| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-30页 |
| 第一节 白念珠菌的基本特性及致病性 | 第13-15页 |
| 第二节 白念珠菌的形态发生 | 第15-17页 |
| 第三节 白念珠菌的极性生长过程 | 第17-23页 |
| ·极性生长的概念及生物模型 | 第17-19页 |
| ·极性生长的调控 | 第19-22页 |
| ·白念珠菌极性生长的研究现状 | 第22-23页 |
| 第四节 磷脂酰肌醇磷酸酶Sac1的研究进展 | 第23-27页 |
| ·磷脂酰肌醇磷酸代谢网络的概述 | 第23-25页 |
| ·磷脂酰肌醇磷酸酶Sac1的生物学功能 | 第25-26页 |
| ·酿酒酵母Sac1的研究进展 | 第26-27页 |
| 第五节 选题依据及技术路线 | 第27-30页 |
| ·选题依据 | 第27-29页 |
| ·本研究的技术路线 | 第29-30页 |
| 第二章 材料与方法 | 第30-52页 |
| 第一节 实验材料 | 第30-38页 |
| ·实验菌株 | 第30-32页 |
| ·质粒 | 第32页 |
| ·引物 | 第32-34页 |
| ·实验仪器 | 第34-35页 |
| ·实验试剂 | 第35页 |
| ·培养基 | 第35-37页 |
| ·主要溶液 | 第37-38页 |
| 第二节 实验方法 | 第38-52页 |
| ·白念珠菌/酿酒酵母菌株的活化 | 第38页 |
| ·白念珠菌的转化(醋酸锂转化法) | 第38-39页 |
| ·酿酒酵母的转化(醋酸锂转化法) | 第39页 |
| ·白念珠菌/酿酒酵母基因组的提取 | 第39-40页 |
| ·白念珠菌SAC1基因的敲除 | 第40-41页 |
| ·PCR反应体系及程序 | 第41-42页 |
| ·酶切体系 | 第42页 |
| ·DNA连接体系 | 第42-43页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第43页 |
| ·大肠杆菌的转化 | 第43页 |
| ·大肠杆菌质粒的提取(碱裂解法) | 第43-44页 |
| ·白念珠菌RNA的提取及纯化、cDNA的获得 | 第44-46页 |
| ·实时定量PCR(RT-PCR) | 第46页 |
| ·白念珠菌总蛋白的提取(液氮研磨法) | 第46-47页 |
| ·蛋白浓度的测定(考马斯亮蓝法) | 第47页 |
| ·分泌型酸性磷酸酶(SAPs)糖基化水平的测定 | 第47-48页 |
| ·白念珠菌的菌丝诱导 | 第48页 |
| ·白念珠菌粘附能力的测定(聚苯乙烯孔板法) | 第48-49页 |
| ·白念珠菌生物被膜形成能力测定 | 第49页 |
| ·白念珠菌压力敏感性的测定(稀释点板法) | 第49页 |
| ·白念珠菌肌动蛋白细胞骨架的染色观察 | 第49页 |
| ·白念珠菌细胞壁压力敏感性的测定(物理振荡压力) | 第49-50页 |
| ·白念珠菌细胞壁几丁质染色观察及几丁质含量测定 | 第50页 |
| ·白念珠菌侵染上皮细胞能力的测定 | 第50页 |
| ·白念珠菌与巨噬细胞相互作用能力的测定 | 第50-51页 |
| ·小鼠系统性感染能力测定 | 第51-52页 |
| 第三章 结果与分析 | 第52-90页 |
| 第一节 白念珠菌Sac1蛋白的鉴定 | 第52-67页 |
| ·白念珠菌Sac1蛋白序列及三维结构分析 | 第52-56页 |
| ·白念珠菌SAC1基因缺失及回补菌株的构建 | 第56-59页 |
| ·白念珠菌Sac1在酿酒酵母中功能的研究 | 第59-63页 |
| ·白念珠菌Sac1定位研究 | 第63-67页 |
| 第二节 SAC1基因的缺失对内质网功能的影响 | 第67-71页 |
| ·SAC1基因的缺失会增加白念珠菌细胞的内质网压力敏感性 | 第67页 |
| ·SAC1基因的缺失对糖基化功能的影响 | 第67-69页 |
| ·SAC1基因的缺失导致细胞UPR途径的激活 | 第69-71页 |
| 第三节 SAC1基因的缺失对细胞壁完整性的影响 | 第71-77页 |
| ·SAC1基因的缺失对细胞壁压力敏感性的影响 | 第72-73页 |
| ·SAC1基因缺失对细胞壁几丁质分布及含量的影响 | 第73-75页 |
| ·SAC1基因缺失对细胞壁超显微结构的影响 | 第75-76页 |
| ·SAC1基因的缺失对基因表达的影响 | 第76-77页 |
| 第四节 SAC1基因的缺失对形态发生的影响 | 第77-85页 |
| ·SAC1基因的缺失对菌丝发育能力的影响 | 第77-79页 |
| ·SAC1基因的缺失对体外模拟与宿主相互作用能力的影响 | 第79-81页 |
| ·SAC1基因的缺失会造成极性相关成分定位的变化 | 第81-85页 |
| 第五节 Sac1在白念珠菌与宿主细胞相互作用中的功能 | 第85-90页 |
| ·SAC1基因的缺失对白念珠菌与巨噬细胞相互作用能力的影响 | 第85-87页 |
| ·SAC1基因缺失对白念珠菌侵染肠道上皮细胞能力的影响 | 第87-88页 |
| ·SAC1基因的缺失对白念珠菌系统性感染小鼠能力的影响 | 第88-90页 |
| 第四章 讨论 | 第90-97页 |
| 第一节 白念珠菌Sac1的序列与功能分析 | 第90-91页 |
| 第二节 Sac1与白念珠菌内质网功能维持的关系 | 第91-92页 |
| 第三节 Sac1与白念珠菌细胞壁完整性的关系 | 第92-95页 |
| 第四节 Sac1与白念珠菌的极性生长 | 第95-96页 |
| 第五节 Sac1与白念珠菌的致病性 | 第96-97页 |
| 第五章 结论与展望 | 第97-99页 |
| 第一节 结论 | 第97页 |
| 第二节 论文的主要特色与创新点 | 第97-98页 |
| 第三节 展望 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-108页 |
| 致谢 | 第108-109页 |
| 个人简历及在学期间发表的学术论文 | 第109-110页 |
