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玉米籽粒萌发期杂种优势相关miRNA的研究

致谢第1-9页
摘要第9-10页
1.文献综述第10-23页
   ·杂种优势第10-14页
     ·玉米杂种优势研究的重要性第10页
     ·杂种优势的概念第10-11页
     ·杂种优势的遗传机制第11-13页
       ·显性假说第11页
       ·超显性假说第11-12页
       ·上位性假说第12页
       ·基因差异表达调控与杂种优势第12-13页
     ·玉米杂种优势的研究第13-14页
   ·microRNA 的研究概况第14-18页
     ·microRNA 的概念第14页
     ·microRNA 的发现第14页
     ·microRNA 的生物学特征第14-16页
       ·植物 miRNA 与动物 miRNA 的共同特征第14-15页
         ·植物 miRNA 与动物 miRNA 的区别第15-16页
     ·microRNA 的生物合成过程第16-17页
     ·microRNA 介导的转录调控机制第17页
     ·microRNA 在植物发育过程中的研究第17-18页
   ·植物 microRNA 的研究方法第18-23页
     ·miRNA 文库的构建、克隆和测序第18页
     ·miRNA 芯片技术寻找相关的 miRNA第18-19页
     ·生物信息学在植物 miRNA 研究中的应用第19-20页
     ·高通量测序第20页
     ·荧光定量 PCR 检测 miRNA第20-22页
       ·实时荧光定量 PCR 检测 miRNA 引物扩增方法第21-22页
       ·实时荧光定量的数据分析方法第22页
     ·其他 miRNA 检测方法第22-23页
   ·玉米 microRNA 的研究第23页
2.引言第23-24页
3.材料与方法第24-35页
   ·试验材料第24-26页
     ·供试玉米材料第24页
       ·主要仪器设备及耗材第24-25页
     ·生化试剂及分子生物学试剂第25页
     ·常用溶液的配制第25页
     ·使用的数据库和软件第25-26页
   ·实验方法第26-27页
     ·玉米种子的处理第26页
     ·组织样品的取样第26页
     ·实验材料总 RNA 的提取第26-27页
       ·实验用品的前处理第26页
       ·实验样品总 RNA 的提取第26-27页
       ·RNA 质量检测第27页
       ·注意事项第27页
   ·miRNA 和 miRNA 候选靶基因的差异表达分析第27-35页
     ·Solexa 测序第27-29页
       ·处理材料 Solexa 测序第27页
       ·Solexa 测序原理及流程(图 3-1)第27-28页
       ·Solexa 测序序列分析第28-29页
     ·miRNA 引物第29-31页
     ·miRNA 靶基因的预测第31页
     ·RNA 纯化与反转录第31-32页
     ·cNDA 第一链的合成第32-33页
     ·引物特异性鉴定第33-34页
     ·实时定量 PCR 对 miRNA 和其候选靶基因进行相对定量分析第34-35页
4. 结果与分析第35-53页
   ·玉米籽粒萌发期胚总 RNA 的质量检测第35-36页
   ·玉米籽粒萌发期的已知 miRNAs第36-40页
     ·玉米杂交种和其亲本中检测到的已知的 miRNAs第36-39页
     ·玉米籽粒萌发期与杂种优势相关 miRNA 的分类第39-40页
   ·玉米籽粒萌发期新发现的 miRNAs第40-45页
   ·玉米籽粒萌期 miRNA 靶基因的预测与功能注释第45-48页
     ·保守 miRNA 靶基因的预测与功能注释第45-47页
     ·新 miRNA 的靶基因预测与功能注释第47-48页
   ·玉米籽粒萌发期 miRNA 和其靶基因的差异表达第48-53页
     ·差异 miRNA 的筛选分析第48页
     ·miRNA 茎环法反转录质量检测第48-49页
     ·qRT-PCR 检测第49-50页
     ·RT-PCR 检测保守 miRNA 和其靶基因的表达量第50-52页
     ·RT-PCR 检测新 miRNA 的表达量第52-53页
5. 结论与讨论第53-60页
   ·结论第53-54页
   ·讨论第54-60页
     ·高通量测序技术的可行性第54页
     ·玉米籽粒萌发期 miRNA 的分析第54-55页
     ·玉米杂种优势的遗传基础第55页
     ·玉米杂种优势相关 miRNA 的差异表达第55页
     ·miRNA 靶基因预测及表达分析第55-56页
     ·玉米籽粒萌发期有关杂种优势可能的调控机制第56-58页
     ·进一步研究方向第58-60页
参考文献第60-69页
ABSTRACT第69-71页
附表第71-96页

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