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甜高粱高生物糖量生产条件与乙醇发酵工程菌株构建

摘要第1-6页
Abstract第6-13页
附录第13-16页
图表目录第16-19页
第一章 绪论第19-30页
   ·甜高粱研究与利用现状第19-21页
     ·甜高粱生物学特性第19页
     ·甜高粱的利用价值第19页
     ·甜高粱育种研究第19-20页
     ·甜高粱茎秆含糖量研究第20-21页
     ·与蔗糖代谢相关的酶研究第21页
   ·甜高粱秸秆贮藏研究第21页
   ·甜高粱茎秆发酵乙醇工艺第21-23页
     ·液体发酵第22页
     ·固体发酵第22页
     ·甜高粱茎秆发酵的动力学研究第22-23页
   ·木糖还原酶基因研究进展第23-26页
     ·产木糖还原酶的菌株第23页
     ·木糖还原酶的结构和酶学性质第23-24页
     ·木糖还原酶基因的克隆和表达第24-26页
   ·葡萄糖/木糖共发酵生产燃料乙醇第26页
   ·研究目的和意义第26-28页
     ·研究目的第26-27页
     ·研究意义第27-28页
   ·研究内容与技术路线第28-30页
     ·研究内容第28页
     ·技术路线第28-30页
第二章 甜高粱高生物糖量生产研究第30-58页
   ·实验材料第30页
   ·实验方法第30-32页
     ·不同种植密度试验第30-31页
     ·不同播期试验第31页
     ·不同施肥试验第31页
     ·环境因子测定试验第31-32页
     ·取样时间及方式第32页
   ·测定方法第32-33页
     ·水分测定第32页
     ·总糖、还原糖、蔗糖的测定第32-33页
     ·酶活性的测定第33页
     ·生物产量的测定第33页
     ·数据处理与统计分析第33页
   ·结果与分析第33-54页
     ·不同种植密度对甜高粱糖分积累及SS、SPS活性的影响第33-38页
     ·不同播种期对甜高粱糖分积累及SS、SPS活性的影响第38-45页
     ·施肥方式对甜高粱秸秆产量、糖分含量及酶活性的影响第45-50页
     ·不同环境因子对甜高粱秸秆生理指标的影响研究第50-54页
   ·讨论第54-56页
   ·小结第56-58页
第三章 甜高粱低耗糖贮藏条件研究第58-69页
   ·实验材料第58页
   ·实验方法第58页
     ·贮藏方式和时间对甜高粱秸秆糖分及酶活性的影响第58页
     ·贮藏温度对甜高粱秸秆糖分含量的影响第58页
   ·测定方法第58-59页
   ·统计分析第59页
   ·结果与分析第59-66页
     ·贮藏方式和时间对甜高粱秸秆糖分及酶活性的影响第59-62页
     ·贮藏温度对甜高粱秸秆糖分含量的影响第62-66页
   ·讨论第66-68页
   ·小结第68-69页
第四章 高效乙醇发酵菌株诱变与筛选第69-75页
   ·实验材料第69-70页
     ·出发菌株第69页
     ·培养基第69页
     ·生化试剂第69-70页
     ·仪器第70页
   ·实验方法第70-71页
     ·诱变因子致死率的测定第70页
     ·诱变处理方法第70页
     ·诱变耐高葡萄糖浓度菌株的筛选第70页
     ·摇瓶发酵葡萄糖乙醇浓度的测量第70页
     ·摇瓶发酵葡萄糖产乙醇菌株的筛选第70-71页
     ·突变株的初筛第71页
     ·突变株的复筛第71页
   ·实验结果第71-73页
     ·诱变因子致死率和最佳处理剂量的确定第71-72页
     ·突变株的初筛与复筛第72页
     ·摇瓶发酵葡萄糖产乙醇的浓度变化第72-73页
     ·摇瓶发酵葡萄糖产乙醇的菌株筛选第73页
   ·讨论第73-74页
   ·小结第74-75页
第五章 甜高粱秸秆中六碳糖的发酵研究第75-86页
   ·实验材料第75-76页
     ·菌种第75页
     ·培养基第75页
     ·生化试剂第75页
     ·仪器第75-76页
   ·实验方法第76-79页
     ·秸秆的预处理第76页
     ·秸秆含水率的测定第76页
     ·秸秆的发酵方法第76页
     ·葡萄糖标准曲线的绘制第76-77页
     ·酒精标准曲线的绘制第77-78页
     ·发酵液中己糖浓度的测量第78页
     ·发酵液中酒精浓度的测量第78页
     ·菌种高速离心对发酵秸秆乙醇产率的影响第78页
     ·秸秆的扩大发酵第78-79页
   ·实验结果第79-84页
     ·秸秆发酵液中糖含量的变化第79-80页
     ·菌种高速离心对发酵秸秆乙醇产率的影响第80-81页
     ·秸秆发酵液中乙醇含量的变化的测定第81-82页
     ·菌株8号的秸秆发酵试验第82-83页
     ·甜高粱秸秆的稀硫酸酸解发酵研究第83-84页
     ·甜高粱秸秆中间性发酵研究第84页
   ·讨论第84-85页
   ·小结第85-86页
第六章 甜高粱五碳糖转化关键基因克隆第86-101页
   ·实验材料第86-87页
     ·质粒和菌株第86页
     ·培养基第86页
     ·工具酶和生化试剂第86页
     ·主要溶液第86-87页
     ·仪器第87页
   ·实验方法第87-92页
     ·基因组DNA的提取第87页
     ·基因组DNA的鉴定第87-92页
   ·实验结果第92-99页
     ·近平滑假丝酵母木糖还原酶基因XYL1的克隆、鉴定第92-97页
     ·热带假丝酵母木糖醇脱氢酶基因(XYL2)的克隆和序列分析第97-99页
   ·讨论第99页
   ·小结第99-101页
第七章 甜高粱五碳糖基因工程菌构建第101-117页
   ·实验材料第101-102页
     ·质粒和菌株第101页
     ·培养基第101-102页
     ·生化试剂第102页
     ·仪器第102页
   ·实验方法第102-105页
     ·酿酒酵母INVScl的生长曲线测定第102页
     ·毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115基因组的提取第102页
     ·GAP基因的引物设计第102-103页
     ·PCR扩增GAP基因第103页
     ·限制性内切酶酶切反应与DNA连接反应第103页
     ·DNA片段的纯化与回收第103页
     ·重组表达载体的构建第103页
     ·质粒的提取第103页
     ·质粒的转化第103-104页
     ·表达载体pYES2-XYL的筛选与鉴定第104页
     ·重组表达载体pYES2-XYL1在酿酒酵母INVScl中的表达第104页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)第104页
     ·考马斯亮蓝G-250染色法测定蛋白质浓度第104-105页
     ·木糖醇脱氢酶酶活测定第105页
     ·葡萄糖/木糖混和碳源的发酵评价第105页
   ·实验结果第105-115页
     ·XYL1基因功能验证第105-110页
     ·XYL2基因功能验证第110-114页
     ·葡萄糖/木糖混和碳源的发酵评价第114-115页
   ·讨论第115-116页
   ·小结第116-117页
第八章 结论与建议第117-119页
   ·结论第117页
   ·主要创新点第117-118页
   ·建议第118-119页
参考文献第119-125页
致谢第125-126页
个人简历及攻读期成果第126-127页

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