| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-12页 |
| 1 前言 | 第12-24页 |
| ·纤维素概述 | 第12-13页 |
| ·纤维素资源 | 第12页 |
| ·纤维素组成与结构 | 第12-13页 |
| ·纤维素酶及其降解机制 | 第13-16页 |
| ·纤维素酶的分类 | 第14页 |
| ·纤维素酶作用机理 | 第14-16页 |
| ·纤维素酶体的结构和功能 | 第16-19页 |
| ·纤维素酶的结构 | 第17-18页 |
| ·内切葡聚糖酶 | 第18页 |
| ·外切葡聚糖酶和内切葡聚糖酶之间的差异 | 第18页 |
| ·嗜冷、嗜温和嗜热纤维素酶之间的差异 | 第18-19页 |
| ·纤维素酶产生微生物的分离 | 第19-20页 |
| ·纤维素酶活力测定 | 第20-21页 |
| ·纤维素酶基因的克隆与表达 | 第21-22页 |
| ·纤维素酶的应用 | 第22-24页 |
| ·纺织行业的应用 | 第22-23页 |
| ·饲料工业的应用 | 第23页 |
| ·造纸工业上的应用 | 第23页 |
| ·食品工业上的应用 | 第23页 |
| ·能源及环境保护方面的应用 | 第23-24页 |
| ·本研究的内容、目的和意义 | 第24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-35页 |
| ·样品采集 | 第24页 |
| ·培养基配方 | 第24-25页 |
| ·实验材料及设备 | 第25-26页 |
| ·菌株和质粒 | 第25页 |
| ·主要化学试剂 | 第25页 |
| ·主要试剂盒及工具酶 | 第25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25-26页 |
| ·实验试剂 | 第26页 |
| ·引物 | 第26-27页 |
| ·纤维素降解菌分离与鉴定方法 | 第27-29页 |
| ·土样悬液的制备 | 第27页 |
| ·菌株分离纯化 | 第27页 |
| ·纤维素酶产生菌的鉴定及系统发育进化分析 | 第27-29页 |
| ·纤维素酶活的测定 | 第29-30页 |
| ·葡萄糖标准曲线的绘制 | 第29-30页 |
| ·纤维素酶活力测定 | 第30页 |
| ·菌株DAZJ13产酶条件优化方法 | 第30-31页 |
| ·不同培养初始pH对菌株DAZJ13产酶的影响 | 第30页 |
| ·不同培养温度对菌株DAZJ13产酶的影响 | 第30页 |
| ·不同培养碳源对菌株DAZJ13产酶的影响 | 第30页 |
| ·不同培养氮源对菌株DAZJ13产酶的影响 | 第30-31页 |
| ·Biolog微生物自动分析系统鉴定 | 第31页 |
| ·Biolog微生物自动分析系统鉴定原理 | 第31页 |
| ·Biolog微生物自动分析系统鉴定过程 | 第31页 |
| ·DW12基因组测序方法 | 第31页 |
| ·DW12纤维素酶基因的克隆与表达方法 | 第31-35页 |
| ·细菌基因组DNA的提取 | 第31-32页 |
| ·PCR扩增 | 第32页 |
| ·目的基因的连接转化与鉴定 | 第32-33页 |
| ·目的基因在大肠杆菌中的诱导表达 | 第33页 |
| ·诱导表达蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析 | 第33页 |
| ·表达产物的纯化 | 第33-34页 |
| ·目的蛋白的酶学性质检测 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-48页 |
| ·菌株分离、纯化 | 第35-36页 |
| ·菌株的种属鉴定 | 第36-37页 |
| ·核糖体小亚基序列同源性分析及其来源菌株初步分类鉴定 | 第37-38页 |
| ·CMC酶活测定 | 第38-40页 |
| ·葡萄糖标准曲线的绘制 | 第38-39页 |
| ·菌株的酶活测定 | 第39-40页 |
| ·真菌菌株DAZJ13产酶条件的优化 | 第40-41页 |
| ·在不同pH及培养天数下,培养温度对发酵产酶的影响 | 第40页 |
| ·在不同pH及培养天数下,碳源对发酵产酶的影响 | 第40-41页 |
| ·在不同PH及培养天数下,氮源对发酵产酶的影响 | 第41页 |
| ·DW12分子系统发育分析 | 第41-42页 |
| ·Biolog微生物自动分析系统鉴定 | 第42-43页 |
| ·DW12基因组测序结果 | 第43-45页 |
| ·测序数据统计 | 第43页 |
| ·基因组组装 | 第43-44页 |
| ·基因组注释 | 第44-45页 |
| ·纤维素酶基因的异源表达 | 第45-48页 |
| ·纤维素酶基因E3653的诱导表达 | 第45-46页 |
| ·表达蛋白的特异性 | 第46-48页 |
| 4 讨论与结论 | 第48-53页 |
| ·讨论 | 第48-51页 |
| ·产纤维素酶微生物的筛选及鉴定 | 第48-49页 |
| ·真菌DAZJ13产酶条件优化 | 第49-50页 |
| ·DW12全基因组测序及纤维素酶基因的克隆与表达 | 第50-51页 |
| ·结论 | 第51-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-66页 |
| 作者简介 | 第66页 |
