| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-20页 |
| ·海藻糖的主要性质 | 第10-12页 |
| ·海藻糖的结构 | 第10页 |
| ·海藻糖理化性质 | 第10页 |
| ·海藻糖生物学特性 | 第10-12页 |
| ·海藻糖的应用 | 第12-14页 |
| ·海藻糖在食品工业中的应用 | 第12-13页 |
| ·海藻糖在医药方面的应用 | 第13页 |
| ·海藻糖在化妆品行业中的应用 | 第13-14页 |
| ·海藻糖在农业育种方面的应用 | 第14页 |
| ·海藻糖在生化制品中的应用 | 第14页 |
| ·海藻糖的合成途经和制备方法 | 第14-17页 |
| ·微生物提取法 | 第14-15页 |
| ·微生物发酵法 | 第15页 |
| ·转基因法 | 第15页 |
| ·酶合成法 | 第15-17页 |
| ·海藻糖合酶的研究进展 | 第17-18页 |
| ·海藻糖合酶的酶学性质 | 第17页 |
| ·海藻糖合酶的催化机理 | 第17-18页 |
| ·海藻糖合酶尚待解决的问题 | 第18页 |
| ·本研究的意义及主要内容 | 第18-20页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第18-19页 |
| ·本研究的主要内容 | 第19-20页 |
| 第二章 海藻糖突变菌株YUV3海藻糖合酶TresY基因的克隆 | 第20-35页 |
| ·材料 | 第20-22页 |
| ·宿主菌与质粒 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·主要溶液和培养基 | 第20-21页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| ·试验方法 | 第22-28页 |
| ·高产海藻糖突变菌株YUV3细菌DNA基因组提取 | 第22-23页 |
| ·突变菌株YUV3海藻糖合酶的引物设计与合成 | 第23页 |
| ·突变菌株YUV3海藻糖合酶的PCR扩增 | 第23页 |
| ·目的产物回收 | 第23-24页 |
| ·目的片段与克隆载体pMD-18-T-simple连接 | 第24-25页 |
| ·E.coliDH5α感受态细胞的制备 | 第25页 |
| ·重组质粒转化E.coliDH5α | 第25-26页 |
| ·小量提取重组质粒 | 第26页 |
| ·菌液的PCR鉴定和重组质粒的酶切鉴定 | 第26-28页 |
| ·试验结果与分析 | 第28-32页 |
| ·突变菌株YUV3海藻糖合酶基因组DNA提取 | 第28-29页 |
| ·海藻糖合酶的PCR扩增 | 第29-30页 |
| ·重组质粒T-TresY的酶切鉴定和重组菌液PCR鉴定 | 第30-31页 |
| ·重组质粒的核苷酸序列测定 | 第31-32页 |
| ·讨论 | 第32-34页 |
| ·小结 | 第34-35页 |
| 第三章 海藻糖突变菌株YUV3海藻糖合酶TresY在大肠杆菌中原核表达 | 第35-45页 |
| ·材料 | 第35-37页 |
| ·宿主菌和质粒 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35页 |
| ·主要溶液和培养基 | 第35-36页 |
| ·主要仪器 | 第36-37页 |
| ·试验方法 | 第37-40页 |
| ·T-TresY基因的酶切和目的片段回收 | 第37页 |
| ·pET-28a(+)表达载体的酶切和回收 | 第37-38页 |
| ·目的基因与表达载体连接 | 第38页 |
| ·转化表达宿主菌E.coliBL-21 | 第38页 |
| ·重组表达菌的PCR鉴定与重组表达质粒的双酶切鉴定 | 第38页 |
| ·重组表达质粒的核苷酸序列测定 | 第38页 |
| ·重组菌P-TresY的诱导表达 | 第38-39页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第39页 |
| ·突变菌株YUV3海藻糖合酶TresY的Western blotting分析 | 第39-40页 |
| ·试验结果与分析 | 第40-43页 |
| ·海藻糖合酶TresY原核表达载体的构建 | 第40-41页 |
| ·重组质粒P-TresY的酶切鉴定和菌液PCR鉴定 | 第41-42页 |
| ·重组菌P-TresY的诱导表达 | 第42页 |
| ·重组菌P-TresY的Western blotting分析 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 第四章 结论与展望 | 第45-46页 |
| ·结论 | 第45页 |
| ·展望 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 作者简介 | 第52页 |
