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噬菌体phiC31/att位点重组系统介导的基因倒位和删除研究

摘要第1-7页
Abstract第7-10页
第一章 文献综述第10-22页
   ·位点重组酶系统简介第10-15页
     ·Cre/lox重组酶系统第12-14页
     ·FLP/FRT重组酶系统第14-15页
   ·噬菌体phiC31/att重组酶系统第15-19页
     ·噬菌体phiC31/att重组酶系统的重组特点第15页
     ·噬菌体phiC31/att重组酶系统在植物转基因中的应用第15-19页
   ·植物花青素合成中调控基因的研究概况第19-22页
     ·植物花青素的生物合成途径第19-20页
     ·调节花青素基因表达的转录因子的简介第20页
     ·花青合成途径中调节因子的调控特点与功能第20-22页
第二章 引言第22-24页
   ·研究的目的与意义第22页
   ·研究内容第22-24页
     ·表达载体的构建第22-23页
     ·原核共表达与农杆菌介导转化植物第23-24页
第三章 材料与方法第24-34页
   ·实验材料第24-26页
     ·植物材料第24页
     ·菌株与质粒第24页
     ·主要生化试剂第24页
     ·主要溶液与培养基第24-26页
   ·实验方法第26-34页
     ·表达载体的构建第26-27页
     ·质粒转化大肠杆菌第27-28页
     ·原核表达载体的共转化第28页
     ·质粒转化农杆菌第28-29页
     ·农杆菌介导法转化芥菜第29-30页
     ·农杆菌介导法转化烟草第30页
     ·转基因烟草、芥菜DNA的提取第30-31页
     ·转基因烟草、芥菜DNA的PCR鉴定第31-33页
     ·转基因烟草的除草剂(PPT)抗性检测第33页
     ·GUS基因表达的组织化学染色分析第33页
     ·重组序列的克隆测序分析第33-34页
第四章 结果分析第34-66页
   ·表达重组酶phiC31的植物表达载体构建第34-37页
     ·PCA23C31载体构建第34-35页
     ·PCA23NC31载体构建第35-37页
   ·attB-attP位点“头对头”排列植物表达载体构建第37-42页
     ·GUS为报告基因的PCABARattB-GUS表达载体的构建第37-39页
     ·Bar为报告基因的PCA13attB-BAR表达载体的构建第39-40页
     ·BT为报告基因的PCA13attB-BT表达载体的构建第40-42页
   ·attB-attP位点“头对头”排列方向在芥菜和烟草中的重组倒位分析第42-55页
     ·PCABARattB-GUS载体在芥菜中的重组倒位分析(phiC31基因含内含子)第42-46页
     ·PCABARattB-GUS载体在烟草中的的重组倒位分析第46-50页
     ·PCA13attB-BAR载体在烟草中的的重组倒位分析(无内含子phiC31基因)第50-52页
     ·PCA13attB-BT载体在烟草中的的重组倒位分析(无内含子phiC31基因)第52-55页
   ·attB-attP位点“尾对尾”排列植物表达载体构建第55-57页
   ·attB-attP位点同向排列植物表达载体构建第57-59页
   ·原核水平下phiC31介导attB-attP位点不同排列方向的重组分析第59-62页
     ·phiC31原核表达载体及测试载体的构建第59-60页
     ·原核生物中重组酶phiC31介导不同attB、attP排列方向的重组反应第60-62页
   ·烟草中phiC31介导同向排列识别位点间的基因删除第62-65页
     ·BoMYB2为报告基因的植物表达载体转化烟草第62-63页
     ·phiC31介导同向排列识别位点间的基因删除的PCR分析第63-64页
     ·删除残余序列的克隆测序分析第64-65页
   ·烟草中重组酶phiC31介导识别序列“尾对尾”排列方向的基因倒位第65-66页
第五章 讨论第66-70页
第六章 结论第70-72页
参考文献第72-80页
致谢第80-82页
附录第82-88页
 附录1 合成phiC31基因序列第82-84页
 附录2 删除残余序列第84-86页
 附录3 缩写词检录第86-88页
 附录4 在学期间发表文章第88页

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