| 摘要 | 第1-6页 |
| abstract | 第6-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-36页 |
| ·金黄色葡萄球菌概述 | 第10-16页 |
| ·金黄色葡萄球菌生物学特征 | 第10-11页 |
| ·金黄色葡萄球菌引发的感染与疾病 | 第11-13页 |
| ·金黄色葡萄球菌耐药性的发生与发展 | 第13-15页 |
| ·金黄色葡萄球菌研究的困境与展望 | 第15-16页 |
| ·金黄色葡萄球菌的分子遗传学研究 | 第16-28页 |
| ·概述 | 第16-17页 |
| ·报告基因 | 第17-19页 |
| ·诱导表达系统 | 第19-21页 |
| ·基因组编辑技术 | 第21-27页 |
| ·必需基因研究 | 第27-28页 |
| ·CRISPR技术的发展与应用 | 第28-33页 |
| ·CRISPR概述 | 第28-30页 |
| ·Cas9和dCas9相关技术发展 | 第30-33页 |
| ·本课题的研究目的与内容 | 第33-36页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第36-54页 |
| ·实验材料 | 第36-44页 |
| ·实验所用菌株 | 第36-37页 |
| ·实验所用质粒 | 第37-39页 |
| ·实验所用引物 | 第39-44页 |
| ·实验方法 | 第44-54页 |
| ·实验菌株的培养及基础操作 | 第44-46页 |
| ·基因敲低质粒及菌株的构建 | 第46-48页 |
| ·实验菌株的表型及分子检测相关实验 | 第48-52页 |
| ·统计学分析 | 第52-54页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第54-76页 |
| ·金黄色葡萄球菌中CRISP Ri系统的构建 | 第54-56页 |
| ·sgRNA表达框的构建 | 第54-55页 |
| ·标准化质粒pSD1的构建 | 第55-56页 |
| ·CRISPRi在NCTC 8325菌株中基因敲低效率的研究 | 第56-60页 |
| ·hla基因敲低的研究 | 第56-59页 |
| ·spa与sarT基因敲低的研究 | 第59-60页 |
| ·CRISPRi用于MRSA菌株N315的耐药基因mecA的敲低 | 第60-61页 |
| ·CRISPRi用于多个基因的同时敲低和单个基因的多重敲低 | 第61-64页 |
| ·spa基因和hla基因的同时敲低 | 第62-63页 |
| ·sgRNA1与sgRNA2对hla基因的双重敲低 | 第63-64页 |
| ·CRISPRi用于整个或部分操纵子的敲低 | 第64-67页 |
| ·ccrAB操纵子的敲低研究 | 第64-65页 |
| ·含era基因的操纵子敲低研究 | 第65-67页 |
| ·CRISPRi用于必需基因的敲低及功能研究 | 第67-72页 |
| ·必需基因的敲低导致细菌生长抑制 | 第68-69页 |
| ·walR基因敲低研究 | 第69-72页 |
| ·探究Cas9用于金黄色葡萄球菌基因组编辑的可行性 | 第72-76页 |
| 第四章 讨论与总结 | 第76-82页 |
| ·CRISPRi相比现有基因操作技术的优势 | 第76-78页 |
| ·CRISPRi应用过程中需要注意的问题 | 第78-79页 |
| ·Cas9在金黄色葡萄球菌的应用前景 | 第79-80页 |
| ·本课题研究的意义 | 第80-82页 |
| 参考文献 | 第82-98页 |
| 致谢 | 第98-100页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第100页 |
