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磁小体表面展示系统的构建

摘要第1-4页
Abstract第4-7页
第一章 研究背景第7-21页
   ·趋磁细菌概述第7-8页
     ·趋磁细菌的发现第7页
     ·趋磁细菌的形态第7-8页
   ·磁小体概述第8-13页
     ·磁小体的形态特征第8-9页
     ·磁小体的化学组成第9-10页
     ·磁小体合成相关基因的研究第10-13页
   ·磁小体修饰第13-18页
     ·磁小体化学修饰第13-15页
     ·磁小体生物学修饰第15-16页
     ·磁小体应用研究进展第16-18页
   ·生物素-亲和素系统研究概述第18-19页
     ·生物素、链霉亲和素、生物素羧基载体蛋白简介第18页
     ·生物素-亲和素系统的应用第18-19页
   ·本课题的研究目的和意义第19-21页
第二章 材料与方法第21-39页
   ·本实验所用菌株及培养基第21-25页
     ·菌株及培养基第21-22页
     ·趋磁细菌及培养基第22-25页
   ·质粒及引物第25-26页
   ·试剂及仪器第26-27页
   ·实验方法第27-39页
     ·融合PCR第27-29页
     ·琼脂糖凝胶电泳第29页
     ·酶切第29-30页
     ·酶连第30页
     ·大肠杆菌感受态制备及连接产物转化第30-31页
     ·MSR-1 双亲接合实验第31-32页
     ·Cmag测定第32页
     ·Trizol法提取RNA第32-33页
     ·磁小体的纯化及保存第33-34页
     ·磁小体纳米粒度及zeta电位测定第34页
     ·重组磁小体电子透射显微镜TEM观察第34页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测融合蛋白的表达(SDS-PAGE)第34-37页
     ·蛋白质转移印记第37-39页
第三章 结果与分析第39-60页
   ·表面展示有生物素磁小体的构建第39-50页
     ·融合表达载体pBBR-bccp-mamC pBBR-bccp-mamF的构建第39-40页
     ·重组菌株MSR-ΔC-BC MSR-ΔF-BF的构建第40-41页
     ·重组菌株中融合基因转录验证第41-43页
     ·重组菌株中融合基因表达验证第43-45页
     ·重组菌株及重组磁小体表征分析第45-48页
     ·重组磁小体BMP-△F-BF应用检测第48-49页
     ·小结第49-50页
   ·表面展示有链霉亲和素磁小体的构建第50-60页
     ·扩增mamC mamF及sa基因第50-51页
     ·融合表达载体pBBR-sa-mamC pBBR-sa-mamF的构建第51-52页
     ·重组菌株MSR-ΔC-SC MSR-ΔF-SF的构建第52-53页
     ·重组菌株中融合基因转录验证第53-54页
     ·重组菌株中融合基因表达验证第54-55页
     ·重组菌株及重组磁小体的表征分析第55-57页
     ·重组磁小体BMP-ΔC-SC应用检测第57-58页
     ·小结第58-60页
第四章 总结与展望第60-62页
   ·结论第60-61页
     ·成功构建磁小体表面展示体系第60页
     ·重组菌株及重组磁小体的表征第60页
     ·初步应用实验第60-61页
   ·下一步工作建议第61-62页
参考文献第62-68页
致谢第68-69页

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