摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
缩略语 | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-27页 |
第一节 被子植物雄配子体的发育过程 | 第13-16页 |
·花粉粒的发育 | 第13-14页 |
·花粉的萌发和花粉管极性生长的调控机制 | 第14-16页 |
第二节 花粉管壁的基本结构、组成及调控 | 第16-19页 |
·被子植物花粉管壁的基本结构及化学组成 | 第16-17页 |
·被子植物花粉管细胞壁的合成和修饰 | 第17-19页 |
第三节 COG复合体及其功能 | 第19-25页 |
·囊泡运输概述 | 第19-21页 |
·COG复合体的结构信息和组装机制 | 第21-22页 |
·COG复合体在囊泡运输中的功能和分子机制 | 第22-23页 |
·COG复合体各亚基之间相互作用与主要功能关系 | 第23-24页 |
·COG复合体在高尔基体糖基化功能中的作用 | 第24-25页 |
第四节 本论文的立题依据和研究目的 | 第25-27页 |
第二章 实验材料和方法 | 第27-47页 |
1 实验材料 | 第27-29页 |
·植物材料 | 第27页 |
·菌株 | 第27页 |
·载体 | 第27-29页 |
·酶、试剂及各种化学药品 | 第29页 |
2 实验仪器 | 第29-30页 |
3 实验方法 | 第30-47页 |
·拟南芥的种植与管理 | 第30-31页 |
·拟南芥总DNA的快速提取(Edwards法) | 第31-32页 |
·拟南芥RNA的提取及第一链cDNA的合成 | 第32-33页 |
·引物设计及PCR扩增 | 第33-34页 |
·限制性内切酶反应 | 第34页 |
·PCR产物回收及载体构建 | 第34-35页 |
·大肠杆菌感受态的制备和转化 | 第35-36页 |
·大肠杆菌质粒提取 | 第36页 |
·农杆菌感受态的制备 | 第36-37页 |
·农杆菌的转化 | 第37页 |
·农杆菌介导的拟南芥转化 | 第37-38页 |
·本实验所用载体的构建 | 第38页 |
·拟南芥的人工杂交 | 第38页 |
·GUS染色 | 第38-39页 |
·DAPI染色 | 第39页 |
·Alexander染色 | 第39-40页 |
·拟南芥花粉体外萌发 | 第40-41页 |
·拟南芥花粉体外萌发的苯胺蓝染色和钌红染色 | 第41-42页 |
·拟南芥花粉体外萌发的Calcofluor染色 | 第42页 |
·扫描电子显微镜观察拟南芥花粉 | 第42页 |
·拟南芥花粉的超薄切片 | 第42-43页 |
·大肠杆菌DNA的大量提取 | 第43-44页 |
·拟南芥原生质体的提取和转化 | 第44-47页 |
第三章 实验结果 | 第47-61页 |
1 cog8突变体的鉴定和遗传分析 | 第47-48页 |
·cog8突变体的鉴定 | 第47页 |
·cog8突变体的遗传分析 | 第47-48页 |
2 cog8/+突变体的互补实验 | 第48页 |
3 cog8突变体的表型分析 | 第48-53页 |
·COG8突变不影响花粉的外部形态、活性及内核的发育 | 第49-50页 |
·COG8突变严重影响花粉管的体外生长 | 第50-53页 |
4 COG8在拟南芥中组成性表达 | 第53-55页 |
·COG8在花粉和花粉管中强烈表达 | 第53-54页 |
·COG8从花粉的二细胞时期开始表达 | 第54-55页 |
5 COG8突变导致花粉细胞内高尔基体结构及其驻留蛋白分布异常 | 第55-56页 |
6 cog8突变体花粉管壁成分的分布异常 | 第56-58页 |
7 COG8蛋白的亚细胞定位 | 第58-59页 |
8 小结 | 第59-61页 |
讨论 | 第61-65页 |
1 COG8基因功能的初步探究 | 第61-63页 |
·COG8在花粉管的生长中起重要的作用 | 第61-62页 |
·COG8可能参与调控花粉管壁的主要成分在花粉管中的分布 | 第62页 |
·植物中COG复合体与其在酵母和哺乳动物中的功能相似 | 第62-63页 |
2 本研究的创新之处 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-73页 |
附录 | 第73-75页 |
致谢 | 第75页 |