| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-15页 |
| 引言 | 第15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-30页 |
| ·群体感应系统简述 | 第15-16页 |
| ·革兰氏阴性菌QS系统 | 第16-18页 |
| ·革兰氏阳性菌QS系统 | 第18-19页 |
| ·QS系统的应用 | 第19-24页 |
| ·乳酸菌QS系统的研究现状 | 第24-26页 |
| ·植物乳杆菌ZJ316的QS系统 | 第26-29页 |
| ·plnA、plnB碱基比对 | 第27-28页 |
| ·PlnA、PlnB氨基酸序列比对 | 第28页 |
| ·plnA前结合位点 | 第28-29页 |
| ·本实验研究的内容及目的 | 第29-30页 |
| 第二章 plnC、plnD重组质粒构建 | 第30-49页 |
| ·实验材料 | 第30-33页 |
| ·菌种 | 第30页 |
| ·培养基 | 第30页 |
| ·试剂 | 第30-31页 |
| ·溶液 | 第31-32页 |
| ·引物 | 第32页 |
| ·质粒 | 第32页 |
| ·仪器与设备 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-40页 |
| ·菌种活化 | 第33页 |
| ·植物乳杆菌基因组提取 | 第33-34页 |
| ·plnC、plnD基因确定 | 第34-36页 |
| ·plnC、plnD基因的获得 | 第36页 |
| ·质粒PNZ8048的提取 | 第36-37页 |
| ·质粒PNZ8048与目的条带双酶切 | 第37-38页 |
| ·沉淀法回收酶切产物 | 第38页 |
| ·目的片段与质粒连接 | 第38页 |
| ·E.coli DH5α感受态的制备 | 第38-39页 |
| ·E.coli DH5α电转化 | 第39页 |
| ·阳性菌筛选及鉴定 | 第39-40页 |
| ·结果与讨论 | 第40-48页 |
| ·阳性菌筛选及鉴定 | 第40-41页 |
| ·目的条带获得 | 第41-43页 |
| ·转化E.coli DH5α | 第43页 |
| ·PCR验证 | 第43-44页 |
| ·酶切验证 | 第44-46页 |
| ·测序结果 | 第46-47页 |
| ·功能位点预测分析 | 第47页 |
| ·目标蛋白的空间构象 | 第47-48页 |
| ·本章小结 | 第48-49页 |
| 第三章 重组质粒转化植物乳杆菌ZJ316 | 第49-59页 |
| ·实验材料 | 第49-51页 |
| ·菌株 | 第49页 |
| ·培养基 | 第49页 |
| ·试剂 | 第49-50页 |
| ·溶液 | 第50页 |
| ·引物 | 第50页 |
| ·实验仪器 | 第50-51页 |
| ·实验方法 | 第51-54页 |
| ·ZJ316菌种活化 | 第51页 |
| ·ZJ316生长曲线的测定 | 第51页 |
| ·不同生长期对转化效率的影响 | 第51-52页 |
| ·不同细胞壁弱化剂对转化效率的影响 | 第52页 |
| ·不同电转缓冲液对转化效率的影响 | 第52-53页 |
| ·ZJ316感受态的制备 | 第53页 |
| ·重组质粒提取 | 第53页 |
| ·ZJ316电转化 | 第53-54页 |
| ·阳性菌的筛选及鉴定 | 第54页 |
| ·重组菌生长曲线的测定 | 第54页 |
| ·实验结果与讨论 | 第54-58页 |
| ·植物乳杆菌ZJ316生长曲线 | 第54-55页 |
| ·植物乳杆菌ZJ316电转化体系 | 第55-56页 |
| ·PCR验证 | 第56-57页 |
| ·重组菌生长曲线 | 第57-58页 |
| ·本章小结 | 第58-59页 |
| 第四章 重组菌诱导表达、QS功能初步探索 | 第59-68页 |
| ·实验材料 | 第59-61页 |
| ·菌株 | 第59页 |
| ·培养基 | 第59页 |
| ·试剂 | 第59-60页 |
| ·溶液 | 第60页 |
| ·仪器与设备 | 第60-61页 |
| ·实验方法 | 第61-65页 |
| ·基因工程菌诱导 | 第61页 |
| ·诱导条件的优化 | 第61-62页 |
| ·SDS-PAGE | 第62-64页 |
| ·抑菌实验 | 第64-65页 |
| ·实验结果与讨论 | 第65-67页 |
| ·SDS-PAGE | 第65-66页 |
| ·抑菌实验 | 第66-67页 |
| ·本章小结 | 第67-68页 |
| 第五章 原生质体融合改造植物乳杆菌ZJ316 QS系统 | 第68-78页 |
| ·实验材料 | 第68-70页 |
| ·菌种 | 第68页 |
| ·培养基与溶液 | 第68页 |
| ·溶液 | 第68-69页 |
| ·试剂 | 第69页 |
| ·引物 | 第69-70页 |
| ·仪器与设备 | 第70页 |
| ·实验方法 | 第70-73页 |
| ·菌种活化 | 第70-71页 |
| ·生长曲线的测定 | 第71页 |
| ·原生质体预处理 | 第71页 |
| ·原生质体融合 | 第71-72页 |
| ·SDS-PAGE | 第72页 |
| ·电镜观察 | 第72页 |
| ·抑菌活性的测定 | 第72页 |
| ·融合子的PCR验证 | 第72-73页 |
| ·结果与讨论 | 第73-77页 |
| ·生长曲线的测定 | 第73页 |
| ·原生质体形成率和再生率 | 第73-74页 |
| ·融合结果 | 第74页 |
| ·SDS-PAGE结果 | 第74-75页 |
| ·菌体形态 | 第75-76页 |
| ·抑菌实验结果 | 第76页 |
| ·融合PCR验证 | 第76-77页 |
| ·本章小结 | 第77-78页 |
| 第六章 总结 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |