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口蹄疫病毒3B蛋白单克隆抗体制备、抗原位点鉴定及竞争ELISA方法的初步建立

摘要第1-5页
Abstract第5-8页
英文缩略词表第8-9页
第1章 绪论第9-25页
   ·口蹄疫病原学第9-11页
   ·口蹄疫的流行现状第11-14页
     ·世界范围内的流行第11-12页
     ·国内流行现状第12-14页
   ·口蹄疫的防控措施第14-20页
     ·口蹄疫的预防第15-19页
     ·口蹄疫的检测第19-20页
   ·口蹄疫病毒抗原表位第20-22页
   ·单克隆抗体第22-24页
   ·研究目的及意义第24-25页
第2章 口蹄疫病毒 3B单克隆抗体制备与鉴定第25-43页
   ·实验材料第26-27页
     ·毒株、细胞、动物、质粒第26页
     ·主要试剂第26页
     ·实验与设备第26-27页
   ·实验方法第27-36页
     ·3B基因扩增与构建第27-29页
     ·3B蛋白表达与纯化第29-31页
     ·动物免疫与效价检测第31-32页
     ·间接ELISA筛选方法的建立第32页
     ·杂交瘤细胞株的建立第32-35页
     ·腹水的制备第35页
     ·单克隆单体亚型鉴定第35页
     ·单克隆抗体效价检测第35页
     ·单克隆抗体的Western-blot检测第35-36页
     ·单抗的间接免疫荧光检测第36页
     ·单抗的中和抗体效价检测第36页
   ·实验结果第36-41页
     ·pET-30a-3B表达载体的构建第36-37页
     ·pET-30a-3B原核表达第37页
     ·pET-30a-3B可溶性分析第37-38页
     ·pET-30a-3B纯化第38页
     ·Western blotting检测第38页
     ·免疫效价检测第38-39页
     ·间接ELISA方法条件的确立第39页
     ·阳性杂交瘤细胞的筛选第39页
     ·腹水制备第39-40页
     ·单克隆抗体亚类的鉴定第40页
     ·抗体效价的检测第40页
     ·抗体Western blotting检测第40-41页
     ·抗体间接免疫荧光检测第41页
     ·抗体中和效价检测第41页
   ·讨论第41-43页
第3章 3B单抗的表位鉴定第43-47页
   ·实验材料第43-44页
     ·质粒、菌种第43页
     ·主要试剂第43页
     ·实验相关设备第43-44页
   ·实验方法第44页
     ·3B蛋白的拆分,重组质粒的构建第44页
     ·重组蛋白的表达与纯化第44页
     ·反应原性鉴定第44页
   ·实验结果第44-45页
     ·3B拆分蛋白的纯化第44-45页
     ·反应性鉴定第45页
   ·讨论第45-47页
第4章 口蹄疫 3B蛋白竞争ELISA方法的建立第47-51页
   ·实验材料第47页
     ·主要试剂第47页
     ·实验相关设备第47页
   ·实验方法第47-48页
     ·FMDV血清的筛选第47页
     ·阳性血清和 3B拆分蛋白的反应性鉴定第47-48页
     ·竞争ELSIA方法的建立第48页
   ·试验结果第48-49页
     ·临床FMDV血清筛选第48页
     ·阳性血清和 3B拆分蛋白反应性鉴定第48-49页
     ·竞争ELISA方法的建立第49页
   ·讨论第49-51页
第5章 全文结论第51-52页
附录第52-54页
参考文献第54-59页
致谢第59-61页
作者简介第61页

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