| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-17页 |
| 1 绪论 | 第17-30页 |
| ·脐孢木霉菌 | 第17-19页 |
| ·脐孢木霉菌的发现 | 第17页 |
| ·脐孢木霉菌的生防作用 | 第17-18页 |
| ·木霉素的生防作用 | 第18-19页 |
| ·单端孢霉烯类化合物 | 第19-24页 |
| ·单端孢霉烯类化合物的概述 | 第19-20页 |
| ·单端孢霉烯类化合物的主要生产菌种 | 第20页 |
| ·单端孢霉烯类化合物的合成途径 | 第20-23页 |
| ·单端孢霉烯类化合物合成的相关基因 | 第23-24页 |
| ·RNA 干扰研究基因功能 | 第24-28页 |
| ·RNAi 机制 | 第25-27页 |
| ·RNAi 特点 | 第27页 |
| ·双链 RNA 的合成方式 | 第27-28页 |
| ·研究内容及意义 | 第28-30页 |
| ·研究的主要内容 | 第28页 |
| ·研究的重要意义 | 第28-30页 |
| 2 脐孢木霉菌 0248 中 tri14 基因片段验证及全长克隆 | 第30-40页 |
| ·材料及仪器 | 第30-31页 |
| ·菌株及质粒 | 第30页 |
| ·培养基及主要试剂 | 第30-31页 |
| ·试剂盒、酶及耗材 | 第31页 |
| ·主要仪器 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-34页 |
| ·脐孢木霉菌 0248 孢子悬液的制备 | 第31-32页 |
| ·JM109 感受态细胞的制备 | 第32页 |
| ·0248 菌中总 RNA 提取及其反转录 | 第32页 |
| ·0248 菌中 tri14 基因片段克隆及测序 | 第32-33页 |
| ·0248 菌中 tri14 基因全长克隆 | 第33-34页 |
| ·结果与分析 | 第34-39页 |
| ·总 RNA 提取及其反转录 | 第34-35页 |
| ·tri14 基因片段扩增及序列验证 | 第35-36页 |
| ·tri14 基因全长序列获取及其相关分析 | 第36-39页 |
| ·讨论 | 第39-40页 |
| 3 沉默 tri14 基因表达的 RNAi 载体构建及转化 | 第40-53页 |
| ·材料 | 第40-42页 |
| ·菌株及质粒 | 第40页 |
| ·培养基及主要试剂 | 第40-41页 |
| ·试剂盒、酶及耗材 | 第41页 |
| ·主要仪器 | 第41-42页 |
| ·方法 | 第42-47页 |
| ·干扰片段 Si-1、Si-2 克隆 | 第42-43页 |
| ·RNAi 载体构建 | 第43-45页 |
| ·农杆菌感受态制备 | 第45-46页 |
| ·RNAi 载体转化农杆菌 | 第46页 |
| ·农杆菌介导 RNAi 载体转化脐孢木霉菌 0248 | 第46-47页 |
| ·结果与分析 | 第47-51页 |
| ·干扰片段 Si-1、Si-2 克隆 | 第47-48页 |
| ·RNAi 载体构建 | 第48-49页 |
| ·RNAi 载体转化农杆菌 | 第49-50页 |
| ·农杆菌介导 RNAi 载体转化脐孢木霉菌 0248 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-53页 |
| 4 tri14 基因在脐孢木霉 0248 中的功能分析 | 第53-64页 |
| ·材料 | 第53-54页 |
| ·菌株及质粒 | 第53页 |
| ·培养基及主要试剂 | 第53页 |
| ·试剂盒、酶及耗材 | 第53页 |
| ·主要仪器 | 第53-54页 |
| ·方法 | 第54-55页 |
| ·各基因的荧光定量 PCR 标准曲线绘制 | 第54-55页 |
| ·转化株沉默效果分析、筛选及遗传稳定性分析 | 第55页 |
| ·野生株及转化株中基因表达量检测及木霉素含量检测 | 第55页 |
| ·结果与分析 | 第55-62页 |
| ·各基因的荧光定量 PCR 标准曲线绘制 | 第55-58页 |
| ·转化株沉默效果分析、筛选及遗传稳定性分析 | 第58-59页 |
| ·野生株及转化株中基因表达量检测及木霉素含量检测 | 第59-62页 |
| ·讨论 | 第62-64页 |
| 5 总结与展望 | 第64-66页 |
| ·全文总结 | 第64-65页 |
| ·课题展望 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-73页 |
| 作者简历 | 第73页 |
