| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 引言 | 第10-18页 |
| 1 造血干细胞 | 第10-14页 |
| ·造血干细胞概述 | 第10-11页 |
| ·造血干细胞的分化与自我更新机制 | 第11-14页 |
| 2 骨髓造血微环境 | 第14-15页 |
| ·骨髓造血微环境的组成与结构 | 第14-15页 |
| ·骨髓基质细胞基因表达变化 | 第15页 |
| 3 造血重建过程 | 第15-16页 |
| 4 造血干细胞体外扩增 | 第16-18页 |
| ·造血干细胞的培养体系 | 第16-17页 |
| ·基质细胞共培养HSC | 第17-18页 |
| 第二章 In Vivo mAb Ly-6C抗体体内清除实验 | 第18-31页 |
| 0 前言 | 第18-19页 |
| 1 实验材料和方法 | 第19-23页 |
| ·实验材料 | 第19页 |
| ·原代细胞和小鼠 | 第19页 |
| ·试剂 | 第19页 |
| ·实验仪器 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-23页 |
| ·In Vivo mAb Ly-6C抗体处理8周龄成年小鼠 | 第20页 |
| ·主要试剂的配制 | 第20页 |
| ·小鼠骨髓细胞的制备 | 第20-21页 |
| ·台盼蓝染色计数 | 第21页 |
| ·LSK细胞的流式分选 | 第21页 |
| ·流式染色 | 第21-22页 |
| ·克隆形成实验 | 第22页 |
| ·统计学分析 | 第22-23页 |
| 2 实验结果 | 第23-29页 |
| ·In Vivo mAb Ly-6C抗体对小鼠MDSCs细胞的影响 | 第23-25页 |
| ·In Vivo mAb Ly-6C抗体处理小鼠对LSK细胞的影响 | 第25-26页 |
| ·In Vivo mAb Ly-6C抗体处理小鼠对MPP，LT-LSK，ST-LSK细胞的影响 | 第26-28页 |
| ·In Vivo mAb Ly-6C抗体处理小鼠后全骨髓细胞克隆形成实验 | 第28-29页 |
| 3 讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 小鼠造血重建过程中骨髓基质细胞中22种基因表达量的变化 | 第31-46页 |
| 0 前言 | 第31-32页 |
| 1 实验材料和方法 | 第32-38页 |
| ·实验材料 | 第32页 |
| ·小鼠 | 第32页 |
| ·试剂 | 第32页 |
| ·实验仪器 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-38页 |
| ·5-FU处理成年小鼠 | 第33页 |
| ·主要试剂的制备 | 第33页 |
| ·小鼠骨髓非造血细胞的复选分离与裂解释放RNA | 第33-35页 |
| ·TRIzon总RNA的提取 | 第35-36页 |
| ·将RNA反转录为cDNA | 第36页 |
| ·探针法实时荧光定量PCR | 第36-37页 |
| ·台盼蓝染色计数 | 第37页 |
| ·统计学分析 | 第37-38页 |
| 2 实验结果 | 第38-40页 |
| ·实时荧光定量PCR柱状图 | 第38-40页 |
| 3 讨论 | 第40-46页 |
| 第四章 造血干细胞与E4ORF1-OP9基质细胞的无血清共培养 | 第46-59页 |
| 0 前言 | 第46-47页 |
| 1 实验材料和方法 | 第47-55页 |
| ·实验材料 | 第47页 |
| ·细胞和小鼠 | 第47页 |
| ·试剂 | 第47页 |
| ·实验仪器 | 第47-48页 |
| ·实验方法 | 第48-55页 |
| ·E4ORF1-OP9细胞系的制备 | 第48-52页 |
| ·E4ORF1质粒转化 | 第48-49页 |
| ·用HiSPeed Plasmid Maxi Kit试剂盒和进行质粒大抽 | 第49-50页 |
| ·病毒包装 | 第50-51页 |
| ·病毒转染 | 第51-52页 |
| ·主要相关试剂的制备 | 第52页 |
| ·LSK细胞的流式分选 | 第52-53页 |
| ·台盼蓝染色计数 | 第53-54页 |
| ·克隆形成实验 | 第54页 |
| ·统计学分析 | 第54-55页 |
| 2 实验结果 | 第55-58页 |
| ·荧光显微镜下转染后的Phoenix细胞形态及其转染效率 | 第55-56页 |
| ·E4ORF1-OP9细胞系和OP9细胞系在有无血清培养下的形态学对比 | 第56-57页 |
| ·LSK细胞分选及与E4ORF1-OP9细胞共培养 | 第57-58页 |
| 3 讨论 | 第58-59页 |
| 研究小结 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-65页 |
| 附录 | 第65页 |
