| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 第一章 鸡的传染性法氏囊病的研究进展 | 第11-22页 |
| ·IBDV病原学 | 第11页 |
| ·IBDV基因组 | 第11-12页 |
| ·IBDV的病毒蛋白及其生物学功能 | 第12-13页 |
| ·IBDV繁殖过程及致病机制 | 第13-15页 |
| ·IBDV受体的研究进展 | 第15-16页 |
| ·调节基因表达的有力工具——RNA干扰技术 | 第16-20页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第20-22页 |
| 第二章 靶向SIgMλ轻链的RNAi载体的构建及其有效性鉴定 | 第22-35页 |
| ·材料 | 第22-26页 |
| ·质粒和细胞 | 第22页 |
| ·酶及主要试剂 | 第22-23页 |
| ·试剂的配制 | 第23-24页 |
| ·主要仪器 | 第24页 |
| ·引物及核苷酸序列 | 第24-26页 |
| ·方法 | 第26-29页 |
| ·pAnGH1载体的构建 | 第26-27页 |
| ·siRNA的预测 | 第27页 |
| ·利用pAnGH1载体转录shRNA对EGFP基因进行干扰 | 第27-29页 |
| ·结果 | 第29-33页 |
| ·pAnGH1载体的鉴定 | 第29-32页 |
| ·siRNA有效靶点的预测及能表达相应shRNA的重组载体的快速鉴定 | 第32页 |
| ·流式检测pAnGH1载体的有效性 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33-35页 |
| 第三章 SIgMλ轻链瞬时沉默的RNAi效果检测 | 第35-43页 |
| ·材料 | 第35页 |
| ·细胞 | 第35页 |
| ·酶及主要试剂 | 第35页 |
| ·试剂的配制 | 第35页 |
| ·方法 | 第35-39页 |
| ·利用 pAnGH1载体转录shRNA对DT40细胞上SIgMλ轻链分子的编码基因进行RNAi | 第35-36页 |
| ·流式检测瞬时转染DT40细胞膜表面SIgMλ轻链的沉默效果 | 第36页 |
| ·RT-PCR瞬时转染DT40细胞膜表面SIgMλ轻链的沉默效果 | 第36-39页 |
| ·结果 | 第39-41页 |
| ·流式细胞术检测DT40细胞表面SIgMλ轻链的有效沉默 | 第39-40页 |
| ·RT-PCR检测DT40细胞表面SIgMλ轻链的有效沉默 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 第四章 SIgMλ轻链稳定沉默的RNAi效果检测 | 第43-53页 |
| ·材料 | 第43页 |
| ·细胞及病毒 | 第43页 |
| ·试剂 | 第43页 |
| ·试剂的配制 | 第43页 |
| ·方法 | 第43-47页 |
| ·质粒的线性化 | 第43-44页 |
| ·G418工作浓度的确定 | 第44页 |
| ·线性质粒稳定转染DT40细胞 | 第44-45页 |
| ·G418筛选稳定转染的细胞 | 第45页 |
| ·单克隆的挑选 | 第45页 |
| ·流式细胞术检测单克隆细胞SIgMλ轻链沉默效果 | 第45-46页 |
| ·流式细胞术检测SIgMλ轻链沉默的单克隆细胞与病毒的结合能力 | 第46-47页 |
| ·结果 | 第47-51页 |
| ·稳定转染DT40细胞的筛选 | 第47-48页 |
| ·单克隆细胞系的建立 | 第48-49页 |
| ·单克隆细胞SIgMλ轻链的沉默效果检测 | 第49-50页 |
| ·SIgMλ轻链沉默的单克隆细胞与IBDV的结合能力检测结果 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 个人简历 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
