英文缩略词表 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
第一部分 | 第10-44页 |
前言 | 第11-19页 |
1. 驱动蛋白的发现和分类 | 第11-12页 |
2. 驱动蛋白与细胞有丝分裂 | 第12页 |
3. KIF14概述 | 第12-13页 |
4. KIF14与胞质分裂 | 第13-16页 |
·KIF14与PRC1 | 第14-15页 |
·KIF14与Citron kinase | 第15页 |
·KIF14与MKLP1 | 第15-16页 |
5. KIF14与肿瘤 | 第16-17页 |
·KIF14与肿瘤发生 | 第16页 |
·KIF14与肿瘤转移 | 第16页 |
·KIF14与肿瘤耐药 | 第16-17页 |
6. 展望 | 第17-18页 |
7. 本研究目标 | 第18-19页 |
材料与方法 | 第19-32页 |
1. 实验材料 | 第19-27页 |
·细胞系 | 第19页 |
·细菌 | 第19页 |
·质粒 | 第19页 |
·引物合成 | 第19-20页 |
·主要药品和试剂 | 第20-22页 |
·主要仪器 | 第22-23页 |
·试剂配制 | 第23-27页 |
2. 研究方法 | 第27-32页 |
·细胞的处理 | 第27-28页 |
·细胞瞬时转染 | 第28页 |
·Western Blot | 第28-29页 |
·细胞免疫荧光染色 | 第29页 |
·质粒构建 | 第29-32页 |
结果 | 第32-41页 |
1. 内源性KIF14在细胞内的研究 | 第32-34页 |
·KIF14在细胞内不同时期的定位 | 第32-33页 |
·敲降KIF14对细胞有丝分裂的影响 | 第33-34页 |
·KIF14驱动蛋白翻译后修饰 | 第34页 |
2. KIF14细胞内中小体定位的研究 | 第34-41页 |
·质粒pEGFPC1-KIF14突变情况 | 第34页 |
·构建编码正确的pEGFPC1-KIF14质粒 | 第34-35页 |
·KIF14各功能域绿色荧光蛋白表达质粒的构建 | 第35-37页 |
·KIF14各功能域绿色荧光蛋白的表达 | 第37-38页 |
·KIF14各功能域绿色荧光蛋白在细胞有丝分裂期的细胞内定位 | 第38-41页 |
讨论 | 第41-43页 |
小结 | 第43-44页 |
第二部分 | 第44-65页 |
前言 | 第45-48页 |
1. CENP-E概述 | 第45-46页 |
2. 抗体制备的原理 | 第46-48页 |
·抗体 | 第46页 |
·抗原 | 第46-47页 |
·佐剂 | 第47页 |
·多克隆抗体的产生 | 第47页 |
·实验动物 | 第47-48页 |
材料与方法 | 第48-56页 |
1. 实验材料 | 第48-51页 |
·细菌 | 第48页 |
·质粒 | 第48页 |
·引物合成 | 第48页 |
·主要药品和试剂 | 第48页 |
·试剂配制 | 第48-51页 |
2. 研究方法 | 第51-56页 |
·质粒构建 | 第51页 |
·His-CENPEC410融合蛋白的诱导表达 | 第51页 |
·Western Blot | 第51-52页 |
·His-CENPEC410融合蛋白大量诱导表达及纯化 | 第52-53页 |
·CENP-E多克隆抗体的制备 | 第53页 |
·细胞的处理 | 第53页 |
·血清检测 | 第53-56页 |
结果 | 第56-62页 |
1. 着丝粒相关蛋白CENP-E抗原的制备 | 第56-59页 |
·CENP-E原核表达质粒的构建 | 第56页 |
·His-CENPEC410融合蛋白的诱导表达 | 第56-57页 |
·His-CENPEC410融合蛋白可溶性验证 | 第57页 |
·His-CENPEC410融合蛋白的裂解 | 第57-58页 |
·His-CENPEC410融合蛋白的纯化 | 第58-59页 |
2. CENP-E多克隆抗体的制备及检测 | 第59-62页 |
讨论 | 第62-64页 |
小结 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-71页 |
资金资助 | 第71-72页 |
硕士在读期间发表论文 | 第72-73页 |
文献综述 | 第73-82页 |
参考文献 | 第78-82页 |
致谢 | 第82-83页 |