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水稻抗虫相关基因OsPLDa4/5和OsJMT1的功能解析

致谢第1-9页
中文摘要第9-11页
Abstract第11-19页
第一章 文献综述第19-34页
   ·植物中的磷脂酶D第19-24页
     ·PLD基因家族第20-21页
     ·PLD介导的防御反应第21-22页
     ·PLD介导的信号途径第22-24页
   ·植物中的SABATH转甲基酶第24-31页
     ·SABATH转甲基酶的生物学功能第25页
     ·JMT研究进展第25-28页
     ·MeJA参与介导的JA信号途径第28-31页
     ·MeJA参与调控的植物生长发育和抗性反应第31页
   ·本研究的目的和意义第31页
   ·技术路线第31-34页
     ·OsPLDa4/5基因功能研究第31-32页
     ·JMT基因功能研究第32-34页
第二章 材料与方法第34-45页
   ·供试植物第34页
     ·供试水稻第34页
   ·供试昆虫第34-35页
     ·二化螟第34页
     ·二化螟绒茧蜂第34-35页
     ·褐飞虱第35页
   ·水稻处理第35-36页
     ·机械损伤处理第35页
     ·SSB处理第35页
     ·BPH处理第35页
     ·JA处理第35-36页
     ·SA处理第36页
     ·GLVs处理第36页
     ·MeJA处理第36页
   ·总RNA提取及cDNA合成第36页
   ·基因克隆及分析第36-37页
     ·OsPLDa4/5基因克隆第36-37页
     ·序列分析第37页
   ·定量PCR第37页
   ·纯合子筛选第37-38页
   ·Southern杂交第38页
     ·基因组DNA提取第38页
     ·转膜和杂交检测第38页
   ·信号分子测定第38-40页
     ·JA、SA含量测定第38-39页
     ·MeJA含量测定第39页
     ·乙烯含量测定第39页
     ·H_2O_2含量测定第39-40页
   ·LeA含量测定第40页
   ·TrypPIs测定第40页
   ·挥发物测定第40页
   ·GLVs含量测定第40-41页
   ·水稻茎秆抗穿刺能力测定第41页
   ·生物测定第41-43页
     ·SSB生长量测定第41页
     ·BPH的选择性和适应性第41-42页
     ·水稻耐害性测定第42页
     ·二化螟绒茧蜂的选择性第42-43页
   ·田间试验第43-44页
   ·数据分析第44-45页
第三章 OsPLDa4/5基因功能研究第45-72页
   ·结果分析第45-69页
     ·OsPLDa4/5基因的克隆第45-46页
     ·OsPLDa4/5基因的诱导表达谱第46-48页
     ·转基因植株的获得和纯和品系的鉴定第48-52页
     ·反义抑制OsPLDa4/5基因的水稻降低了虫害诱导的LeA水平和OsMPK3 mRNA的水平,但不影响过氧化氢水平第52-53页
     ·反义抑制OsPLDa4/5基因后影响水稻JA、SA、乙烯和GLV的合成第53-58页
     ·反义抑制OsPLDa4/5基因抑制了虫害诱导的蛋白酶抑制剂水平第58-61页
     ·反义抑制OsPLDa4/5基因降低了水稻对二化螟的抗性第61页
     ·反义抑制OsPLDa4/5基因降低了水稻对BPH的抗性第61-62页
     ·反义抑制OsPLDa4/5基因降低了水稻虫害诱导的挥发物及对寄生蜂的吸引第62-69页
   ·讨论第69-72页
第四章 OsJMT1基因功能的研究第72-90页
   ·结果分析第72-86页
     ·OsJMT1的克隆、鉴定、体外表达、诱导表达普和遗传转化第72-73页
     ·过量表达OsJMT1基因降低了水稻产量第73-74页
     ·过量表达OsJMT1基因增加了MeJA水平,降低了虫害诱导的JA水平,而不影响乙烯的释放第74-75页
     ·过量表达OsJMT1基因降低了水稻对二化螟的直接抗性第75-76页
     ·过量表达OsJMT1基因增强了水稻对褐飞虱的抗性第76-80页
     ·过量表达OsJMT1基因增加了二化螟诱导的HIPVs的释放以及JA、HIPVs相关合成基因及OsMPK3的表达第80-81页
     ·过量表达OsJMT1基因对大田害虫和天敌的影响第81-86页
   ·讨论第86-90页
     ·OsJMT1对水稻生长发育和产量的影响第86页
     ·OsJMT1影响JA水平进而调控了对二化螟的抗性第86-88页
     ·OsJMT1调控MeJA进而调控了对BPH的抗性第88-89页
     ·OsJMT1调控HIPVs进而调控间接防御反应第89-90页
第五章 总讨论第90-92页
   ·总讨论第90-91页
   ·创新之处第91页
   ·下一步研究计划第91-92页
参考文献第92-100页
附录第100-102页
 附表A 扩增OsPLDa4,OsPLDa5以及构建反义载体所用引物第100页
 附表B 定量PCR所用目的基因的引物和探针序列第100-102页
 附表C 博士期间主要工作总结第102页

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