| 论文创新点 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-16页 |
| 第一部分 药用真菌杨树菇非多糖抗肿瘤活性研究 | 第16-76页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-24页 |
| ·药用真菌抗肿瘤活性成分 | 第16-23页 |
| ·多糖 | 第16-19页 |
| ·蛋白质 | 第19-21页 |
| ·核酸成分 | 第21页 |
| ·低分子量化合物 | 第21-22页 |
| ·微量元素 | 第22-23页 |
| ·研究目的及意义 | 第23-24页 |
| 第二章 Yt纯化及组成成分的研究 | 第24-35页 |
| 摘要 | 第24页 |
| ·材料与方法 | 第24-27页 |
| ·样品制备 | 第24-25页 |
| ·高碘酸-schiff染色法检测糖含量 | 第25页 |
| ·苯酚硫酸法检测糖含量 | 第25页 |
| ·使用大孔吸附树脂分离Yt | 第25-26页 |
| ·双向电泳 | 第26页 |
| ·质谱测序 | 第26-27页 |
| ·实验结果 | 第27-32页 |
| ·Yt中的糖含量检测 | 第27-28页 |
| ·Yt蛋白成分分析 | 第28-29页 |
| ·Yt蛋白组分质谱测序及结果比对 | 第29-31页 |
| ·Yt分离成Yp,Ys | 第31-32页 |
| ·Ys小分子化合物检测 | 第32页 |
| ·讨论 | 第32-34页 |
| ·Yt的成分分析 | 第32-34页 |
| ·大孔吸附树脂的使用 | 第34页 |
| ·本章小结 | 第34-35页 |
| 第三章 Yt的抗肿瘤活性及初步毒理学研究 | 第35-53页 |
| 摘要 | 第35页 |
| ·材料与方法 | 第35-39页 |
| ·溶液配制 | 第35-36页 |
| ·Yt对细胞毒性的检测—苔盼蓝染色计数 | 第36页 |
| ·Yt对动物组织的影响 | 第36页 |
| ·Yt瘤内注射对荷H22的BALB/c小鼠的肿瘤抑制试验 | 第36-37页 |
| ·Yt瘤内注射对荷H22的BALB/c裸鼠的肿瘤抑制试验 | 第37页 |
| ·石蜡切块苏木精伊红(HE)染色 | 第37-38页 |
| ·瘤内注射Yt产生抗体检测 | 第38页 |
| ·生殖毒性检测 | 第38页 |
| ·口服Yt对小鼠的作用 | 第38-39页 |
| ·药用真菌非多糖组分的抗肿瘤活性 | 第39页 |
| ·实验结果 | 第39-50页 |
| ·Yt对肿瘤/正常细胞株,组织的作用 | 第39-41页 |
| ● 细胞株 | 第39-40页 |
| ● Yt对小鼠肿瘤组织和正常组织的毒性作用 | 第40-41页 |
| ·Yt对荷H22(肝癌)BALB/C小鼠模型的作用 | 第41-43页 |
| ·Yt的初步毒理学研究 | 第43-47页 |
| ● 荷瘤小鼠瘤内注射Yt产生抗体检测 | 第43页 |
| ● 瘤内注射Yt的毒性检测 | 第43-44页 |
| ● 雄性荷瘤小鼠生殖毒性 | 第44-45页 |
| ● 口服Yt的肝脏毒性 | 第45-47页 |
| ·Yt对荷H22(肝癌)BALB/c裸鼠的作用 | 第47-49页 |
| ·其他药用真菌中水溶性非多糖组分的抗肿瘤活性 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| ·非多糖水溶性组分是药用真菌中另一种重要的抗肿瘤活性组分 | 第50页 |
| ·Yt与多糖的比较 | 第50页 |
| ·给药途径 | 第50-51页 |
| ·混合组分活性高于单一组分 | 第51-52页 |
| ·本章小结 | 第52-53页 |
| 第四章 Yt免疫调节活性研究 | 第53-64页 |
| 摘要 | 第53页 |
| ·材料与方法 | 第53-57页 |
| ·小鼠淋巴细胞分离 | 第53页 |
| ·BrdU法检测Yt对小鼠淋巴细胞增殖的作用 | 第53-55页 |
| ·细胞介导的细胞毒性试验 | 第55-56页 |
| ·脾脏细胞因子mRNA表达水平检测 | 第56-57页 |
| ·小鼠血清细胞因子的表达水平检测 | 第57页 |
| ·实验结果 | 第57-62页 |
| ·Yt抗肿瘤效应的长时记忆作用 | 第57-58页 |
| ·Yt对小鼠脾脏淋巴细胞的增殖刺激作用 | 第58-59页 |
| ·瘤内注射Yt对荷瘤小鼠体内脾脏淋巴细胞活性的影响 | 第59-60页 |
| ·瘤内注射Yt对荷瘤小鼠脾脏细胞因子表达的影响 | 第60-62页 |
| ·瘤内注射Yt对荷瘤小鼠血清细胞因子蛋白表达水平的影响 | 第62页 |
| ·讨论 | 第62-63页 |
| ·Yt对脾脏淋巴细胞的刺激活性 | 第62-63页 |
| ·Yt与多糖免疫调节活性的比较 | 第63页 |
| ·本章小结 | 第63-64页 |
| 第五章 Y.p和Ys的抗肿瘤活性、初步毒理、免疫调节研究 | 第64-76页 |
| 摘要 | 第64页 |
| ·材料与方法 | 第64-67页 |
| ·瘤内注射Yp,Ys对荷H22的BALB/c小鼠肿瘤抑制试验 | 第64-65页 |
