| 摘要 | 第1-7页 |
| Absti*act | 第7-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-21页 |
| 第一节 乙肝病毒、乙肝病毒X蛋白和HCC | 第14-17页 |
| 第二节 SPHK1与癌症 | 第17-19页 |
| 第三节 研究内容、目的与意义 | 第19-21页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第21-45页 |
| 第一节 实验材料 | 第21-24页 |
| ·临床标本及来源 | 第21页 |
| ·细胞系及来源 | 第21页 |
| ·菌株及来源 | 第21页 |
| ·实验动物及来源 | 第21-22页 |
| ·质粒及来源 | 第22页 |
| ·siRNA干扰片段及来源 | 第22页 |
| ·抗体及其来源 | 第22页 |
| ·试剂及来源 | 第22-23页 |
| ·实验仪器及来源 | 第23-24页 |
| 第二节 实验方法 | 第24-45页 |
| ·质粒的小量提取 | 第24-25页 |
| ·质粒的纯化及定量 | 第25-26页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第26页 |
| ·提取细胞全基因组DNA | 第26-27页 |
| ·使用Trizol法提取组织及细胞的总RNA | 第27-28页 |
| ·RNA反转录成cDNA | 第28-29页 |
| ·分子克隆 | 第29-33页 |
| ·实时定量PCR | 第33-34页 |
| ·细胞培养 | 第34-35页 |
| ·基因转染 | 第35-36页 |
| ·双荧光素酶报告基因检测 | 第36-37页 |
| ·染色质免疫共沉淀 | 第37-39页 |
| ·蛋白质印迹法 | 第39-41页 |
| ·免疫组织化学技术 | 第41-42页 |
| ·平板克隆形成实验 | 第42-43页 |
| ·MTT实验检测细胞增殖 | 第43页 |
| ·动物体内成瘤实验 | 第43-44页 |
| ·统计学分析 | 第44-45页 |
| 第三章 实验结果 | 第45-57页 |
| 第一节 HBx对SPHK1表达的影响 | 第45-48页 |
| 第二节 HBx通过转录因子AP2a上调SPHK1的表达 | 第48-53页 |
| 第三节 HBx通过SPHK1促进肝癌细胞的增殖 | 第53-57页 |
| 第四章 讨论 | 第57-59页 |
| 第五章 小结 | 第59页 |
| 第六章 展望 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 附录 常规溶液配制 | 第64-67页 |
| 个人简历 | 第67页 |
| 在学期间参与发表论文情况 | 第67页 |