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N-糖酰胺酶F的表达纯化鉴定及Na~+偶联的中性氨基酸转运蛋白SNAT1的多克隆抗体制备

附件第1-4页
摘要第4-6页
Abstract第6-10页
中英文缩略词对照表第10-11页
第一章 综述第11-24页
 1 N-糖酰胺酶 F第11-13页
   ·N-糖酰胺酶 F 研究现状第11-12页
   ·N-糖酰胺酶 F 结构与功能的研究第12页
   ·N-糖酰胺酶 F 的催化机制第12-13页
 2 糖生物学研究第13-17页
   ·糖蛋白与糖基化第13-16页
   ·寡糖链对糖蛋白的影响第16-17页
 3 Na~+偶联的中性氨基酸转运蛋白第17-21页
   ·SLC38 家族简介第17页
   ·Na~+偶联的中性氨基酸转运蛋白研究进展第17-21页
 4 抗体的研究进展第21-24页
   ·多克隆抗体制备方法的研究进展第21-22页
   ·抗体的分离纯化技术研究进展第22-24页
第二章 N-糖酰胺酶 F(PNGase F)在大肠杆菌中的可溶性表达及纯化第24-36页
 0 前言第24-25页
 1 材料与方法第25-31页
   ·材料第25-27页
   ·方法第27-31页
 2 结果第31-34页
   ·pET28a-PNGase F 重组质粒的构建第31-32页
   ·pET28a-PNGase F 重组质粒的鉴定第32页
   ·N-糖酰胺酶 F 诱导表达条件的探索第32-33页
   ·N-糖酰胺酶 F 的大量表达与纯化第33-34页
 3 讨论第34-36页
第三章 N-糖酰胺酶 F 的脱糖基化作用鉴定第36-49页
 0 前言第36-37页
 1 材料与方法第37-41页
   ·材料第37-38页
   ·方法第38-41页
 2 结果第41-47页
   ·pBK-CMVΔ-SNAT3-HA 重组质粒的构建第41-43页
   ·pBK-CMV -SNAT3-HA 重组质粒的鉴定第43页
   ·Western blot 检测 SNAT3-HA 融合蛋白的表达结果第43-44页
   ·N-糖酰胺酶 F 的脱糖基化作用第44-47页
 3 讨论第47-49页
第四章 SNAT1 糖基化位点研究第49-56页
 0 前言第49-50页
 1 材料与方法第50-53页
   ·材料第50-51页
   ·研究方法第51-53页
 2 结果第53-54页
   ·定点突变结果第53页
   ·Western-blot 验证糖基化位点结果第53-54页
 3 讨论第54-56页
第五章 钠离子依赖的中性氨基酸转运蛋白 1(SNAT1)多克隆抗体的制备第56-69页
 0 前言第56页
 1 材料与方法第56-62页
   ·材料第56-57页
   ·方法第57-62页
 2 结果第62-67页
   ·pET28a-SNAT1-75aa 重组质粒的构建第62-63页
   ·pET28a-SNAT1-75aa 重组质粒的鉴定第63-64页
   ·SNAT 1-75aa 蛋白的预表达测试第64-65页
   ·SNAT 1-75aa 蛋白的大量表达与纯化第65-66页
   ·Western blot 检测 SNAT1 抗体的效果第66-67页
 3 讨论第67-69页
致谢第69-70页
参考文献第70-78页
附录 攻读硕士学位期间发表的学术论文第78页

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