林烟草钾离子通道基因NKT6的克隆与功能分析
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-19页 |
| ·植物Shaker家族钾离子通道概述 | 第11-12页 |
| ·植物Shaker家族钾离子通道的分类 | 第11-12页 |
| ·Shaker家族的组织定位 | 第12页 |
| ·Shaker家族的调控机制 | 第12-13页 |
| ·磷酸化/去磷酸化调控 | 第12-13页 |
| ·异聚化调控 | 第13页 |
| ·蛋白调控 | 第13页 |
| ·Shaker家族钾离子通道研究的关键技术 | 第13-15页 |
| ·反向遗传学技术 | 第13-14页 |
| ·电生理学技术 | 第14页 |
| ·蛋白质研究技术 | 第14-15页 |
| ·展望 | 第15-18页 |
| ·本研究的目的意义 | 第18-19页 |
| 第二章 NKT6的克隆与生物信息学分析 | 第19-35页 |
| ·材料与试剂 | 第19页 |
| ·方法 | 第19-28页 |
| ·RNA提取前准备 | 第19页 |
| ·总RNA提取 | 第19-20页 |
| ·总RNA纯度检测 | 第20页 |
| ·中间片段的克隆 | 第20-23页 |
| ·末端片段的扩增 | 第23-27页 |
| ·全长cDNA序列的获得与序列分析 | 第27页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第27-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-33页 |
| ·DNA与RNA的提取 | 第28页 |
| ·NKT6全长cDNA克隆的获得与序列分析 | 第28-30页 |
| ·NKT6编码蛋白的生物信息学分析 | 第30-32页 |
| ·NKT6基因组DNA的获得与分析 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33-35页 |
| ·NKT6的序列结构 | 第33-34页 |
| ·NKT6的功能域 | 第34-35页 |
| 第三章 NKT6编码蛋白的亚细胞定位 | 第35-40页 |
| ·材料与试剂 | 第35页 |
| ·方法 | 第35-37页 |
| ·载体构建 | 第35页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第35-36页 |
| ·农杆菌浸润法侵染本生烟 | 第36页 |
| ·烟草原生质体制备 | 第36页 |
| ·共聚焦显微镜观察 | 第36-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-39页 |
| ·载体构建 | 第37页 |
| ·下表皮细胞的亚细胞定位观察 | 第37页 |
| ·原生质体的亚细胞定位观察 | 第37-39页 |
| ·讨论 | 第39-40页 |
| 第四章 NKT6的表达特性分析 | 第40-46页 |
| ·材料与试剂 | 第40页 |
| ·试验材料 | 第40页 |
| ·试剂与仪器 | 第40页 |
| ·方法 | 第40-41页 |
| ·引物设计 | 第40页 |
| ·RNA的提取与反转录 | 第40页 |
| ·Real-Time PCR反应 | 第40-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-44页 |
| ·内参基因Actin检测结果 | 第41页 |
| ·的基因NKT6检测结果 | 第41页 |
| ·NKT6在不同组织中的表达分析 | 第41-42页 |
| ·NKT6在低钾胁迫下的表达分析 | 第42-43页 |
| ·NKT6在干旱胁迫下的表达分析 | 第43页 |
| ·NKT6在ABA处理下的表达分析 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| ·NKT6的组织表达分析 | 第44页 |
| ·NKT6在逆境胁迫下的表达分析 | 第44-46页 |
| 第五章 NKT6启动子的克隆与结构功能预测 | 第46-51页 |
| ·材料与试剂 | 第46页 |
| ·方法 | 第46-48页 |
| ·林烟草基因组DNA的提取 | 第46页 |
| ·NKT6启动子序列扩增 | 第46页 |
| ·NKT6启动子序列分析 | 第46-47页 |
| ·NKT6启动子对林烟草的遗传转化 | 第47-48页 |
| ·结果与分析 | 第48-50页 |
| ·NKT6启动子序列的获得 | 第48页 |
| ·NKT6启动子功能分析 | 第48-49页 |
| ·NKT6启动子转化植株的获得 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-51页 |
| 第六章 全文结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 个人简介 | 第60页 |
