| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-18页 |
| 第1章 绪论 | 第18-35页 |
| ·课题背景及研究目的和意义 | 第18-19页 |
| ·TGase 交联蛋白作用机理 | 第19页 |
| ·提高微生物 TGase 产量研究进展 | 第19-23页 |
| ·生产 TGase 菌株鉴定的研究进展 | 第19-20页 |
| ·链霉菌发酵生产 TGase 产量的研究进展 | 第20-21页 |
| ·链霉菌 TGase 激活过程 | 第21-23页 |
| ·TGase 生理作用 | 第23-25页 |
| ·TGase 在真核生物体内的生理作用 | 第23-24页 |
| ·TGase 在微生物分化过程中的作用 | 第24-25页 |
| ·链霉菌蛋白质组学研究进展 | 第25-30页 |
| ·链霉菌生长过程中蛋白质组学研究 | 第26-28页 |
| ·营养因素对链霉菌蛋白质组学影响 | 第28-29页 |
| ·非营养胁迫下蛋白质组学研究 | 第29-30页 |
| ·TGase 的应用 | 第30-34页 |
| ·TGase 在食品工业中的应用 | 第30-32页 |
| ·TGase 在非食品工业中的应用 | 第32-34页 |
| ·课题来源及研究内容 | 第34-35页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第35-54页 |
| ·实验材料 | 第35-38页 |
| ·主要仪器与设备 | 第35-36页 |
| ·主要试剂 | 第36-37页 |
| ·菌种 | 第37-38页 |
| ·培养基 | 第38页 |
| ·发酵液的制备 | 第38页 |
| ·测定方法 | 第38-47页 |
| ·TGase 酶活的测定 | 第38-39页 |
| ·菌体细胞生长量(DCW)测定 | 第39页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第39-40页 |
| ·SDS-PAGE 电泳 | 第40页 |
| ·Western-Blot 分析 | 第40页 |
| ·蛋白酶活力测定 | 第40-41页 |
| ·无细胞上清液的制备 | 第41页 |
| ·激光共聚焦显微镜观察链霉菌菌体生存活力变化 | 第41页 |
| ·扫描电镜观察链霉菌形态学变化 | 第41-42页 |
| ·凝胶电泳 DNA 片段分析 | 第42页 |
| ·全细胞蛋白样品的制备 | 第42-43页 |
| ·双向电泳 | 第43-44页 |
| ·2D 凝胶的染色 | 第44页 |
| ·2D 图谱分析 | 第44-45页 |
| ·MALDI-TOF/TOF MS 和数据分析 | 第45页 |
| ·纯化后 TGase 质谱鉴定 | 第45-46页 |
| ·乳成分分析 | 第46页 |
| ·酸奶参数测定 | 第46-47页 |
| ·实验方法 | 第47-53页 |
| ·茂原链霉菌生长和 TGase 动力学曲线的测定 | 第47页 |
| ·应激条件对 TGase 产量的影响 | 第47-48页 |
| ·MgCl_2胁迫对 TGase 和蛋白酶产量的影响 | 第48-49页 |
| ·MgCl_2胁迫诱导链霉菌菌体程序性死亡的研究 | 第49页 |
| ·MgCl_2胁迫对链霉菌菌体蛋白表达的影响 | 第49-50页 |
| ·TGase 的分离纯化与质谱鉴定 | 第50-51页 |
| ·TGase 酶学性质研究 | 第51-52页 |
| ·TGase 在酸奶中的应用研究 | 第52-53页 |
| ·数据处理与统计分析 | 第53-54页 |
| 第3章 应激条件对茂原链霉菌 TGase 合成的影响 | 第54-70页 |
| ·引言 | 第54页 |
| ·TGase 活力的测定 | 第54-55页 |
| ·L-谷氨酸-γ-单羟肟酸标准曲线的绘制 | 第54-55页 |
| ·酶活力计算 | 第55页 |
| ·发酵过程中 TGase 活力变化和菌体生长周期 | 第55-57页 |
| ·加热处理对茂原链霉菌 TGase 合成的影响 | 第57-58页 |
| ·醇胁迫对茂原链霉菌 TGase 合成的影响 | 第58-61页 |
| ·醇种类对 TGase 产量的影响 | 第58-60页 |
