| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-17页 |
| ·γ-内酰胺的研究 | 第8-9页 |
| ·γ-内酰胺合成研究 | 第9-12页 |
| ·γ-内酰胺合成方法 | 第9-10页 |
| ·生物法不对称水解 γ-内酰胺研究进展 | 第10-12页 |
| ·异源表达研究 | 第12-15页 |
| ·大肠杆菌为宿主的异源表达研研究 | 第12-14页 |
| ·枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis表达系统特点 | 第14-15页 |
| ·本研究的来源、意义及研究思路 | 第15页 |
| ·本课题的来源 | 第15页 |
| ·课题的研究背景、意义、思路 | 第15页 |
| ·课题的研究内容 | 第15-17页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第17-23页 |
| ·实验材料 | 第17-19页 |
| ·菌种与所用载体 | 第17页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第17-18页 |
| ·实验所用引物 | 第18页 |
| ·培养基和溶液 | 第18-19页 |
| ·实验方法 | 第19-21页 |
| ·重组菌E. coli BL21(DE3)/pET24a-delm构建 | 第19页 |
| ·重组菌E. coli BL21(DE3)/pET24a-delm诱导表达及酶活测定 | 第19-20页 |
| ·重组菌E. coli BL21(DE3)/pET24a-delm诱导表达条件优化 | 第20页 |
| ·分子伴侣对DeLm蛋白表达可溶性的影响 | 第20页 |
| ·B. subtilis 168/pMA5-delm菌株构建 | 第20页 |
| ·重组B. subtilis 168 的 3 L发酵 | 第20-21页 |
| ·重组B. subtilis 168 全细胞催化条件优化 | 第21页 |
| ·全细胞合成光学纯 γ-内酰胺 | 第21页 |
| ·产物分离提取 | 第21页 |
| ·分析方法 | 第21-23页 |
| ·菌浓测定 | 第21页 |
| ·HPLC检测条件 | 第21-22页 |
| ·酶活定义 | 第22页 |
| ·计算公式 | 第22-23页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第23-40页 |
| ·Delftia sp.菌来源的 γ-内酰胺酶在E. coli中的异源表达 | 第23-29页 |
| ·基因调取 | 第23-24页 |
| ·重组大肠杆菌BL21(DE3)/pET24a-delm表达培养条件优化 | 第24-26页 |
| ·delm基因在T5 启动子条件下的诱导表达 | 第26-27页 |
| ·重组E. coli TB1/pMAL-p5x-delm和E. coli BL21(DE3)/pET43a-delm | 第27-28页 |
| ·异源蛋白DeLm和分子伴侣共表达 | 第28-29页 |
| ·Delftia sp.菌来源的 γ-内酰胺酶在Bacillus subtilis中的异源表达 | 第29-30页 |
| ·B. subtilis/pMA5-delm全细胞水解 γ-内酰胺优化 | 第30-40页 |
| ·重组菌B. subtilis/pMA5-delm的发酵研究 | 第30-31页 |
| ·重组B. subtilis/pMA5-delm细胞催化的最适温度 | 第31-32页 |
| ·重组B. subtilis/pMA5-delm全细胞催化的最适pH | 第32-33页 |
| ·重组B. subtilis/pMA5-delm全细胞催化的最适搅拌转速 | 第33-34页 |
| ·重组B. subtilis/pMA5-delm全细胞催化表观动力学研究 | 第34-35页 |
| ·重组B. subtilis/pMA5-delm全细胞催化制备(?)-γ-内酰胺 | 第35-40页 |
| 主要结论与展望 | 第40-42页 |
| 主要结论 | 第40页 |
| 展望 | 第40-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-49页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第49页 |
