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水蕨centrin基因的克隆表达与分析

摘要第1-8页
Abstract第8-12页
第一章 前言第12-34页
   ·中心体蛋白第12-29页
     ·引言第12页
     ·EF-hand 结构蛋白的性质第12-18页
     ·中心蛋白的结构第18-19页
     ·中心蛋白的作用机制第19-21页
     ·中心体蛋白的功能第21-29页
   ·蕨类概述第29-33页
     ·蕨类植物的分类地位与分布第29页
     ·蕨类植物精子发生第29-30页
     ·蕨类植物分子生物学研究进展第30-31页
     ·水蕨第31-33页
   ·本研究的目的和意义第33-34页
第二章 材料与方法第34-54页
   ·材料第34-37页
     ·本实验中的实验材料水蕨第34页
     ·本实验中的用到的质粒第34页
     ·本实验中用到的菌株第34-35页
     ·本实验中重新构建的质粒第35页
     ·本实验中用到的试剂第35-36页
     ·本实验中用到的仪器设备第36-37页
   ·方法第37-54页
     ·水蕨的配子体的培养第37-38页
     ·水蕨配子体总 RNA 的提取第38-39页
     ·cDNA 全长的获得第39-42页
     ·RACE 获得 centrin 基因全长第42-51页
     ·诱导蛋白表达和鉴定第51-54页
第三章 结果与分析第54-64页
   ·水蕨的培养第54页
   ·水蕨配子体总 RNA 的提取第54-55页
   ·水蕨 centrin 核心片段全长的获得第55-56页
     ·PCR 扩增水蕨 centrin 的核心片段第55-56页
     ·pEASY-T5-zero-centrin 载体的构建和同源性分析第56页
   ·RACE 获得水蕨 centrin 基因的全长第56-58页
     ·PCR 扩增 centrin 基因的 5’端第56-57页
     ·PCR 扩增 centrin 3’端第57-58页
     ·Centrin 基因全长的获得第58页
   ·pET32a-centrin 载体的构建第58-59页
   ·生物信息学分析第59-62页
     ·水蕨 centrin 序列结果与分析第59-61页
     ·水蕨 centrin 基因的结构域分析第61页
     ·水蕨 centrin 基因序列与其它物种 centrin 基因的多序列比对第61-62页
   ·pET-32a-centrin 质粒在大肠杆菌中的表达及纯化第62-63页
   ·pET-32a-Centrin 表达蛋白的 western blot 分析第63页
   ·Centrin 基因的编码蛋白的结构预测第63-64页
第四章 讨论第64-68页
   ·水蕨 centrin 基因的功能第64页
   ·Centrin 基因的进化第64-66页
   ·蛋白诱导与表达第66-68页
参考文献第68-76页
致谢第76-77页

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