第21-29页
        2.2.1 三萜皂苷的生物合成上游途径第21-22页
        2.2.2 三萜皂苷的生物合成中游途径第22-24页
        2.2.3 三萜皂苷的生物合成下游途径第24-26页
        2.2.4 三萜皂苷的生物合成途径中的关键酶第26-28页
        2.2.5 筛选关键酶的主要技术第28-29页
    2.3 抗帕金森病药物靶标酶的研究进展第29-31页
        2.3.1 多巴脱羧酶第29-30页
        2.3.2 儿茶酚氧甲基转移酶第30页
        2.3.3 单胺氧化酶B第30-31页
第三章 远志根与叶的数字基因表达谱分析第31-51页
    3.1 实验材料第31-32页
        3.1.1 植物样本第31页
        3.1.2 实验仪器及试剂第31-32页
    3.2 实验方法第32-36页
        3.2.1 远志根与叶总RNA的提取第32页
        3.2.2 远志根与叶DGE测序实验流程第32-36页
    3.3 实验结果第36-48页
        3.3.1 原始数据统计与过滤第36-37页
        3.3.2 高质量数据的拼接结果第37-38页
        3.3.3 All Unigene的功能注释第38页
        3.3.4 远志根与叶差异表达基因分析第38-45页
        3.3.5 CYP450s与UGTs的筛选结果第45-48页
    3.4 小结与讨论第48-51页
第四章 基于RT-qPCR技术筛选远志皂苷生物合成中CYP450s与UGTs酶基因第51-65页
    4.1 实验材料第51-52页
        4.1.1 植物样本第51页
        4.1.2 实验仪器及试剂第51-52页
    4.2 实验方法第52-54页
        4.2.1 远志根与叶的RNA提取及检验第52页
        4.2.2 实验引物的设计及合成第52页
        4.2.3 mRMA反转录cDNA第52-53页
        4.2.4 SYBR实时荧光定量PCR第53-54页
        4.2.5 实验数据处理第54页
    4.3 实验结果第54-62页
        4.3.1 远志根与叶的RNA的提取结果第54-55页
        4.3.2 RT-qPCR酶基因表达结果第55-58页
        4.3.3 远志生物合成途径中关键CYP450s与UGTs的筛选第58-62页
    4.4 小结与讨论第62-65页
第五章 远志对人源多巴脱羧酶抑制作用初探第65-87页
    5.1 实验材料第65-67页
        5.1.1 植物样本与材料第65-66页
        5.1.2 实验仪器及试剂第66-67页
    5.2 实验方法第67-73页
        5.2.1 远志的系统溶剂萃取法第67-68页
        5.2.2 主要试剂的配制第68-69页
        5.2.3 hDDC与PEPC的表达与纯化第69-71页
        5.2.4 酶活测定方法第71-73页
        5.2.5 蛋白浓度的测定第73页
    5.3 实验结果第73-82页
        5.3.1 远志各萃取部位的出膏率第73-74页
        5.3.2 hDDC与PEPC的纯化结果第74-75页
        5.3.3 远志不同提取物与萃取部位对hDDC的抑制作用第75-82页
    5.4 小结与讨论第82-83页
    附加内容第83-87页
第六章 总结与展望第87-89页
    6.1 研究工作总结第87页
    6.2 展望第87-89页
参考文献第89-100页
攻读学位期间取得的研究成果第100-101页
致谢第101-102页
个人简况及联系方式第102-104页

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