摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
符号说明 | 第9-12页 |
1 文献综述 | 第12-21页 |
·肌肉形成概述 | 第12-15页 |
·骨骼肌发生和发育 | 第12-13页 |
·骨骼肌生长发育相关的转录调控因子 | 第13-15页 |
·MicroRNA | 第15-18页 |
·MicroRNA定义及产生机制 | 第15-16页 |
·MicroRNA作用机理 | 第16页 |
·MicroRNA与small interfering RNA的区别 | 第16-17页 |
·MicroRNA的检测方法 | 第17-18页 |
·MicroRNA靶标预测及鉴定 | 第18页 |
·参与调控骨骼肌发育的microRNAs | 第18-20页 |
·miRNA-101a的研究进展 | 第20-21页 |
·本研究的目的和意义 | 第21页 |
2 材料与方法 | 第21-37页 |
·试验材料 | 第21-28页 |
·山羊组织及血液样品 | 第21页 |
·菌株、细胞和载体 | 第21-23页 |
·主要试剂 | 第23-24页 |
·主要试剂的配制 | 第24-26页 |
·主要仪器 | 第26页 |
·主要分子生物学软件及数据库 | 第26-28页 |
·试验方法 | 第28-37页 |
·技术路线 | 第28-29页 |
·山羊miR-101a前体及侧翼序列的扩增及生物信息学分析 | 第29页 |
·miR-101a在山羊不同组织的表达规律分析 | 第29-31页 |
·细胞培养 | 第31-32页 |
·SMSCs的HE染色及融合率的评估 | 第32页 |
·细胞转染 | 第32-33页 |
·细胞增殖试验 | 第33页 |
·miRNA及肌细胞标志基因的表达量分析试验 | 第33-36页 |
·双荧光素酶报告试验 | 第36-37页 |
3 结果与分析 | 第37-51页 |
·山羊miR-101a的克隆及结构分析 | 第37-39页 |
·miR-101a的克隆及测序 | 第37-38页 |
·山羊miR-101a的结构分析 | 第38-39页 |
·miR-101a在山羊不同组织间的表达谱 | 第39-40页 |
·SMSC分化模型的建立 | 第40-42页 |
·SMSC分化过程中miR-101a的表达 | 第42页 |
·miR-101a对SMSC分化的影响 | 第42-45页 |
·转染效率的检测 | 第42-43页 |
·过表达miR-101a促进SMSC分化 | 第43-44页 |
·抑制miR-101a阻碍SMSC分化 | 第44-45页 |
·miR-101a对SMSC增殖的影响 | 第45-47页 |
·过表达miR-101a对SMSC增殖的影响 | 第46页 |
·抑制miR-101a对SMSC增殖的影响 | 第46-47页 |
·miR-101a靶基因的预测结果 | 第47-48页 |
·miR-101a靶基因EZH2的载体构建与测序 | 第48-49页 |
·双荧光素酶报告基因检测系统验证miR-101a靶标基因EZH2 | 第49-50页 |
·miR-101a对骨骼肌卫星细胞内源性EZH2的调控 | 第50-51页 |
4 讨论 | 第51-56页 |
·MicroRNA的表达及检测 | 第51-52页 |
·MicroRNA对细胞分化的影响 | 第52-54页 |
·MicroRNA mimic或inhibitor的使用 | 第54页 |
·MicroRNA靶基因的鉴定 | 第54-56页 |
5 结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-65页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第65-66页 |
致谢 | 第66页 |