口蹄疫病毒3B蛋白单克隆抗体制备、抗原位点鉴定及竞争ELISA方法的初步建立
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 英文缩略词表 | 第8-9页 |
| 第1章 绪论 | 第9-25页 |
| ·口蹄疫病原学 | 第9-11页 |
| ·口蹄疫的流行现状 | 第11-14页 |
| ·世界范围内的流行 | 第11-12页 |
| ·国内流行现状 | 第12-14页 |
| ·口蹄疫的防控措施 | 第14-20页 |
| ·口蹄疫的预防 | 第15-19页 |
| ·口蹄疫的检测 | 第19-20页 |
| ·口蹄疫病毒抗原表位 | 第20-22页 |
| ·单克隆抗体 | 第22-24页 |
| ·研究目的及意义 | 第24-25页 |
| 第2章 口蹄疫病毒 3B单克隆抗体制备与鉴定 | 第25-43页 |
| ·实验材料 | 第26-27页 |
| ·毒株、细胞、动物、质粒 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26页 |
| ·实验与设备 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-36页 |
| ·3B基因扩增与构建 | 第27-29页 |
| ·3B蛋白表达与纯化 | 第29-31页 |
| ·动物免疫与效价检测 | 第31-32页 |
| ·间接ELISA筛选方法的建立 | 第32页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第32-35页 |
| ·腹水的制备 | 第35页 |
| ·单克隆单体亚型鉴定 | 第35页 |
| ·单克隆抗体效价检测 | 第35页 |
| ·单克隆抗体的Western-blot检测 | 第35-36页 |
| ·单抗的间接免疫荧光检测 | 第36页 |
| ·单抗的中和抗体效价检测 | 第36页 |
| ·实验结果 | 第36-41页 |
| ·pET-30a-3B表达载体的构建 | 第36-37页 |
| ·pET-30a-3B原核表达 | 第37页 |
| ·pET-30a-3B可溶性分析 | 第37-38页 |
| ·pET-30a-3B纯化 | 第38页 |
| ·Western blotting检测 | 第38页 |
| ·免疫效价检测 | 第38-39页 |
| ·间接ELISA方法条件的确立 | 第39页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第39页 |
| ·腹水制备 | 第39-40页 |
| ·单克隆抗体亚类的鉴定 | 第40页 |
| ·抗体效价的检测 | 第40页 |
| ·抗体Western blotting检测 | 第40-41页 |
| ·抗体间接免疫荧光检测 | 第41页 |
| ·抗体中和效价检测 | 第41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 第3章 3B单抗的表位鉴定 | 第43-47页 |
| ·实验材料 | 第43-44页 |
| ·质粒、菌种 | 第43页 |
| ·主要试剂 | 第43页 |
| ·实验相关设备 | 第43-44页 |
| ·实验方法 | 第44页 |
| ·3B蛋白的拆分，重组质粒的构建 | 第44页 |
| ·重组蛋白的表达与纯化 | 第44页 |
| ·反应原性鉴定 | 第44页 |
| ·实验结果 | 第44-45页 |
| ·3B拆分蛋白的纯化 | 第44-45页 |
| ·反应性鉴定 | 第45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| 第4章 口蹄疫 3B蛋白竞争ELISA方法的建立 | 第47-51页 |
| ·实验材料 | 第47页 |
| ·主要试剂 | 第47页 |
| ·实验相关设备 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47-48页 |
| ·FMDV血清的筛选 | 第47页 |
| ·阳性血清和 3B拆分蛋白的反应性鉴定 | 第47-48页 |
| ·竞争ELSIA方法的建立 | 第48页 |
| ·试验结果 | 第48-49页 |
| ·临床FMDV血清筛选 | 第48页 |
| ·阳性血清和 3B拆分蛋白反应性鉴定 | 第48-49页 |
| ·竞争ELISA方法的建立 | 第49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| 第5章 全文结论 | 第51-52页 |
| 附录 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 致谢 | 第59-61页 |
| 作者简介 | 第61页 |
