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烟草早期胚胎发生的实验研究--由母本基因控制向合子基因控制的转换

摘要第1-9页
Abstract第9-12页
缩写符号第12-17页
1 前言第17-45页
   ·动物中母本基因到合子基因控制转换的相关研究第17-27页
     ·不同物种中母本基因向合子基因控制转换发生的时间不同第17-19页
     ·合子基因组转录沉默机制第19-21页
     ·哺乳动物的母本基因到合子基因控制转换——合子基因激活和相关母体因子作用第21-27页
   ·被子植物中母本基因向合子基因控制转换的相关研究第27-40页
     ·植物受精前后及早期胚胎发生过程中的基因表达研究第31-36页
     ·植物合子基因组激活相关研究第36-40页
   ·体外胚胎发生的实验系统第40-43页
     ·雄核发育第40页
     ·雌核发育第40-41页
     ·自然合子和人工合子培养第41-43页
   ·本论文的研究目的和意义第43-45页
2 烟草受精时间的确定与卵细胞受精后到第一次分裂前重要发育事态观察第45-56页
   ·摘要第45页
   ·引言第45-46页
   ·材料与方法第46-48页
     ·实验材料第46页
     ·去雄及人工授粉第46页
     ·刚受精胚囊的分离第46-47页
     ·合子的分离方法第47页
     ·单细胞压片第47页
     ·观察与摄影第47-48页
     ·数据分析第48页
   ·实验结果第48-53页
     ·受精时间的确定第48-49页
     ·烟草合子发育过程观察第49-53页
   ·讨论第53-56页
     ·受精后的卵细胞发生了显著变化第53-54页
     ·定向伸长的合子体现了原胚顶-基极性第54-56页
3 抑制剂浓度选择与抑制效果测试第56-67页
   ·摘要第56页
   ·引言第56-58页
   ·材料与方法第58-61页
     ·实验材料第58页
     ·去雄与人工授粉第58页
     ·烟草胚珠培养与抑制剂浓度的初步筛选第58页
     ·烟草叶肉原生质体培养与抑制剂浓度的精细筛选第58-59页
     ·烟草子房培养与合子的分离第59-60页
     ·少量细胞半定量RT-PCR第60页
     ·观察与摄影第60-61页
     ·数据分析第61页
   ·实验结果第61-65页
     ·抑制剂浓度筛选第61-64页
     ·抑制剂效果检测第64-65页
   ·讨论第65-67页
     ·合适浓度的抑制剂可保持细胞活性但抑制细胞发育第65页
     ·抑制剂有效抑制了合子发育过程中新转录本的出现第65-67页
4 抑制卵细胞新转录本的产生对受精及合子发育的影响第67-81页
   ·摘要第67页
   ·引言第67-69页
   ·材料与方法第69-71页
     ·实验材料第69页
     ·去雄与人工授粉第69页
     ·烟草子房培养与合子分离第69页
     ·烟草胚珠整体透明第69-70页
     ·细胞壁的观察第70页
     ·细胞核的观察第70页
     ·观察与摄影第70页
     ·数据分析第70-71页
   ·实验结果第71-76页
     ·对照系统的发育情况第71-73页
     ·转录抑制处理对合子发育的影响第73-74页
     ·抑制剂处理起始时间对合子发育的影响第74-76页
   ·讨论第76-81页
     ·子房培养系统能够确保胚胎发生模式与自然生长情况下一致第76-77页
     ·烟草母本信息可以支持卵细胞受精及其后的短时发育第77-78页
     ·烟草合子基因激活发生在一次分裂前第78-81页
5 抑制新转录本的产生对未伸长合子发育的影响第81-91页
   ·摘要第81页
   ·引言第81-82页
   ·材料与方法第82-85页
     ·实验材料第82-83页
     ·去雄与人工授粉第83页
     ·烟草早期合子分离和培养第83-84页
     ·烟草受精后子房培养第84页
     ·烟草胚珠整体透明第84-85页
     ·细胞核的观察第85页
     ·观察与摄影第85页
     ·数据分析第85页
   ·实验结果第85-89页
     ·培养基的优化与对照系统的发育情况第85-87页
     ·抑制新转录本的产生对未伸长合子发育的影响第87-89页
   ·讨论第89-91页
     ·烟草合子基因激活发生在一次分裂之前第89-90页
     ·新转录本对合子发育有重要作用第90-91页
6 抑制新转录本的产生对晚期合子与二胞原胚发育的影响第91-102页
   ·摘要第91页
   ·引言第91-92页
   ·材料与方法第92-95页
     ·实验材料第92页
     ·去雄与人工授粉第92-93页
     ·烟草晚期合子分离和培养第93页
     ·烟草受精后子房培养第93-94页
     ·烟草胚珠整体透明第94页
     ·细胞核的观察第94页
     ·观察与摄影第94页
     ·数据分析第94-95页
   ·实验结果第95-100页
     ·抑制剂处理使晚期合子一次分裂频率显著下降第95-97页
     ·抑制剂处理的不同时期的子房中胚胎发育停滞时期有所不同第97-100页
   ·讨论第100-102页
     ·合子基因激活后新转录本的表达是一个连续的过程第100-101页
     ·受精后到72HAP间很可能转录是不活跃的,96HAP后的转录活性是持续的第101-102页
7 烟草母本控制向合子基因控制转换过程中细胞学动态第102-116页
   ·摘要第102页
   ·引言第102-104页
   ·材料与方法第104-105页
     ·实验材料第104页
     ·去雄及人工授粉第104页
     ·合子的分离方法第104-105页
     ·单细胞压片第105页
     ·观察与摄影第105页
     ·数据分析第105页
   ·实验结果第105-114页
     ·常体内合子发育阶段的细胞学变化第105-107页
     ·72HAP前抑制剂处理导致合子无法进行某些重要发育过程第107-111页
     ·96HAP合子抑制剂处理后出现的细胞学现象第111-114页
   ·讨论第114-116页
     ·母本基因控制向合子基因控制转换是合子进入胚胎发生的必由之路第114-115页
     ·卵细胞受精后到第一次分裂前的发育过程可分为合子和单细胞胚两个阶段第115-116页
8 抑制剂对细胞活性的影响及恢复实验第116-123页
   ·摘要第116页
   ·引言第116-117页
   ·材料与方法第117-118页
     ·实验材料第117页
     ·去雄与人工授粉第117页
     ·烟草子房培养与恢复实验第117页
     ·恢复实验中胚囊的观察第117-118页
     ·囊泡运输的观察第118页
     ·观察与摄影第118页
     ·数据分析第118页
   ·实验结果第118-121页
     ·抑制剂处理合子的代谢活性第118-119页
     ·子房培养抑制剂处理恢复实验第119-121页
   ·讨论第121-123页
     ·转录抑制剂对合子发育的影响是由于抑制了新转录本的产生第121-122页
     ·转录抑制对合子发育的阻碍是不可恢复的第122-123页
9 总讨论第123-129页
   ·烟草合子基因组激活发生在一次分裂之前第123-124页
   ·母体转录本可以支持受精卵的一些早期发育过程但新转录本对合子进一步生长及分裂是必需的第124-125页
   ·合子基因激活后基因转录过程是连续的并且转录抑制效应不可恢复第125-126页
   ·烟草受精后至第一次分裂前的发育可分为两个阶段第126-129页
     ·第一个阶段——受精卵到合子第127页
     ·第二个阶段——合子到一细胞胚第127-129页
参考文献第129-148页
在读期间发表与投稿论文第148-149页
致谢第149页

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