| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-19页 |
| ·干扰素 | 第11-13页 |
| ·概述 | 第11页 |
| ·干扰素的生物学功能 | 第11-13页 |
| ·鸡 IFN-γ的研究进展 | 第13-15页 |
| ·鸡 IFN-γ的理化性质及来源 | 第13页 |
| ·鸡 IFN-γ的基因结构 | 第13页 |
| ·鸡 IFN-γ的功能 | 第13-14页 |
| ·鸡 IFN-γ基因的研究进展 | 第14-15页 |
| ·基因工程 IFN 的研究进展 | 第15-18页 |
| ·关于干扰素基因序列的改造 | 第15-16页 |
| ·关于干扰素基因表达产物提取方法的研究 | 第16页 |
| ·关于原核表达条件的筛选 | 第16页 |
| ·关于原核表达产物制备方法的研究 | 第16-17页 |
| ·关于规模生产工艺的研究 | 第17-18页 |
| ·目的与意义 | 第18-19页 |
| 第2章 卢氏鸡 IFN-γ成熟蛋白基因的克隆、鉴定及表达 | 第19-37页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·菌株、载体、鸡胚及疫苗 | 第19页 |
| ·试验试剂、酶、仪器和实验动物 | 第19页 |
| ·试验相关试剂的配制 | 第19-20页 |
| ·主要的仪器设备 | 第20页 |
| ·试验方法 | 第20-29页 |
| ·引物设计 | 第20页 |
| ·大肠杆菌 BL21、JM109 感受态的制备（CaCl2法） | 第20-21页 |
| ·卢氏鸡 IFN-γ基因的诱导转录 | 第21页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第21页 |
| ·RT-PCR 及 PCR | 第21-23页 |
| ·PCR 产物的回收与纯化 | 第23页 |
| ·IFN-γ全基因与 pMD18-T 载体连接、转化 | 第23-24页 |
| ·质粒的提取 | 第24页 |
| ·重组质粒（pMD18T-IFN-γ）的 PCR 鉴定 | 第24-25页 |
| ·PCR 产物与 PET28a 载体的酶切及其产物的回收 | 第25-26页 |
| ·PCR 产物与 PET28a 载体的连接与转化 | 第26页 |
| ·重组质粒（PET28a-IFN-γ）的 PCR 鉴定及酶切鉴定 | 第26-27页 |
| ·重组质粒的测序 | 第27-28页 |
| ·IFN-γ成熟蛋白的诱导表达 | 第28页 |
| ·同源性分析 | 第28-29页 |
| ·结果与分析 | 第29-36页 |
| ·RT-PCR 扩增结果 | 第29页 |
| ·重组 pMD18T-IFN-γ质粒的鉴定 | 第29-30页 |
| ·卢氏鸡 IFN-γ去信号肽序列的 PCR 扩增结果 | 第30-31页 |
| ·重组质粒(PET28a-IFN-γ)的 PCR 及酶切鉴定结果 | 第31-33页 |
| ·测序结果与分析 | 第33页 |
| ·SDS-PAGE 电泳鉴定结果 | 第33-34页 |
| ·卢氏鸡 IFN-γ基因与其他禽类核苷酸序列的比较 | 第34-35页 |
| ·IFN-γ基因遗传进化分析 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| 第3章 鸡 IFN-γ重组蛋白不同提取方法的研究 | 第37-57页 |
| ·材料 | 第37-38页 |
| ·试验所用的主要试剂 | 第37页 |
| ·相关试剂的配制 | 第37页 |
| ·主要仪器 | 第37-38页 |
| ·试验动物 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-41页 |
| ·鸡 IFN-γ重组蛋白的四种不同提取方法 | 第38-39页 |
| ·四种提取方法获得的重组蛋白含量的测定 | 第39页 |
| ·四种提取方法获得的重组蛋白热原质、内毒素的测定 | 第39-41页 |
| ·四种提取方法获得的重组蛋白对免疫器官指数的影响 | 第41页 |
| ·四种提取方法获得的重组蛋白对 NDVⅣ系弱毒苗免疫后抗体水平的测定 | 第41页 |
| ·结果与分析 | 第41-53页 |
| ·四种提取方法提取的蛋白含量的测定结果 | 第41-42页 |
| ·四种提取方法获得的重组蛋白热原质、内毒素的测定结果 | 第42-43页 |
| ·四种提取方法获得的重组蛋白对家禽生长和免疫器官指数的影响 | 第43-50页 |
| ·四种提取方法获得的重组蛋白对 NDVⅣ系弱毒苗免疫后抗体水平测定结果 | 第50-52页 |
| ·四种提取方法在工业化生产中的可操作性 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| ·展望 | 第55-57页 |
| 第4章 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 | 第63页 |
