| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-25页 |
| ·深海微生物资源简介 | 第13-14页 |
| ·硫酸酯酶 | 第14-16页 |
| ·芳香基硫酸酯酶 | 第14-15页 |
| ·芳香基硫酸酯酶应用 | 第15-16页 |
| ·海藻寡糖研究进展 | 第16-23页 |
| ·海藻 | 第16-17页 |
| ·龙须菜 | 第17-19页 |
| ·海洋寡糖 | 第19-20页 |
| ·海藻寡糖活性 | 第20-23页 |
| ·本论文的研究目的和意义 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-53页 |
| ·菌株、质粒与引物 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25-26页 |
| ·主要仪器设备 | 第26-28页 |
| ·培养基 | 第28-29页 |
| ·常用溶液 | 第29-31页 |
| ·主要分析软件 | 第31-32页 |
| ·基本方法 | 第32-38页 |
| ·细菌染色体DNA的提取 | 第32页 |
| ·DNA的沉淀 | 第32页 |
| ·化学转化感受态细胞的制备 | 第32-33页 |
| ·PCR反应 | 第33-34页 |
| ·连接反应 | 第34页 |
| ·质粒的化学转化 | 第34页 |
| ·菌落PCR | 第34-35页 |
| ·质粒提取 | 第35页 |
| ·限制性内切酶酶切反应 | 第35页 |
| ·从凝胶上回收DNA | 第35-36页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳 | 第36页 |
| ·龙须菜粗多糖的提取 | 第36-37页 |
| ·氯化钡-明胶法测定游离硫酸根离子的浓度 | 第37-38页 |
| ·芳香基硫酸酯酶基因Ary423的克隆表达与纯化 | 第38-40页 |
| ·Flammeovirgapacifica全基因组序列分析及琼胶酶基因的分析比 | 第38页 |
| ·Ary423基因的PCR扩增和pET-Ary423质粒的构建 | 第38-39页 |
| ·重组表达载体pET-His–Ary423的构建 | 第39页 |
| ·芳香基硫酸酯酶基因Ary423的诱导表达 | 第39页 |
| ·芳香基硫酸酯酶蛋白的纯化 | 第39-40页 |
| ·重组芳香基硫酸酯酶Ary423酶学性质分析方法 | 第40-43页 |
| ·pNP标准曲线的制作 | 第40-41页 |
| ·芳香基硫酸酯酶的活力 | 第41-42页 |
| ·温度对酶活性的影响 | 第42页 |
| ·酶的温度稳定性测定 | 第42页 |
| ·pH对酶活性的影响 | 第42页 |
| ·金属离子及螯合剂对酶活力的影响 | 第42页 |
| ·变性剂对酶活力的影响 | 第42-43页 |
| ·寡糖的后处理方法 | 第43-48页 |
| ·寡糖的喷雾干燥制备 | 第43页 |
| ·寡糖的冷冻干燥制备 | 第43页 |
| ·寡糖含量测定 | 第43-44页 |
| ·硫酸-苯酚法测定总糖含量 | 第44-45页 |
| ·BCA法测定蛋白质含量 | 第45-46页 |
| ·正交试验优化寡糖发酵液的活性炭脱色 | 第46-47页 |
| ·离子色谱检测寡糖成分 | 第47-48页 |
| ·寡糖活性分析方法 | 第48-53页 |
| ·寡糖的抗氧化活性 | 第48-50页 |
| ·寡糖的抑菌活性 | 第50页 |
| ·寡糖的草莓保鲜活性 | 第50-52页 |
| ·寡糖对小叶浮萍的促生长活性 | 第52-53页 |
| 3 结果与分析 | 第53-76页 |
| ·芳香基硫酸酯酶基因Ary423克隆表达纯化与性质研究 | 第53-59页 |
| ·Flammeovirgapacifica的全基因组序列分析及其芳香基硫酸酯酶基因的查找 | 第53-54页 |
| ·芳香基硫酸酯酶基因Ary423的序列比对与分析 | 第54-55页 |
| ·芳香基硫酸酯酶基因Ary423克隆、表达及纯化 | 第55-56页 |
| ·重组酶Ary423的酶学性质分析 | 第56-59页 |
| ·重组酶对去除琼脂的硫酸基团的活性 | 第59页 |
| ·后处理对寡糖成分的影响 | 第59-64页 |
| ·正交试验优化寡糖发酵液的活性炭脱色 | 第59-63页 |
| ·离子色谱检测寡糖成分 | 第63-64页 |
| ·寡糖的活性 | 第64-76页 |
| ·寡糖的抗氧化活性 | 第64-67页 |
| ·寡糖的抑菌活性 | 第67-69页 |
| ·寡糖对草莓的保鲜活性 | 第69-73页 |
| ·寡糖对小浮萍生长的促进作用 | 第73-76页 |
| 4 讨论与总结 | 第76-79页 |
| ·寡糖质量检测方法的建立及其干燥方法的效果 | 第76页 |
| ·寡糖的活性研究 | 第76-78页 |
| ·硫酸酯酶的研究 | 第78-79页 |
| 5 展望 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
