| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-16页 |
| ·D-阿洛酮糖简介 | 第8页 |
| ·D-阿洛酮糖3差向异构酶 | 第8-9页 |
| ·D-木糖异构酶 | 第9-10页 |
| ·酶固定化技术概述 | 第10-11页 |
| ·酿酒酵母孢子作为酶固定化载体的应用 | 第11-14页 |
| ·酿酒酵母孢子的形成 | 第11页 |
| ·酿酒酵母孢子壁的组装 | 第11-13页 |
| ·酿酒酵母孢子固定化酶（生物法） | 第13-14页 |
| ·酿酒酵母孢子固定化酶（化学法） | 第14页 |
| ·D-阿洛酮糖的合成 | 第14-15页 |
| ·本论文的研究意义及其主要研究内容 | 第15-16页 |
| ·本论文的研究意义 | 第15页 |
| ·本论文的主要研究内容 | 第15-16页 |
| 第二章 材料与方法 | 第16-30页 |
| ·实验材料 | 第16-20页 |
| ·菌株、质粒和引物 | 第16-18页 |
| ·酶、试剂及耗材 | 第18页 |
| ·培养基及缓冲液 | 第18-20页 |
| ·主要仪器 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-30页 |
| ·大肠杆菌高效感受态细胞的制备 | 第20-21页 |
| ·大肠杆菌质粒转化 | 第21页 |
| ·基因片段的扩增、纯化、酶切及连接 | 第21-22页 |
| ·质粒的构建 | 第22页 |
| ·XI和DPEase的表达与纯化 | 第22-23页 |
| ·酶活测定 | 第23-24页 |
| ·酿酒酵母质粒转化 | 第24-25页 |
| ·酿酒酵母产孢和孢子纯化 | 第25页 |
| ·XI在孢子壁上的荧光定位 | 第25页 |
| ·Western blot分析XI在孢子上的表达量以及对高温的耐受性 | 第25-26页 |
| ·pH、温度对XI的影响以及XI孢子固定化酶的重复利用性能 | 第26-27页 |
| ·DPEase糖基化位点的定点突变 | 第27页 |
| ·化学法固定DPEase条件的优化 | 第27-28页 |
| ·化学法固定DPEase酶固定量的检测 | 第28页 |
| ·pH、温度对DPEase的影响以及DPEase孢子固定化酶的重复利用性能 | 第28-29页 |
| ·一步法合成D-阿洛酮糖 | 第29页 |
| ·两步法合成D-阿洛酮糖 | 第29-30页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第30-41页 |
| ·XI和DPEase在大肠杆菌中的表达与纯化 | 第30-31页 |
| ·XI的表达与纯化 | 第30页 |
| ·DPEase的表达与纯化 | 第30-31页 |
| ·XI在酿酒酵母孢子中的表达及性质研究 | 第31-35页 |
| ·XI在酿酒酵母孢子中的荧光定位 | 第31-32页 |
| ·Western blot分析XI在酿酒酵母孢子中的表达量以及高温反应条件对孢子固定性能的影响 | 第32-33页 |
| ·Osw2Δ 孢子能够作为最佳酶固定化载体 | 第33-34页 |
| ·XI孢子固定化酶酶学性质测定 | 第34-35页 |
| ·N-糖基化对DPEase活性的影响 | 第35页 |
| ·DPEase在酿酒酵母孢子上的化学法固定及性质研究 | 第35-38页 |
| ·DPEase固定条件的优化及其固定量的测定 | 第35-37页 |
| ·孢子固定化酶DPEase的酶学性质测定 | 第37-38页 |
| ·D-阿洛酮糖的合成 | 第38-41页 |
| ·D-阿洛酮糖的一步法合成 | 第38-39页 |
| ·D-阿洛酮糖的两步法合成 | 第39-41页 |
| 主要结论与展望 | 第41-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第49页 |
