| 缩略词表 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 前言 | 第12-16页 |
| 材料与方法 | 第16-21页 |
| 1. 材料 | 第16-17页 |
| 2. 方法 | 第17-21页 |
| 第一部分 SGEF 增强 EGFR 蛋白稳定性的分子机制研究 | 第21-32页 |
| 1.SGEF 增强 EGFR 蛋白稳定性 | 第21-25页 |
| ·SGEF 增强前列腺癌细胞 EGFR 的蛋白表达水平 | 第21页 |
| ·过表达 SGEF 抑制 EGF 诱导的 EGFR 降解 | 第21-22页 |
| ·敲低 SGEF 促进 EGF 诱导的 EGFR 降解 | 第22页 |
| ·免疫荧光实验验证敲低 SGEF 促进 EGF 诱导的 EGFR 降解 | 第22-24页 |
| ·SGEF 增强 EGFR 蛋白稳定性不依赖其鸟苷酸交换酶活性 | 第24-25页 |
| 2. SGEF 增强 EGFR 蛋白稳定性的机制 | 第25-30页 |
| ·过表达 SGEF 不能抑制 EGFR 的泛素化 | 第25-26页 |
| ·过表达 SGEF 不能抑制 EGFR 的内吞 | 第26-27页 |
| ·过表达 SGEF 抑制 EGFR 从早期内体进入晚期内体 | 第27-29页 |
| ·敲低 SGEF 促进 EGFR 从早期内体进入晚期内体 | 第29-30页 |
| 3. SGEF 增强 EGFR 蛋白稳定性的的意义 | 第30-32页 |
| ·敲低 SGEF 抑制前列癌细胞中 EGF 诱导的 EGFR 和 AKT 的磷酸化 | 第30-31页 |
| ·敲低 SGEF 抑制 EGF 诱导的前列癌细胞迁移 | 第31-32页 |
| 第二部分 Grb2 通过与 SGEF 相互作用拮抗 SGEF 对 EGFR/ERK1/2 信号通路的增强作用 | 第32-44页 |
| 1. SGEF 以鸟苷酸交换酶活性非依赖的方式增强 EGF 诱导的 ERK1/2 磷酸化 | 第32-34页 |
| ·过表达 SGEF 增强 EGF 诱导的 ERK1/2 磷酸化 | 第32-33页 |
| ·敲低 SGEF 抑制 EGF 诱导的 ERK1/2 磷酸化 | 第33页 |
| ·SGEF 增强 EGF 诱导的 ERK1/2 磷酸化不依赖于其鸟苷酸交换酶活性 | 第33-34页 |
| 2. Grb2 与 SGEF 存在相互作用 | 第34-36页 |
| ·GST pull down 实验验证 Grb2 与 SGEF 存在相互作用 | 第34-35页 |
| ·外源 IP 实验验证 Grb2 与 SGEF 存在相互作用 | 第35页 |
| ·内源 IP 实验验证 Grb2 与 SGEF 存在相互作用 | 第35-36页 |
| 3. Grb2 与 SGEF 相互作用的定位 | 第36-40页 |
| ·SGEF 的 Pro 结构域介导了 SGEF 与 Grb2 之间的相互作用 | 第36-38页 |
| ·Grb2 的 SH3 结构域介导了 Grb2 与 SGEF 之间的相互作用 | 第38-39页 |
| ·Grb2 的 SH3 结构域与 SGEF 的 Pro 结构域介导了 Grb2 与 SGEF 之间的相互作用 | 第39-40页 |
| 4. Grb2 通过与 SGEF 相互作用拮抗 SGEF 对 EGFR/ERK1/2 信号通路的增强作用 | 第40-44页 |
| ·破坏 SGEF 与 Grb2 之间的相互作用促进了 SGEF 对 EGFR/ERK1/2 信号通路的增强作用 | 第40-41页 |
| ·过表达 Grb2 抑制 SGEF 对 EGFR/ERK1/2 信号通路的增强作用 | 第41页 |
| ·敲低 Grb2 促进 SGEF 对 EGFR/ERK1/2 信号通路的增强作用 | 第41-44页 |
| 讨论 | 第44-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 附录 | 第55-57页 |
| 文献综述 | 第57-69页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| 个人简历 | 第69-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
