摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-15页 |
引言 | 第15-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-24页 |
1.补体系统的研究概况 | 第16-19页 |
·鱼类补体的介绍及研究进展 | 第16-17页 |
·补体系统的激活 | 第17-19页 |
2 补体调节因子I的研究概况 | 第19-21页 |
·Cfi的介绍及研究进展 | 第19-20页 |
·Cfi的作用机制 | 第20-21页 |
3 补体C3的研究概况 | 第21-22页 |
·C3的介绍及研究进展 | 第21页 |
·C3的作用机制 | 第21-22页 |
4 半滑舌鳎免疫系统的研究概况 | 第22-23页 |
5.本文的技术路线及研究意义 | 第23-24页 |
·技术路线 | 第23页 |
·研究意义 | 第23-24页 |
第二章 半滑舌鳎补体Cfi基因克隆验证、序列分析及重组蛋白的获得及分析 | 第24-52页 |
1 材料与方法 | 第24-35页 |
·实验材料 | 第24-25页 |
·实验鱼 | 第24-25页 |
·试剂和仪器 | 第25页 |
·实验方法 | 第25-35页 |
·半滑舌鳎肝脏组织RNA的提取及c DNA的合成 | 第25-26页 |
·Cs Cfi基因c DNA的克隆验证 | 第26-27页 |
·Cs Cfi基因的生物信息学分析 | 第27页 |
·原核表达载体的构建 | 第27-29页 |
·重组蛋白(r Cs Cfi)的诱导表达及表达产物的初步分析 | 第29页 |
·活性重组蛋白的获得 | 第29-31页 |
·活性蛋白的验证 | 第31-33页 |
·活性蛋白的功能研究 | 第33-35页 |
2 实验结果和分析 | 第35-50页 |
·Cs Cfi序列的验证及比对分析 | 第35-50页 |
·Cs Cfi c DNA序列特征 | 第35-37页 |
·Cs Cfi c DNA序列的进化分析 | 第37-40页 |
·重组蛋白r Cs Cfi的获得及纯化 | 第40-41页 |
·重组蛋白 rCsCfi 可溶形式分析 | 第41-42页 |
·重组蛋白r Cs Cfi的验证 | 第42-43页 |
·重组蛋白r Cs Cfi的抑菌试验 | 第43-46页 |
·重组蛋白r Cs Cfi体内注射 | 第46-50页 |
3.讨论 | 第50-52页 |
第三章 半滑舌鳎补体C3基因克隆、序列分析及鳗弧菌感染前后的表达特征 | 第52-69页 |
1 材料与方法 | 第52-58页 |
·实验材料 | 第52-53页 |
·实验用鱼 | 第52页 |
·试剂和仪器 | 第52-53页 |
·实验方法 | 第53-58页 |
·RACE、PCR和RT-PCR反应的引物合成 | 第53页 |
·半滑舌鳎总RNA的提取 | 第53页 |
·半滑舌鳎补体C3-1 中间未知片段的克隆 | 第53-54页 |
·补体C3-1 c DNA序列末端扩增 | 第54-56页 |
·半滑舌鳎补体C3的生物信息学分析 | 第56-57页 |
·半滑舌鳎补体C3-1 的定量表达分析 | 第57-58页 |
2 实验结果和分析 | 第58-67页 |
·半滑舌鳎C3-1 中间未知片段和 3'端RACE片段的合成 | 第58-59页 |
·Cs C3-1 c DNA的序列特征 | 第59-61页 |
·Cs C3-1 c DNA序列的进化分析 | 第61-65页 |
·半滑舌鳎补体C3-1 m RNA的表达分析 | 第65-67页 |
·半滑舌鳎补体C3-1 m RNA在正常组织中的表达 | 第65-66页 |
·半滑舌鳎补体C3-1 m RNA在感染鳗弧菌后组织中的表达 | 第66-67页 |
3.讨论 | 第67-69页 |
总结与展望 | 第69-71页 |
参考文献 | 第71-81页 |
附录 | 第81-82页 |
致谢 | 第82页 |