| ·Vp,Ys产生抗体检测 | 第65页 |
| ·蛋白酶K处理Yp瘤内注射对荷H22小鼠的肿瘤抑制试验 | 第65-66页 |
| ·脾脏细胞因子mRNA表达水平检测 | 第66页 |
| ·小鼠血清细胞因子的表达水平检测 | 第66-67页 |
| ·实验结果 | 第67-73页 |
| ·瘤内注射Yp,Ys对荷H22的BALB/c小鼠的肿瘤抑制试验 | 第67-68页 |
| ·瘤内注射Yp,Ys的毒性检测 | 第68-70页 |
| ●体重 | 第68页 |
| ●血液生化指标 | 第68-69页 |
| ●检测Yp,Ys治疗组小鼠相关抗体的产生 | 第69-70页 |
| ·Yp蛋白酶处理后的抗肿瘤活性 | 第70-71页 |
| ·瘤内注射Yp,Ys对荷瘤小鼠的免疫调节作用 | 第71-73页 |
| ●脾脏细胞因子的mRNA表达 | 第71-73页 |
| ●血清细胞因子的表达 | 第73页 |
| ·讨论 | 第73-74页 |
| ·Yp蛋白组分 | 第73-74页 |
| ·Yp与Ys的抗肿瘤活性比较 | 第74页 |
| ·Yp,Ys引起的免疫指标的变化 | 第74页 |
| ·本章小结 | 第74-76页 |
| 第二部分 全细胞肿瘤疫苗及Yt作为肿瘤疫苗佐剂的研究 | 第76-104页 |
| 第六章 文献综述 | 第76-83页 |
| ·肿瘤免疫治疗 | 第76-77页 |
| ·单克隆抗体 | 第76页 |
| ·T细胞 | 第76页 |
| ·肿瘤疫苗 | 第76-77页 |
| ·全细胞肿瘤疫苗 | 第77-82页 |
| ·瘤苗类型 | 第77-79页 |
| ·全细胞瘤苗的临床研究 | 第79-81页 |
| ·全细胞瘤苗的展望 | 第81-82页 |
| ·研究目的及意义 | 第82-83页 |
| 第七章 全细胞肿瘤疫苗及Yt作为肿瘤疫苗佐剂的研究 | 第83-104页 |
| 摘要 | 第83页 |
| ·材料与方法 | 第83-88页 |
| ·肿瘤细胞的处理 | 第83-84页 |
| ·小鼠免疫方式 | 第84页 |
| ·次数依赖性试验 | 第84页 |
| ·过继治疗 | 第84页 |
| ·尾静脉注射 | 第84页 |
| ·裸鼠试验 | 第84-85页 |
| ·CD4、CD8抗体制备 | 第85-86页 |
| ·CD4~+、CD8~+T细胞体内封闭试验 | 第86页 |
| ·巨噬细胞体内封闭试验 | 第86-87页 |
| ·分离腹腔巨噬细胞 | 第87页 |
| ·不同的酶或处理方式处理肿瘤细胞并免疫小鼠 | 第87-88页 |
| ·实验结果 | 第88-99页 |
| ·全细胞肿瘤疫苗的作用 | 第88-90页 |
| ●保护作用 | 第88-89页 |
| ●全细胞肿瘤疫苗的交叉保护 | 第89-90页 |
| ●长时效保护 | 第90页 |
| ·过继治疗实验 | 第90-92页 |
| ·全细胞肿瘤疫苗的机制研究 | 第92-99页 |
| ●在裸鼠模型上的作用 | 第92-93页 |
| ●单抗体内封闭小鼠CD4~+,CD8~+T细胞 | 第93-97页 |
| ●巨噬细胞体内封闭实验 | 第97-98页 |
| ●全细胞肿瘤疫苗的保护作用依赖于免疫频率 | 第98页 |
| ●对肿瘤细胞的不同处理影响肿瘤疫苗的保护作用 | 第98-99页 |
| ·讨论 | 第99-102页 |
| ·本研究的全细胞肿瘤疫苗与以往的肿瘤疫苗的不同 | 第99-100页 |
| ·Yt的佐剂作用 | 第100页 |
| ·这种全细胞肿瘤疫苗依赖于免疫系统的完整性 | 第100-101页 |
| ·疫苗处理方式对其保护作用的影响 | 第101页 |
| ·过继治疗 | 第101-102页 |
| ·本章小结与展望 | 第102-104页 |
| 第三部分 杨树菇活性蛋白组分AAL(Agrocybe aegerita lectin)诱导凋亡机制研究 | 第104-119页 |
| 第八章 AAL诱导凋亡机制研究 | 第104-119页 |
| 摘要 | 第104页 |
| ·材料与方法 | 第104-106页 |
| ·Annexin V/PI双染,流式细胞仪检测 | 第104-105页 |
| ·AAL截短体构建 | 第105页 |
| ·激光共聚焦实验 | 第105页 |
| ·MRG15 knock down实验 | 第105-106页 |
| ·实验结果 | 第106-110页 |
| ·AAL处理不同时间诱导细胞凋亡的活性 | 第106-107页 |
| ·AAL截短体在HeLa细胞中的定位 | 第107-108页 |
| ·AAL突变体诱导HeLa细胞的凋亡活性 | 第108-109页 |
| ·AAL对MRG15沉默的HeLa细胞诱导凋亡活性 | 第109-110页 |
| ·讨论 | 第110-111页 |
| ·凝集素的新的抗肿瘤机理 | 第110-111页 |
| ·AAL在HeLa细胞核中的配体MRG15 | 第111页 |
| ·本章小结 | 第111-119页 |
| 参考文献 | 第119-129页 |
| 攻博期间发表的科研成果 | 第129-130页 |
| 致谢 | 第130-131页 |
