| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-10页 |
| 引言 | 第10-16页 |
| 一、研究背景 | 第10-15页 |
| （一） 骨的发育 | 第10-11页 |
| （二） 影响骨发育的重要转录因子Runx2 | 第11-13页 |
| （三） HDACs 在骨发育中的作用 | 第13-14页 |
| （四） 骨发育中骨桥蛋白（OPN）的表达调控 | 第14-15页 |
| 二、研究内容与意义 | 第15-16页 |
| 材料与方法 | 第16-25页 |
| 一、实验材料 | 第16-20页 |
| （一） 细胞及培养试剂 | 第16页 |
| （二） 质粒 | 第16页 |
| （三） 抗体 | 第16-17页 |
| （四） 试剂 | 第17页 |
| （五） 引物 | 第17-18页 |
| （六） 仪器设备 | 第18页 |
| （七） 部分试剂的配制方法 | 第18-20页 |
| 二、实验方法 | 第20-25页 |
| （一） 细胞培养 | 第20-21页 |
| （二） 蛋白质的提取和制备 | 第21页 |
| （三） Western Blot | 第21页 |
| （四） 免疫荧光 | 第21-22页 |
| （五） ALP 染色 | 第22页 |
| （六） RT-PCR | 第22-23页 |
| （七） 质粒小量制备 | 第23页 |
| （八） pREP4-pOPN-Luc 构建质粒 | 第23页 |
| （九） 瞬时转染 | 第23页 |
| （十） 双报告 | 第23-24页 |
| （十一） 免疫沉淀（IP） | 第24页 |
| （十二） 染色质免疫共沉淀技术（CHIP） | 第24-25页 |
| 结果与分析 | 第25-32页 |
| 一、HDACS与HATS 对RUNX2 上调OPN 启动子活性的影响 | 第25-26页 |
| 二、HDAC1 和HDAC3 能抑制RUNX2 转录激活活性 | 第26-27页 |
| 三、HDAC1 抑制RUNX2 调控的OPN 启动子活性不依赖染色质结构 | 第27-28页 |
| 四、RUNX2 和HDAC1 共定位，并且同时占据在OPN 启动子上 | 第28-29页 |
| 五、HDAC1 抑制RUNX2 活性改变OPNMRNA 水平 | 第29-30页 |
| 六、在成骨细胞分化过程中HDAC1 的蛋白水平略有下降 | 第30-32页 |
| 讨论 | 第32-34页 |
| 一、HDAC1 特异性抑制RUNX2 介导的OPN 转录活性 | 第32-33页 |
| 二、HDAC1 与 Runx2 结合在 OPN 启动子上，HDAC1 在成骨细胞分化过 程中蛋白水平的表达略有下降 | 第33-34页 |
| 结论 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-39页 |
| 致谢 | 第39页 |
