| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 英文缩略表 | 第11-12页 |
| 第1章 引言 | 第12-20页 |
| ·发病历史 | 第12页 |
| ·流行病学 | 第12-13页 |
| ·病原学 | 第13-16页 |
| ·临床症状 | 第16页 |
| ·致病机理 | 第16-17页 |
| ·诊断 | 第17页 |
| ·防控 | 第17-18页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第18-20页 |
| 第2章 牛流行热病毒糖蛋白的原核表达与抗原性分析 | 第20-30页 |
| ·材料 | 第20-21页 |
| ·主要仪器 | 第20页 |
| ·实验动物和阳性血清 | 第20-21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-24页 |
| ·目的基因引物的设计和合成 | 第21页 |
| ·目的基因的克隆和鉴定 | 第21-22页 |
| ·重组表达载体的构建和鉴定 | 第22页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第22页 |
| ·阳性血清制备 | 第22-23页 |
| ·目的蛋白的表达、纯化以及生物活性鉴定 | 第23-24页 |
| ·ELISA特异性试验 | 第24页 |
| ·结果 | 第24-28页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第24-25页 |
| ·目的蛋白的SDS-PAGE | 第25-26页 |
| ·目的蛋白的抗原性鉴定 | 第26-28页 |
| ·ELISA特异性实验 | 第28页 |
| ·讨论 | 第28-30页 |
| 第3章 牛流行热病毒间接ELISA方法的建立 | 第30-42页 |
| ·材料 | 第30-31页 |
| ·主要仪器 | 第30页 |
| ·主要试剂 | 第30页 |
| ·抗原的制备 | 第30-31页 |
| ·血清的采集 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-36页 |
| ·微量中和实验 | 第31-32页 |
| ·间接ELISA程序 | 第32页 |
| ·间接ELISA方法最佳反应条件的选择 | 第32-35页 |
| ·间接ELISA特异性、敏感性的测定 | 第35-36页 |
| ·间接ELISA Cut-Off值的确定 | 第36页 |
| ·交叉反应实验 | 第36页 |
| ·间接ELISA方法对临床样品的检测 | 第36页 |
| ·结果 | 第36-40页 |
| ·微量中和实验 | 第36页 |
| ·间接ELISA方法最佳反应条件的选择 | 第36-40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| 第4章 牛流行热病毒抗体检测间接ELISA试剂盒的研发 | 第42-48页 |
| ·材料 | 第42-45页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第42页 |
| ·主要仪器 | 第42页 |
| ·试剂盒的组成 | 第42-43页 |
| ·试剂盒保存条件 | 第43页 |
| ·试剂盒使用注意事项 | 第43-44页 |
| ·试剂盒的使用说明 | 第44-45页 |
| ·方法 | 第45页 |
| ·试剂盒敏感性和特异性的检测 | 第45页 |
| ·试剂盒保存期及稳定性检测 | 第45页 |
| ·试剂盒批内(同一批次)和批间(不同批次)的稳定性检测 | 第45页 |
| ·试剂盒的的应用 | 第45页 |
| ·结果 | 第45-46页 |
| ·试剂盒敏感性和特异性的评价 | 第45-46页 |
| ·试剂盒保存期及稳定性评价 | 第46页 |
| ·试剂盒批内和批间的稳定性评价 | 第46页 |
| ·试剂盒的推广与应用 | 第46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 第5章 牛流行病毒的血清学调查 | 第48-54页 |
| ·材料与方法 | 第48页 |
| ·结果 | 第48-51页 |
| ·讨论 | 第51-54页 |
| 第6章 抗原捕获ELISA方法的建立 | 第54-65页 |
| ·材料 | 第54-55页 |
| ·病毒和样品 | 第54页 |
| ·主要试剂 | 第54页 |
| ·主要仪器 | 第54-55页 |
| ·方法 | 第55-57页 |
| ·多克隆抗体（牛高免血清）的制备 | 第55页 |
| ·抗-G1单克隆抗体的制备 | 第55页 |
| ·AC-ELISA方法的建立 | 第55-56页 |
| ·AC-ELISA方法特异性和敏感性的评价 | 第56页 |
| ·动物实验 | 第56页 |
| ·临床样品的调查 | 第56-57页 |
| ·结果 | 第57-62页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第57-58页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第58-59页 |
| ·AC-ELISA方法条件的优化 | 第59页 |
| ·AC-ELISA方法特异性和敏感性的评价 | 第59-60页 |
| ·AC-ELISA方法对实验感染黄牛BEFV的检测 | 第60-62页 |
| ·临床样品的调查 | 第62页 |
| ·讨论 | 第62-65页 |
| 第7章 全文结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 附录 | 第72-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 作者简介 | 第78-79页 |