| ·甲醇浓度和添加时间对 TGase 产量的影响 | 第60-61页 |
| ·NaCl 胁迫对茂原链霉菌 TGase 合成的影响 | 第61-63页 |
| ·NaCl 浓度对 TGase 产量的影响 | 第61-62页 |
| ·NaCl 添加时间对 TGase 产量的影响 | 第62-63页 |
| ·过氧化物胁迫对 TGase 产量的影响 | 第63页 |
| ·应激交互作用对 TGase 产量的影响 | 第63-67页 |
| ·实验设计 | 第63-64页 |
| ·回归模型的建立及结果分析 | 第64-67页 |
| ·应激条件提高 TGase 产量的讨论 | 第67-69页 |
| ·本章小结 | 第69-70页 |
| 第4章 MgCl_2胁迫对茂原链霉菌 TGase 合成的发酵动力学影响及关键酶确定 | 第70-83页 |
| ·引言 | 第70-71页 |
| ·盐种类对 TGase 产量的影响 | 第71-72页 |
| ·MgCl_2浓度对 TGase 产量的影响 | 第72-74页 |
| ·MgCl_2胁迫对 S. mobaraensis 发酵周期的影响 | 第74-75页 |
| ·MgCl_2胁迫对蛋白酶发酵动力学的研究 | 第75-77页 |
| ·MgCl_2胁迫对 TGase 和蛋白酶活力的影响 | 第77-78页 |
| ·提高 TGase 产量关键酶的确定 | 第78-80页 |
| ·MgCl_2胁迫提高 TGase 产量的讨论 | 第80-82页 |
| ·本章小结 | 第82-83页 |
| 第5章 MgCl_2胁迫促进茂原链霉菌程序性死亡和菌体蛋白质组学初步研究 | 第83-102页 |
| ·引言 | 第83-84页 |
| ·激光共聚焦显微镜观察 MgCl_2胁迫对菌体生存活力的影响 | 第84-86页 |
| ·扫描电镜观察 MgCl_2胁迫对菌体形态变化的影响 | 第86-88页 |
| ·MgCl_2胁迫对 DNA 断裂的影响 | 第88页 |
| ·MgCl_2胁迫促进茂原链霉菌程序性死亡的讨论 | 第88-89页 |
| ·超声破碎条件对 S. mobaraensis 菌体蛋白提取的影响 | 第89-90页 |
| ·蛋白前处理方式对双向电泳图谱效果的影响 | 第90-92页 |
| ·MgCl_2胁迫对发酵 24 h 菌体蛋白质表达变化影响 | 第92-101页 |
| ·蛋白质双向电泳表达图谱及功能性分析 | 第92-98页 |
| ·差异蛋白质组讨论 | 第98-101页 |
| ·本章小结 | 第101-102页 |
| 第6章 MgCl_2胁迫下茂原链霉菌合成 TGase 性质研究 | 第102-126页 |
| ·引言 | 第102页 |
| ·TGase 分离纯化研究 | 第102-108页 |
| ·发酵液中 TGase 浓缩方法 | 第102-103页 |
| ·凝胶层析 | 第103-104页 |
| ·离子交换层析 | 第104-106页 |
| ·各纯化步骤中 TGase 纯化倍数及纯度鉴定 | 第106-108页 |
| ·纯化 TGase 质谱鉴定 | 第108-109页 |
| ·TGase 酶学性质研究 | 第109-114页 |
| ·酶动力学参数测定 | 第109页 |
| ·最适反应温度 | 第109-110页 |
| ·温度稳定范围 | 第110页 |
| ·TGase 热变性温度 | 第110-111页 |
| ·最适反应 pH | 第111-112页 |
| ·pH 稳定范围 | 第112页 |
| ·金属离子对 TGase 活力的影响 | 第112-114页 |
| ·TGase 对酸奶质地的影响 | 第114-125页 |
| ·脂肪对 TGase 交联酸奶质地的影响 | 第114-120页 |
| ·TGase 对牦牛酸奶质地的影响 | 第120-125页 |
| ·本章小结 | 第125-126页 |
| 结论 | 第126-127页 |
| 创新点 | 第127页 |
| 展望 | 第127-128页 |
| 参考文献 | 第128-148页 |
| 附录 | 第148-150页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第150-153页 |
| 致谢 | 第153-154页 |
| 个人简历 | 第154页 |
