中文摘要 | 第10-12页 |
ABSTRACT | 第12-14页 |
第一章 引言 | 第15-19页 |
1.1 立题背景和意义 | 第15-17页 |
1.1.1 远志皂苷生物合成中CYP450s与UGTs酶基因的筛选 | 第15-16页 |
1.1.2 远志对hDDC酶抑制作用初探 | 第16-17页 |
1.2 本课题的研究内容、技术流程图及创新点 | 第17-19页 |
1.2.1 研究内容 | 第17页 |
1.2.2 技术流程图 | 第17-18页 |
1.2.3 创新点 | 第18-19页 |
第二章 文献综述 | 第19-31页 |
2.1 远志皂苷的研究进展 | 第19-21页 |
2.1.1 远志皂苷的化学结构 | 第19-20页 |
2.1.2 远志皂苷的主要药理活性 | 第20页 |
2.1.3 远志皂苷的生产方法 | 第20-21页 |
2.2 三萜皂苷的生物合成途径及其关键酶的研究进展[10] | 第21-29页 |
2.2.1 三萜皂苷的生物合成上游途径 | 第21-22页 |
2.2.2 三萜皂苷的生物合成中游途径 | 第22-24页 |
2.2.3 三萜皂苷的生物合成下游途径 | 第24-26页 |
2.2.4 三萜皂苷的生物合成途径中的关键酶 | 第26-28页 |
2.2.5 筛选关键酶的主要技术 | 第28-29页 |
2.3 抗帕金森病药物靶标酶的研究进展 | 第29-31页 |
2.3.1 多巴脱羧酶 | 第29-30页 |
2.3.2 儿茶酚氧甲基转移酶 | 第30页 |
2.3.3 单胺氧化酶B | 第30-31页 |
第三章 远志根与叶的数字基因表达谱分析 | 第31-51页 |
3.1 实验材料 | 第31-32页 |
3.1.1 植物样本 | 第31页 |
3.1.2 实验仪器及试剂 | 第31-32页 |
3.2 实验方法 | 第32-36页 |
3.2.1 远志根与叶总RNA的提取 | 第32页 |
3.2.2 远志根与叶DGE测序实验流程 | 第32-36页 |
3.3 实验结果 | 第36-48页 |
3.3.1 原始数据统计与过滤 | 第36-37页 |
3.3.2 高质量数据的拼接结果 | 第37-38页 |
3.3.3 All Unigene的功能注释 | 第38页 |
3.3.4 远志根与叶差异表达基因分析 | 第38-45页 |
3.3.5 CYP450s与UGTs的筛选结果 | 第45-48页 |
3.4 小结与讨论 | 第48-51页 |
第四章 基于RT-qPCR技术筛选远志皂苷生物合成中CYP450s与UGTs酶基因 | 第51-65页 |
4.1 实验材料 | 第51-52页 |
4.1.1 植物样本 | 第51页 |
4.1.2 实验仪器及试剂 | 第51-52页 |
4.2 实验方法 | 第52-54页 |
4.2.1 远志根与叶的RNA提取及检验 | 第52页 |
4.2.2 实验引物的设计及合成 | 第52页 |
4.2.3 mRMA反转录cDNA | 第52-53页 |
4.2.4 SYBR实时荧光定量PCR | 第53-54页 |
4.2.5 实验数据处理 | 第54页 |
4.3 实验结果 | 第54-62页 |
4.3.1 远志根与叶的RNA的提取结果 | 第54-55页 |
4.3.2 RT-qPCR酶基因表达结果 | 第55-58页 |
4.3.3 远志生物合成途径中关键CYP450s与UGTs的筛选 | 第58-62页 |
4.4 小结与讨论 | 第62-65页 |
第五章 远志对人源多巴脱羧酶抑制作用初探 | 第65-87页 |
5.1 实验材料 | 第65-67页 |
5.1.1 植物样本与材料 | 第65-66页 |
5.1.2 实验仪器及试剂 | 第66-67页 |
5.2 实验方法 | 第67-73页 |
5.2.1 远志的系统溶剂萃取法 | 第67-68页 |
5.2.2 主要试剂的配制 | 第68-69页 |
5.2.3 hDDC与PEPC的表达与纯化 | 第69-71页 |
5.2.4 酶活测定方法 | 第71-73页 |
5.2.5 蛋白浓度的测定 | 第73页 |
5.3 实验结果 | 第73-82页 |
5.3.1 远志各萃取部位的出膏率 | 第73-74页 |
5.3.2 hDDC与PEPC的纯化结果 | 第74-75页 |
5.3.3 远志不同提取物与萃取部位对hDDC的抑制作用 | 第75-82页 |
5.4 小结与讨论 | 第82-83页 |
附加内容 | 第83-87页 |
第六章 总结与展望 | 第87-89页 |
6.1 研究工作总结 | 第87页 |
6.2 展望 | 第87-89页 |
参考文献 | 第89-100页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第100-101页 |
致谢 | 第101-102页 |
个人简况及联系方式 | 第102-104页 |