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半滑舌鳎补体调控因子I的鉴定、重组表达、功能分析及C3-1基因的初步研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-15页
引言第15-16页
第一章 文献综述第16-24页
 1.补体系统的研究概况第16-19页
   ·鱼类补体的介绍及研究进展第16-17页
   ·补体系统的激活第17-19页
 2 补体调节因子I的研究概况第19-21页
   ·Cfi的介绍及研究进展第19-20页
   ·Cfi的作用机制第20-21页
 3 补体C3的研究概况第21-22页
   ·C3的介绍及研究进展第21页
   ·C3的作用机制第21-22页
 4 半滑舌鳎免疫系统的研究概况第22-23页
 5.本文的技术路线及研究意义第23-24页
   ·技术路线第23页
   ·研究意义第23-24页
第二章 半滑舌鳎补体Cfi基因克隆验证、序列分析及重组蛋白的获得及分析第24-52页
 1 材料与方法第24-35页
   ·实验材料第24-25页
     ·实验鱼第24-25页
     ·试剂和仪器第25页
   ·实验方法第25-35页
     ·半滑舌鳎肝脏组织RNA的提取及c DNA的合成第25-26页
     ·Cs Cfi基因c DNA的克隆验证第26-27页
     ·Cs Cfi基因的生物信息学分析第27页
     ·原核表达载体的构建第27-29页
     ·重组蛋白(r Cs Cfi)的诱导表达及表达产物的初步分析第29页
     ·活性重组蛋白的获得第29-31页
     ·活性蛋白的验证第31-33页
     ·活性蛋白的功能研究第33-35页
 2 实验结果和分析第35-50页
   ·Cs Cfi序列的验证及比对分析第35-50页
     ·Cs Cfi c DNA序列特征第35-37页
     ·Cs Cfi c DNA序列的进化分析第37-40页
     ·重组蛋白r Cs Cfi的获得及纯化第40-41页
     ·重组蛋白 rCsCfi 可溶形式分析第41-42页
     ·重组蛋白r Cs Cfi的验证第42-43页
     ·重组蛋白r Cs Cfi的抑菌试验第43-46页
     ·重组蛋白r Cs Cfi体内注射第46-50页
 3.讨论第50-52页
第三章 半滑舌鳎补体C3基因克隆、序列分析及鳗弧菌感染前后的表达特征第52-69页
 1 材料与方法第52-58页
   ·实验材料第52-53页
     ·实验用鱼第52页
     ·试剂和仪器第52-53页
   ·实验方法第53-58页
     ·RACE、PCR和RT-PCR反应的引物合成第53页
     ·半滑舌鳎总RNA的提取第53页
     ·半滑舌鳎补体C3-1 中间未知片段的克隆第53-54页
     ·补体C3-1 c DNA序列末端扩增第54-56页
     ·半滑舌鳎补体C3的生物信息学分析第56-57页
     ·半滑舌鳎补体C3-1 的定量表达分析第57-58页
 2 实验结果和分析第58-67页
   ·半滑舌鳎C3-1 中间未知片段和 3'端RACE片段的合成第58-59页
   ·Cs C3-1 c DNA的序列特征第59-61页
   ·Cs C3-1 c DNA序列的进化分析第61-65页
   ·半滑舌鳎补体C3-1 m RNA的表达分析第65-67页
     ·半滑舌鳎补体C3-1 m RNA在正常组织中的表达第65-66页
     ·半滑舌鳎补体C3-1 m RNA在感染鳗弧菌后组织中的表达第66-67页
 3.讨论第67-69页
总结与展望第69-71页
参考文献第71-81页
附录第81-82页
致谢第82页

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