| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-22页 |
| ·巨核细胞的成熟与血小板形成研究进展 | 第11-14页 |
| ·巨核细胞的来源 | 第11页 |
| ·巨核细胞分化过程 | 第11页 |
| ·血小板生成理论模型 | 第11-12页 |
| ·巨核细胞的凋亡与血小板的生成 | 第12页 |
| ·血小板生成中的调控因子 | 第12-14页 |
| ·Meg-01细胞的研究进展 | 第14页 |
| ·凝血因子研究进展 | 第14-16页 |
| ·PARs家族的研究进展 | 第16-17页 |
| ·转录因子GATA-1的研究进展 | 第17页 |
| ·Bcl-2家族研究进展 | 第17-18页 |
| ·PI3K/AKT信号通路研究进展 | 第18-19页 |
| ·MAPK/ERK通路研究进展 | 第19页 |
| ·PTEN研究进展 | 第19-20页 |
| ·血小板异常与疾病的发生 | 第20-21页 |
| ·本课题研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| ·研究目的及意义 | 第21页 |
| ·研究的内容 | 第21-22页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第22-30页 |
| ·实验材料 | 第22-26页 |
| ·主要细胞株 | 第22页 |
| ·荧光实时定量PCR引物 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22-24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| ·溶液配制方法 | 第25-26页 |
| ·常用实验方法 | 第26-30页 |
| ·细胞复苏 | 第26页 |
| ·细胞培养 | 第26页 |
| ·细胞冻存 | 第26页 |
| ·细胞总蛋白提取 | 第26页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第26-27页 |
| ·免疫蛋白印记 | 第27-28页 |
| ·逆转录扩增 | 第28页 |
| ·荧光定量PCR扩增 | 第28-29页 |
| ·蛋白浓度检测 | 第29页 |
| ·统计学分析 | 第29-30页 |
| 第三章 凝血酶在Meg-01细胞分化为 | 第30-47页 |
| ·实验步骤 | 第30-33页 |
| ·细胞形态学观察 | 第30页 |
| ·细胞的活性检测 | 第30页 |
| ·血小板样颗粒活性检测 | 第30页 |
| ·流式细胞术测细胞凋亡 | 第30-31页 |
| ·流式细胞术测细胞周期 | 第31页 |
| ·流式细胞术测细胞表面标记CD41b | 第31页 |
| ·流式细胞术测巨核细胞表面标记CD61 | 第31-32页 |
| ·流式细胞术测血小板颗粒表面标记CD61 | 第32页 |
| ·荧光实时定量PCR测GATA-1、Bcl-2、PAR1及PAR4 mRNA表达量 | 第32页 |
| ·免疫蛋白印记法测目的蛋白表达 | 第32-33页 |
| ·血小板颗粒聚集实验 | 第33页 |
| ·实验结果 | 第33-45页 |
| ·Meg-01细胞是巨核细胞系 | 第33-34页 |
| ·凝血酶引起Meg-01细胞形态学变化 | 第34-35页 |
| ·凝血酶抑制Meg-01细胞增殖 | 第35-36页 |
| ·凝血酶对Meg-01细胞周期的影响 | 第36-37页 |
| ·凝血酶诱导Meg-01细胞凋亡 | 第37-38页 |
| ·凝血酶对GATA-1、Bcl-2、PAR1和PAR4的表达的影响 | 第38-40页 |
| ·凝血酶促进CD41b表达 | 第40-42页 |
| ·凝血酶激活MAPK/ERK和PI3K/AKT通路 | 第42-43页 |
| ·血小板样颗粒的活性检测 | 第43-44页 |
| ·血小板样颗粒的CD61表达检测 | 第44页 |
| ·血小板样颗粒的聚集 | 第44-45页 |
| ·结论与讨论 | 第45-47页 |
| 第四章 凝血因子Xa在Meg-01细胞分化为血小板中的作用及其机制 | 第47-56页 |
| ·实验步骤 | 第47-49页 |
| ·细胞形态学观察 | 第47页 |
| ·细胞活性检测 | 第47页 |
| ·血小板样颗粒活性检测 | 第47页 |
| ·细胞周期检测 | 第47-48页 |
| ·流式细胞术测细胞表面标记CD41b | 第48页 |
| ·免疫印记法检测目的蛋白的表达 | 第48-49页 |
| ·实验结果 | 第49-54页 |
| ·凝血因子Xa促进Meg-01细胞产生血小板样活性颗粒 | 第49-50页 |
| ·凝血因子Xa抑制Meg-01细胞增殖 | 第50页 |
| ·凝血因子Xa诱导Meg-01细胞凋亡 | 第50-51页 |
| ·凝血因子Xa对Meg-01细胞周期的影响 | 第51-53页 |
| ·凝血因子Xa促进CD41b表达 | 第53-54页 |
| ·凝血因子Xa激活MAPK/ERK和PI3K/AKT通路 | 第54页 |
| ·结果与讨论 | 第54-56页 |
| 第五章 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 附录 略词表 | 第63-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第67-68页 |
