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驱动蛋白分子KIF14细胞内中小体定位的研究及着丝粒相关蛋白CENP-E的抗体制备

英文缩略词表第1-8页
摘要第8-9页
Abstract第9-10页
第一部分第10-44页
 前言第11-19页
  1. 驱动蛋白的发现和分类第11-12页
  2. 驱动蛋白与细胞有丝分裂第12页
  3. KIF14概述第12-13页
  4. KIF14与胞质分裂第13-16页
     ·KIF14与PRC1第14-15页
     ·KIF14与Citron kinase第15页
     ·KIF14与MKLP1第15-16页
  5. KIF14与肿瘤第16-17页
     ·KIF14与肿瘤发生第16页
     ·KIF14与肿瘤转移第16页
     ·KIF14与肿瘤耐药第16-17页
  6. 展望第17-18页
  7. 本研究目标第18-19页
 材料与方法第19-32页
  1. 实验材料第19-27页
     ·细胞系第19页
     ·细菌第19页
     ·质粒第19页
     ·引物合成第19-20页
     ·主要药品和试剂第20-22页
     ·主要仪器第22-23页
     ·试剂配制第23-27页
  2. 研究方法第27-32页
     ·细胞的处理第27-28页
     ·细胞瞬时转染第28页
     ·Western Blot第28-29页
     ·细胞免疫荧光染色第29页
     ·质粒构建第29-32页
 结果第32-41页
  1. 内源性KIF14在细胞内的研究第32-34页
     ·KIF14在细胞内不同时期的定位第32-33页
     ·敲降KIF14对细胞有丝分裂的影响第33-34页
     ·KIF14驱动蛋白翻译后修饰第34页
  2. KIF14细胞内中小体定位的研究第34-41页
     ·质粒pEGFPC1-KIF14突变情况第34页
     ·构建编码正确的pEGFPC1-KIF14质粒第34-35页
     ·KIF14各功能域绿色荧光蛋白表达质粒的构建第35-37页
     ·KIF14各功能域绿色荧光蛋白的表达第37-38页
     ·KIF14各功能域绿色荧光蛋白在细胞有丝分裂期的细胞内定位第38-41页
 讨论第41-43页
 小结第43-44页
第二部分第44-65页
 前言第45-48页
  1. CENP-E概述第45-46页
  2. 抗体制备的原理第46-48页
     ·抗体第46页
     ·抗原第46-47页
     ·佐剂第47页
     ·多克隆抗体的产生第47页
     ·实验动物第47-48页
 材料与方法第48-56页
  1. 实验材料第48-51页
     ·细菌第48页
     ·质粒第48页
     ·引物合成第48页
     ·主要药品和试剂第48页
     ·试剂配制第48-51页
  2. 研究方法第51-56页
     ·质粒构建第51页
     ·His-CENPEC410融合蛋白的诱导表达第51页
     ·Western Blot第51-52页
     ·His-CENPEC410融合蛋白大量诱导表达及纯化第52-53页
     ·CENP-E多克隆抗体的制备第53页
     ·细胞的处理第53页
     ·血清检测第53-56页
 结果第56-62页
  1. 着丝粒相关蛋白CENP-E抗原的制备第56-59页
     ·CENP-E原核表达质粒的构建第56页
     ·His-CENPEC410融合蛋白的诱导表达第56-57页
     ·His-CENPEC410融合蛋白可溶性验证第57页
     ·His-CENPEC410融合蛋白的裂解第57-58页
     ·His-CENPEC410融合蛋白的纯化第58-59页
  2. CENP-E多克隆抗体的制备及检测第59-62页
 讨论第62-64页
 小结第64-65页
参考文献第65-71页
资金资助第71-72页
硕士在读期间发表论文第72-73页
文献综述第73-82页
 参考文献第78-82页
致谢第82-83页

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