| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-17页 |
| ·植物成花研究进展 | 第11-12页 |
| ·竹类植物开花研究 | 第12-14页 |
| ·肽基脯氨酰顺反异构酶(PP1ase) | 第14-15页 |
| ·Pin1At 基因研究进展 | 第15-16页 |
| ·技术路线 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-41页 |
| ·实验材料 | 第17-18页 |
| ·实验菌株、质粒及试剂 | 第18-20页 |
| ·主要菌株 | 第18页 |
| ·实验所需质粒 | 第18-19页 |
| ·实验主要试剂 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-41页 |
| ·RNA 提取 | 第20页 |
| ·DNA 提取 | 第20-21页 |
| ·RNA 的反转录 | 第21-22页 |
| ·同源序列的克隆 | 第22页 |
| ·PCR 产物胶回收 | 第22-23页 |
| ·连接反应 | 第23页 |
| ·质粒的提取 | 第23-24页 |
| ·不同菌种感受态的制备 | 第24-25页 |
| ·转化 | 第25-27页 |
| ·菌液 PCR 检测及测序 | 第27页 |
| ·PvPin1At 基因 3’RACE 扩增 | 第27-29页 |
| ·PvPin1At 基因 5' RACE 扩增 | 第29-32页 |
| ·PvPin1At 基因 ORF 区的扩增 | 第32页 |
| ·植物双元表达载体的构建 | 第32-33页 |
| ·农杆菌感受态转化 | 第33-34页 |
| ·拟南芥种植和转基因植株的筛选 | 第34-35页 |
| ·PvPin1At 表达分析 | 第35页 |
| ·酵母双杂交 | 第35-36页 |
| ·PvPin1At 原核表达载体构建 | 第36-37页 |
| ·SDS‐聚丙烯酞胺凝胶电泳 | 第37-38页 |
| ·PvPin1At1 重组质粒小量表达优化 | 第38页 |
| ·PvPin1At 蛋白定点突变载体构建 | 第38-39页 |
| ·PvPin1At 基因转入水稻 | 第39-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-58页 |
| ·雷竹的 RNA 提取结果 | 第41页 |
| ·PvPin1At 基因 ORF 序列的获得 | 第41-42页 |
| ·PvPin1At 基因 RACE 扩增结果 | 第42页 |
| ·PvPin1At 全长 cDNA 序列的获得 | 第42-43页 |
| ·PvPin1At 基因的生物信息学分析 | 第43-46页 |
| ·PvPin1At 基因氨基酸组成及理化性质分析 | 第43-44页 |
| ·PvPin1At 二级结构预测 | 第44-45页 |
| ·PvPin1At 同源氨基酸序列比对与系统进化树的分析 | 第45-46页 |
| ·Real-time PCR 分析 PvPin1At 在雷竹中的相对表达量 | 第46页 |
| ·PvPin1At 植物双元表达载体的构建 | 第46-48页 |
| ·pMD20‐PvPin1At 质粒和 pC1301 质粒酶切连接验证 | 第46-47页 |
| ·质粒转化农杆菌感受态及验证 | 第47-48页 |
| ·酵母双杂交载体的构建 | 第48-50页 |
| ·构建酵母双杂的目的 | 第48页 |
| ·目的基因片段的扩增 | 第48-49页 |
| ·目的基因与双杂载体酶切与连接 | 第49页 |
| ·目的基因与双杂载体连接后鉴定 | 第49-50页 |
| ·酵母重组诱饵质粒（BD）的自激活检测 | 第50页 |
| ·PvPin1At 蛋白和 PvSOC1 蛋白的相互作用检测 | 第50-51页 |
| ·PvPin1At 基因转化拟南芥 | 第51-52页 |
| ·转基因植株的 PCR 检测 | 第52-53页 |
| ·PvPin1At 基因原核表达重组质粒载体构建 | 第53-54页 |
| ·重组 PvPin1At 蛋白的小量表达 | 第54-55页 |
| ·PvPin1At 基因第 27 位氨基酸突变的植物双元表达载体的构建 | 第55-57页 |
| ·pMD20‐PvPin1At1 质粒和 pMD20‐PvPin1At2 质粒突变 PCR | 第55页 |
| ·突变质粒和 pC1301 质粒酶切连接验证 | 第55-57页 |
| ·水稻转入 PvPin1At 基因验证 | 第57-58页 |
| 4 结论与讨论 | 第58-60页 |
| ·结论 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 个人简介 | 第65页 |
| 在校期间发表论文情况 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 附录 | 第67-68页 |
