水貂肠炎病毒灭活苗的研究及VP2基因片段原核表达
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-13页 |
| 1 绪论 | 第13-23页 |
| ·水貂肠炎病毒研究进展 | 第13-17页 |
| ·肉食兽细小病毒简介 | 第13-14页 |
| ·水貂肠炎病毒形态及理化特性 | 第14-15页 |
| ·水貂肠炎病毒的分子生物学特征 | 第15-16页 |
| ·水貂肠炎病毒编码的蛋白 | 第16-17页 |
| ·水貂病毒性肠炎研究进展 | 第17-22页 |
| ·水貂病毒性肠炎流行病学 | 第17-18页 |
| ·水貂病毒性肠炎临床症状 | 第18页 |
| ·水貂病毒性肠炎的病理变化 | 第18-19页 |
| ·水貂病毒性肠炎的诊断方法 | 第19-20页 |
| ·水貂病毒性肠炎的防治 | 第20-22页 |
| ·研究目的及意义 | 第22-23页 |
| 2 水貂肠炎病毒灭活疫苗免疫研究 | 第23-30页 |
| ·实验材料 | 第23-25页 |
| ·病毒株及细胞株 | 第23页 |
| ·试验动物 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23-24页 |
| ·主要试剂配制 | 第24-25页 |
| ·方法 | 第25-26页 |
| ·病毒的培养 | 第25页 |
| ·灭活疫苗的制备 | 第25页 |
| ·水貂的免疫接种 | 第25页 |
| ·免疫后血清抗体检测 | 第25-26页 |
| ·结果 | 第26-27页 |
| ·病毒培养 | 第26页 |
| ·铝胶灭活疫苗的制备 | 第26页 |
| ·铝胶灭活疫苗免疫接种效价 | 第26-27页 |
| ·讨论 | 第27-29页 |
| ·病毒株的选择 | 第27-28页 |
| ·MEV细胞培养 | 第28页 |
| ·制备的MEV铝胶灭活疫苗免疫效果 | 第28页 |
| ·MEV疫苗的发展 | 第28-29页 |
| ·水貂疫苗免疫失败原因分析 | 第29页 |
| ·本章小结 | 第29-30页 |
| 3 水貂肠炎病毒VP2部分基因的原核表达及鉴定 | 第30-45页 |
| ·实验材料 | 第30-33页 |
| ·菌株与血清 | 第30页 |
| ·主要试剂 | 第30-31页 |
| ·主要溶液配制 | 第31-33页 |
| ·主要仪器 | 第33页 |
| ·方法 | 第33-39页 |
| ·引物设计 | 第33-34页 |
| ·VP2目的片段的扩增及纯化 | 第34-35页 |
| ·VP2目的片段的克隆及测序 | 第35-36页 |
| ·重组质粒PET32a-VP2的构建 | 第36-37页 |
| ·重组质粒的原核表达 | 第37-38页 |
| ·溶性分析 | 第38页 |
| ·包涵体的洗涤,溶解,纯化 | 第38页 |
| ·重组蛋白的Western-blotting鉴定 | 第38-39页 |
| ·结果 | 第39-42页 |
| ·PCR扩增结果 | 第39页 |
| ·重组表达质粒酶切鉴定 | 第39-40页 |
| ·表达条件的优化结果 | 第40-41页 |
| ·表达方式结果 | 第41页 |
| ·纯化结果 | 第41页 |
| ·Western-blotting结果 | 第41-42页 |
| ·重组蛋白特性分析 | 第42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| ·用于表达的VP2基因的选择 | 第42-43页 |
| ·原核表达系统的选择 | 第43页 |
| ·原核表达系统条件优化 | 第43-44页 |
| ·表达重组蛋白的纯化 | 第44页 |
| ·本章小结 | 第44-45页 |
| 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-54页 |
| 附录 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
